RNAi基因沉默方法
大約在十年前，2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現，他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天，研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗，研究人員通常需要依賴化學合成的RNA 分子，而這個合成過程是相當昂貴的。本月《冷泉港實驗手冊》（ColdSpringHarborProtocols）上的一篇免費文章就這個問題進行了討論。該文章描述了一種能產生沉默RNA （esiRNA ）以有效靶向哺乳動物細胞中的任何基因的很劃算的方法。這篇文章（http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/16/pdb.prot4824 ,）描述了如何在體外利用酶合成RNA 分子，該方法利用克隆的感興趣基因作為模版。接著，這些RNA 分子被隨機分割成短的片段，純化后用于RN......閱讀全文
新方法讓“沉默”基因“說話”
基因的調控和表達對人類健康至關重要。越來越多證據表明，lncRNAs基因不僅參與腦發育、神經元分化等，而且與神經系統損傷后的修復過程有關。深入研究lncRNAs，對治療神經系統疾病具有重要意義。 研究人員通常使用活細胞內編碼基因的標記技術，將熒光蛋白精確插入蛋白編碼框研究基因的功能，但該方法往往
藥物使沉默基因恢復表達
密歇根大學綜合性癌癥中心研究人員報道，利用藥物將一個與癌細胞發育有關基因打開，為治療癌癥帶來新的希望。研究結果刊登于在線版《Oncogene》雜志。 Herceptin和Gleevec等流行新藥的靶標是引發癌癥的遺傳突變，但因為控制生長的基因被關閉了，癌癥還會復發。即便研究人員可以利用這些關閉的基
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 1. 病毒基因、人工轉入基因、轉座子等外源性基因隨機整合到宿主細胞基因組內，并利用宿主細胞進行轉錄時，常產生一些dsR
Nature重要成果：喚醒沉默的基因
多數的基因都具有兩個工作拷貝，一個遺傳自母親，一個來自于父親。但在少數情況下，一個基因會被打上印跡，使得這一拷貝被沉默掉。人們將之稱作為基因組印跡（genomic imprinting）（延伸閱讀：Nature重要發現：基因組印記的“擦除器” ）。如果活性拷貝發生突變，那么就會導致疾病產生，即便
RNA干擾（轉錄后基因沉默）實驗
RNA干擾（RNA interference, RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈RNA（double-stranded RNA，dsRNA）誘發的、同源mRNA高效特異性降解的現象。目前主要用于（1）特異性剔除或關閉特定基因的表達 （2）探索基因功能和傳染性疾病及惡性腫瘤的治療 （3）使
RNAi的發現和起源
首次發現dsRNA能夠導致基因沉默的線索來源于線蟲Caenorhabditis elegans的研究。>1995年，康乃爾大學的Su Guo博士和>Kemphues在試圖阻斷秀麗新小桿線蟲（C. ?elegans）中的par-1基因時，發現了一個意想不到的現象。她們本是利用反義RNA技術特異性地阻斷
核糖核酸干擾技術(RNAi技術)介紹
轉錄后基因沉默（PTGS， post- transcriptional gene silencing）-最初被認為僅限于矮牽牛花和其它一些植物中的奇異現象，是目前分子生物學研究中一個最熱門的話題。過去幾年中，科研工作者已明確轉錄后基因沉默現象普遍存在于動、植物中，在機體防御病毒入侵和轉座子沉默效應中
RNAi的機理與應用（二）
首先，外源的或體內產生的長雙鏈 RNA(long double stranded RNA, dsRNA) 首先被 Dicer 酶降解為長 21 ～ 23bp （堿基對）長度的小分子雙鏈 RNA （稱為小干擾核酸， small interfering RNA, siRNA), 這是一個依賴 A
RNAi的作用機制及siRNA的合成方法（一）
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是由雙鏈RNA(double strandedRNA， dsRNA)分子在mRNA水平關閉相應序列基因表達或使其沉默的過程。dsRNA可以抑制不同類型細胞的靶向基因表達，用特異性的抗體幾乎檢測不到靶向基因所表達的蛋白質。因此，RNAi技術又
中外合作發現與基因沉默有關的基因
中外科學家發現與基因"沉默"有關的特殊基因??? 奧地利格雷戈爾·門德爾植物分子生物學研究所日前宣布，一個包括該研究所、中國同濟大學、美國加利福尼亞大學等機構科學家在內的國際科研小組發現了一種特殊基因，沒有它，植物細胞內其他一些基因就只能保持沉默。??? 最新一期英國《自然》雜志網絡版發表
基因敲除，rna干擾，基因沉默有什么關系
基因敲除一般指永久的、不可逆轉的敲除/失活靶基因，目前其中一種熱門的，常見的基因敲除方法是CRISPR/Cas9，利用gRNA靶向靶基因并指導cas9切割基因雙鏈，形成移碼突變或片段敲除來完成基因敲除。基因沉默與基因敲除不同的地方在于，沉默可以是暫時性的、可逆轉的失活基因/抑制基因表達，基因可以是存
基因技術專題2
RNAi技術RNA干擾(RNA interference， RNAi)是近年來發現的研究生物體基因表達、調控與功能的一項嶄新技術，它利用了由小干擾RNA(small interfering RNA， siRNA)引起的生物細胞內同源基因的特異性沉默(silencing)現象，其本質是siRNA與對應
RNAi技術在功能基因組中的應用
在功能基因組研究中，需要對特定基因進行功能喪失或降低突變，以確定其功能。由于RNAi具有高度的序列專一性，可以特異地使特定基因沉默，獲得功能喪失或降低突變，因此RNAi可以作為一種強有力的研究工具，用于功能基因組的研究。將功能未知的基因的編碼區（外顯子）或啟動子區，以反向重復的方式由同一啟動子控制表
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素,Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析,所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析,來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
RNA剪接和基因沉默之間的聯系
為了識別在RNA干涉(RNAi)和微RNA介導的基因表達調控中所涉及的因素，Gary Ruvkun及其同事對86種真核生物進行了系統發生分析，所得到的候選物再用轉錄和蛋白組相互作用數據進行Bayesian分析，來估計它們參與小RNA調控的概率。所識別出的小RNA輔因子中大約一半是RNAi沉默所必需的
驚喜！Cell：沉默“垃圾”基因，阻止腫瘤生長
12月14日，《Cell》期刊最新發表一篇題為“Oncogenic Role of THOR, a Conserved Cancer/Testis Long Non-coding RNA”的文章揭示了一個長非編碼RNA——THOR，雖然不編碼蛋白質，但是卻對癌細胞有“直接影響”。科學家們最新發現
基因沉默的基本原理介紹
按照遺傳基本原理，如果某些基因能幫助父母生存和繁殖，父母就會把這些基因傳給后代。但一些研究表明，真實情況要復雜得多：基因可以被關閉或沉默，以應對環境或其他因素，這些變化有時也能從一代傳到下一代。 美國馬里蘭大學遺傳學家提出了一種特殊機制，父母通過這種機制可以把沉默基因遺傳給后代，而且這種沉默可
Cell重要成果：基因表達沉默新技術
來自加州大學舊金山分校的研究人員發現了一種更精確關閉基因的方法，這一成果將加速研究發現和生物技術進步，最終有可能應用于重編程細胞再生器官和組織。該策略借用了細菌的分子工具箱，利用了一種微生物用以抵抗病毒的蛋白質。研究人員在《細胞》(Cell)雜志上對這一技術進行了詳細描述。 關閉基因是癌癥
RNA干涉(RNA－Interference，RNAi)（1）
基因沉默（gene silencing）是生物體內特定基因由于種種原因不表達的遺傳現象。一方面，基因沉默是生物遺傳操作創造新的遺傳修飾生物（genetically modified organisms）的障礙，另一方面，它又是植物抵抗外來核酸入侵（如病毒）的一種反應，為植物抗病毒的遺傳育
RNAi干擾技術及應用進展研究（二）
1.2?RNAi的作用特點?(1)“共抑制”性。RNAi是雙鏈RNA介導的轉錄后基因沉默機制，它的啟動子相當活躍，外源基因可以轉錄，但不能正常積累mRNA；RNAi作用不僅使外源基因在轉錄后水平上失活，同時誘導與其同源的內源基因沉默。 (2) 高效性。試驗證明雙鏈RNA干擾mRNA?翻譯的效率比
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post tran
RNAi技術研究進展
RNA干擾(RNA interference，RNAi)是多種生物體內由雙鏈RNA(doublestranded RNA，dsRNA)介導同源mRNA 降解的現象。RNAi現象先后在不同生物中被發現，植物學家稱它為共抑制(co-suppression)或轉錄后基因沉默(post transcri
RNA干擾（RNAi）實驗成功要素
基因和siRNA選擇RNAi實驗的通量可從沉默單個感興趣的基因，到少量相關基因或同一個通路上的基因，到全基因組高通量篩選，取決于需要解決的生物學問題。siRNA的設計至關重要。轉染優化用于RNAi實驗的細胞應當有效轉染siRNA。轉染必須經過優化確保siRNA的濃度是最低的有效濃度以避免非特異性效應
RNAi表達載體構建
近年來的研究表明，一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達，誘使細胞表現出特定基因缺失的表型， 稱為RNA干擾（RNA interference，RNAi）。siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分子，能夠
RANi術語表
RNAi?RNA干擾是最近發現的一種功能工具。當RNA導入一個細胞時，最終會引起細胞內互補mRNA的降解，從而導致基因功能活性的阻斷。PTGS?轉錄后基因沉默（post transcriptional gene silencing）；一種首先在植物中確定，然后發現在動物中也存在的現象。盡管PTGS最
RNAi表達載體構建（一）
近年來的研究表明,一些短片斷的雙鏈RNA可以通過促使特定基因的mRNA降解來高效、特異的阻斷體內特定基因表達,誘使細胞表現出特定基因缺失的表型, 稱為RNA干擾（RNA interference,RNAi）.siRNA（small interfering RNAs）就是這種短片斷雙鏈RNA分
RNAi的機理與應用
RNAi 技術的機理與應用 關于 RNAi 技術 RNA 干擾（RNA interference,RNAi）是指在進化過程中高度保守的、由雙鏈 RNA( double-stranded RNA，dsRNA) 誘發的、同源 mRNA 高效特異性降解的現象。 RNAi 受到追捧的
RNAi干擾技術及應用進展研究（四）
3.5?轉基因研究在動植物的轉基因試驗中，?經常發生基因沉默。因此，?對轉基因沉默機制的探索可以為在轉基因研究中避免基因沉默提供對策。在轉基因植物研究中避免基因沉默可提高試驗成功率，且節省時間，而在大型動物轉基因研究中避免基因沉默可節約成本，提高產率。?3.6?干細胞研究在干細胞研究方面，在dsRN