RNAi基因沉默方法
大約在十年前,2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現,他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天,研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗,研究人員通常需要依賴化學合成的RNA 分子,而這個合成過程是相當昂貴的。本月《冷泉港實驗手冊》(ColdSpringHarborProtocols)上的一篇免費文章就這個問題進行了討論。該文章描述了一種能產生沉默RNA (esiRNA )以有效靶向哺乳動物細胞中的任何基因的很劃算的方法。這篇文章(http://www.cshprotocols.org/cgi/content/full/2007/16/pdb.prot4824 ,)描述了如何在體外利用酶合成RNA 分子,該方法利用克隆的感興趣基因作為模版。接著,這些RNA 分子被隨機分割成短的片段,純化后用于RN......閱讀全文
RNAi基因沉默方法
大約在十年前,2006年諾貝爾生理/醫學獎得主CraigMello和AndrewFire發現,他們能夠將短RNA 分子插入到線蟲中并沉默特定基因的表達。今天,研究人員也常常使用這種強大的RNA 干擾方法來研究哺乳動物系統中的特定基因功能。為了進行這種基因沉默實驗,研究人員通常需要依賴化學合成的RNA
RNAi及基因沉默原理
RNA 干擾(RNAinterference,RNAi)是由雙鏈RNA (double-strandedRNA,dsRNA) 引發的轉錄后基因靜默機制。其原理是:RNaseIII 核酶家族的Dicer,與雙鏈RNA 結合,將其剪切成21 - 25nt 及3'端突出的小干擾RNA (small
Cell:不讓基因沉默的RNAi途徑
“這項研究的獨特之處在于――之前,我們知道RNAi能用于調控基因,或者完全關閉基因。而這項研究中,我們發現的是一種通過piRNA途徑,保護基因不被沉默的RNAi機制,這種機制能作為一種保護形式,讓基因得以表達。” ――Darryl Conte Jr.博士 生物機體采用了多種戰略方法來
通過RNAi使基因特異性沉默
RNA interference (RNAi) is a phenomenon in which the introduction of double-stranded RNA (dsRNA) into a diverse range of organisms and cell types caus
RNAi產生的基因沉默與生物學功能
RNAi所產生的基因沉默具有如下特點:1)高效性。 Elbashir等在研究中發現分別為25 nmol/L與100 nmol/L的起始雙鏈RNA產生的結果是一樣的,只是高濃度起始的更有效些。將雙鏈RNA濃度降低到1.5 nmol/L時產生的基因沉默效果變化不大,只有當濃度降低到0.05 nm
沉默是金:-強大的RNAi篩選技術
在過去,想要發現哺乳動物細胞的重要生理過程,通常需要通過化學突變或將轉座子插入到基因組中對細胞內的基因進行干擾。但是,大約10年前,RNA 干擾(RNAi)技術的出現改變了這種狀態。這項技術的核心是,設計一個短鏈RNA,使其在轉錄過程中與目的基因序列互補結合,從而阻止目的基因翻譯成蛋白。RN
基因沉默的概念
基因沉默是指在真核生物(植物、動物、真菌)中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。
什么是基因沉默?
基因沉默是指在真核生物(植物、動物、真菌)中保守的由雙鏈RNA誘導的鑒定和破壞其細胞質中異常變異或過表達的RNA的一種機制。
與基因沉默相關特殊基因
奧地利格雷戈爾·門德爾植物分子生物學研究所日前宣布,一個包括該研究所、中國同濟大學、美國加利福尼亞大學等機構科學家在內的國際科研小組發現了一種特殊基因,沒有它,植物細胞內其他一些基因就只能保持沉默。最新一期英國《自然》雜志網絡版發表了這個國際科研小組的論文。這一科研小組發現的特殊基因名為RDM1,它
基因沉默的主要類型
基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修飾或染色體異染色質化等原因使基因不能正常轉錄;PTGS是啟動了細胞質內靶mRNA序列特異性的降解機制。有時轉基因會同時導致TGS和PTGS。
沉默等位基因定義
中文名稱沉默等位基因英文名稱silent allele定 ?義通常不表達,但在腫瘤細胞中呈現轉錄活性的基因。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
與基因沉默相關特殊基因介紹
奧地利格雷戈爾·門德爾植物分子生物學研究所日前宣布,一個包括該研究所、中國同濟大學、美國加利福尼亞大學等機構科學家在內的國際科研小組發現了一種特殊基因,沒有它,植物細胞內其他一些基因就只能保持沉默。最新一期英國《自然》雜志網絡版發表了這個國際科研小組的論文。這一科研小組發現的特殊基因名為RDM1,它
簡述與基因沉默相關特殊基因
奧地利格雷戈爾·門德爾植物分子生物學研究所日前宣布,一個包括該研究所、中國同濟大學、美國加利福尼亞大學等機構科學家在內的國際科研小組發現了一種特殊基因,沒有它,植物細胞內其他一些基因就只能保持沉默。 最新一期英國《自然》雜志網絡版發表了這個國際科研小組的論文。這一科研小組發現的特殊基因名為RD
與基因沉默相關特殊基因介紹
奧地利格雷戈爾·門德爾植物分子生物學研究所日前宣布,一個包括該研究所、中國同濟大學、美國加利福尼亞大學等機構科學家在內的國際科研小組發現了一種特殊基因,沒有它,植物細胞內其他一些基因就只能保持沉默。最新一期英國《自然》雜志網絡版發表了這個國際科研小組的論文。這一科研小組發現的特殊基因名為RDM1,它
RNAi引起的基因敲除
RNAi引起的基因敲除:由于少量的雙鏈RNA就能阻斷基因的表達,并且這種效應可以傳遞到子代細胞中,所以RNAi的反應過程也可以用于基因敲除。
沉默等位基因的定義
中文名稱沉默等位基因英文名稱silent allele定 義通常不表達,但在腫瘤細胞中呈現轉錄活性的基因。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
沉默等位基因的定義
中文名稱沉默等位基因英文名稱silent allele定 ?義通常不表達,但在腫瘤細胞中呈現轉錄活性的基因。應用學科遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
植物基因沉默怎么搞?
“植物的種子時期,大量基因都被沉默,直到植物成年以后才按需活化,”植物生化和光合作用研究所(IBVF)的Myriam Calonje Macaya博士解釋道。細胞分裂后,基因沉默狀態還會傳遞給子細胞,從而建立細胞記憶。多梳蛋白家族(Polycomb-group proteins,PcG蛋白)參與
基因沉默的基本類型
基因沉默,主要有轉錄前水平的基因沉默(TGS)和轉錄后水平的基因沉默(PTGS)兩類:TGS是指由于DNA修飾或染色體異染色質化等原因使基因不能正常轉錄;PTGS是啟動了細胞質內靶mRNA序列特異性的降解機制。有時轉基因會同時導致TGS和PTGS。
基因沉默臨床研究獲成功
科學家利用納米技術成功實現臨床基因沉默,圖為siRNA。 利用小干涉RNA(siRNA)抑制特殊基因表達的治療潛能已經得到廣泛認可。然而,將這項技術成功轉化至臨床還面臨幾項挑戰,例如實現藥物的全身釋放。如今,美國科學家在《自然》雜志上報告了利用一個靶向納米粒子將一個siRNA向癌癥
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DNA 模板 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?試劑、試劑盒d
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料 pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒 dNTP 混合物DNA 聚合酶(Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材 PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟 一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 c
RNA介導的基因沉默實驗
實驗材料pGEM-T 載體DNA 模板試劑、試劑盒dNTP 混合物DNA 聚合酶(Sigma) 及配套緩沖液限制酶儀器、耗材PCR 純化試劑盒或柱子實驗步驟一、篩選目的基因片段的參數1. 序列( 1 ) 構建一個指定的 RNA 沉默載體首先要進行生物信息學分析。根據目的基因對應的已知 cDNA 序列
Science發現全新基因沉默機制
科學家在研究脆性X綜合癥的過程中,發現了一種基因沉默的全新機制,文章于二月二十七日發表在Science雜志上。研究顯示,阻斷這一沉默機制的藥物可以防止脆性X綜合癥的發生。 脆性X綜合癥是遺傳性智力障礙和孤獨癥最常見的原因,這種疾病在男孩中的發病率更高。二十多年以來人們一直知道,脆性X綜合癥
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關;② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關;② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關;② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關;② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNA干擾RNAi的生物特性
RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關;② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。RNAi抵御病毒感染在擬南
RNAi的生物特性介紹
1、RNAi抑制轉座子活性兩方面的證據提示轉座子活性的抑制與siRNA有關 ① 發現蠕蟲mut-7 基因參與RNAi 并且與轉座子的轉座抑制有關; ② 在果蠅中,參與RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突變將導致該基因引起的基因沉默的缺失,同時提高了反轉錄轉座子活性。 2、R