等溫擴增時出現假陽性的應對策略
等溫擴增技術作為一種核酸分子診斷技術，從誕生之日起就不斷受到研究者的青睞，但也少不了質疑，甚至摒棄。引起這種截然相反的態度的原因在于等溫擴增技術自身所存在的缺陷。而最為突出的一點是，在建立方法或者實際樣本檢測的過程中，等溫擴增技術引起假陽性結果的概率相對較高，使得其實際應用范圍變窄，未能真正顯示出其檢測優勢。因此，推出這經驗篇來回答“當等溫擴增出現假陽性時應該如何應對？”。 01假陽性現象 假陽性是指檢測陰性材料得到陽性結果。如果一次實驗中的幾個陰性對照中出現一個或幾個陽性結果，提示本次實驗中其它標本的檢測結果可能有假陽性。實驗中設立的陰性對照可提示有無假陽性結果出現。 02 造成假陽性的原因 1. 樣品間交叉污染：樣本污染主要有收集樣本的容器被污染，或樣本放置時，由于密封不嚴溢于容器外，或容器外粘有樣本而造成相互間交叉污染；樣本核酸模板在提取過程中，由于吸樣*污......閱讀全文
等溫擴增時出現假陽性的應對策略
等溫擴增技術作為一種核酸分子診斷技術，從誕生之日起就不斷受到研究者的青睞，但也少不了質疑，甚至摒棄。引起這種截然相反的態度的原因在于等溫擴增技術自身所存在的缺陷。而最為突出的一點是，在建立方法或者實際樣本檢測的過程中，等溫擴增技術引起假陽性結果的概率相對較高，使得其實際應用范圍變窄，未能真正顯示出其
分子診斷經驗篇：如何應對等溫擴增時出現的假陽性問題
等溫擴增技術作為一種核酸分子診斷技術，從誕生之日起就不斷受到研究者的青睞，但也少不了唏噓、質疑，甚至摒棄。引起這種截然相反的態度的原因在于等溫擴增技術自身所存在的缺陷。而最為突出的一點是，在建立方法或者實際樣本檢測的過程中，等溫擴增技術引起假陽性結果的概率相對較高，使得其實際應用范圍變窄，未能真正顯
等溫擴增，存在“假陽性”的Bug？
等溫擴增技術作為一種核酸分子診斷技術，從誕生之日起就不斷受到研究者的青睞，但也少不了質疑，甚至摒棄。引起這種截然相反的態度的原因在于等溫擴增技術自身所存在的缺陷。而最為突出的一點是，在建立方法或者實際樣本檢測的過程中，等溫擴增技術引起假陽性結果的概率相對較高，使得其實際應用范圍變窄，未能真正顯示出其
基因擴增PCR的擴增結果假陽性的原因
出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。?引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。?靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個
現行Hp檢測可能出現的假陽性
現行Hp檢測可能出現的假陽性是檢驗技師考試中所包含的內容。醫學教育網收集整理了部分相關信息供學員參考。 意大利Brandi等報告，在低酸患者胃液及胃黏膜中發現非幽門螺桿菌（Hp）尿素酶陽性細菌。該結果表明，在臨床上對低酸患者采用胃黏膜快速尿素酶試驗（RUT）及尿素呼氣試驗（C-UBT）診斷Hp
PCR－反應出現假陽性結果原因
1 ) 引物設計不合適： 選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而，在進行PCR擴增時，擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出現假陽性。需重新設計引物。 2 ) 靶序列或擴增產物的交叉污染： 這種污染有兩種原因： 一是整個基因組或大片段的交叉污染，導致假
菌落pcr會出現假陽性結果嗎
最近做酶切連接轉化，最后做鑒定時，以菌落為模板進行PCR時可以見到有目的條帶;當把菌落接種到LB液擴菌后，以菌液為模板進行PCR時卻什么東東都沒有?請問會是什么原因啊?多多指教啊!建議重新以菌落為模板進行PCR檢測，再重新以菌液為模板進行PCR檢測，因為菌落或者菌液PCR假陽性的幾率還是比較高的。但
梅毒血清檢查會出現假陽性嗎
會有假陽性的可能，RPR試驗，即為檢測類脂質抗體的實驗；而TPHA則為直接檢測梅毒螺旋體的實驗。因RPR是檢測類脂質抗體，而不是直接檢測抗梅毒螺旋體抗體的實驗，因而無特異性，凡能導致產生類脂質抗體的疾病，均能使RPR陽性。
造成HBsAg檢測出現假陽性的幾種原因
造成HBsAg檢測出現假陽性的原因可能會有以下幾種：? 1． 待測標本溶血或含有血細胞。? 2． 待測標本長菌或其它原因混濁。? 3． 洗板時洗滌液溢出，污染其它孔。? 4． 洗板機內部管道有真菌生長。? 5． 洗板機設置不當。? 6． 手工洗板時，拍干用紙未更換。? 7． 實驗中，實際孵育時間過長
核酸擴增—環介導的等溫擴增法
2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術，即環介導等溫擴增技術，英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的
為什么梅毒化驗會出現假陽性呢？
?梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種性病。感染梅毒后，人體內會產生兩類抗體，一類是直接針對梅毒螺旋體的抗體，另一類則是針對類脂質的抗體。針對類脂質的抗體因不直接針對梅毒螺旋體，因此無特異性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理狀況的改變，體內也可能產生低滴度的抗類脂質抗體。診斷梅毒時，所做的梅毒血清學檢查
哪些原因可致HBsAg檢測出現假陽性？
哪些原因可致HBsAg檢測出現假陽性？:乙型肝炎病毒HBsAg檢測假陽性原因分析目前國內臨床多采用ELISA 法檢測乙型肝炎血清標志物，它以免疫學反應為基礎，將抗原抗體的特異性反應與www.med126.com酶對底物的高效催化作用相結合，通過洗滌除去多余游離反應物，以保證實驗結果特異性和穩定性，但
為何B型鈉尿肽(BNP)檢測出現假陽性？
? ? 案例經過?? ?61歲的林大伯平時無煙酒嗜好，喜好散步。近4個月來，林大伯每于飯后自感胸悶，平時常感頭暈。在省城大醫院就診時，查血壓140/92mmHg，患者一般病史及臨床檢查都可，查血液心肌酶譜、肌鈣蛋白I、血液生化和凝血指標均正常，僅D-二聚體輕度增高，甘油三酯（TG）195mg/dl。
elisa－法檢測HIV為什么總是出現假陽性
造成ELISA檢測HIV假陽性的原因主要有3個:1.試劑影響因素,可能與試劑盒包被抗原組合不同有關。目前第3代雙抗原夾心法試劑的質量優于第2代間接法試劑，具有更好的敏感性和特異性，尤其對感染早期的弱陽性標本,主要包被的抗原的種類及比例，純度有關系。2.患者自身情況的影響， 患者體內特有的內源件物質可
PCR反應假陰性，不出現擴增條帶的原因分析
PCR反應的關鍵環節有①模板核酸的制備,②引物的質量與特異性,③酶的質量及, ④PCR循環條件。尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究。?模板:①模板中含有雜蛋白質,②模板中含有Taq酶抑制劑,③模板中蛋白質沒有消 化除凈,特別是染色體中的組蛋白,④在提取制備模板時丟失過多,或吸入酚。⑤模 板核酸變性
Trust試驗如何避免誤差和假陽性結果的出現？
嚴格控制實驗條件：包括溫度、時間和pH值等，以確保實驗結果的準確性和可靠性。 使用高質量的試劑盒：選擇正規廠家生產的試劑盒，并注意保存條件和有效期。 避免交叉污染：在操作過程中要注意避免樣品之間的交叉污染，使用干凈的移液器和試管等器具。 對實驗結果進行嚴格的解讀和分析：根據凝集程度判斷是否
尿液分析儀檢測出現假陽性的原因
假陽性。即尿液分析儀潛血反應陽性，鏡檢陰性，其常見原因有： （1）血紅蛋白（Hb） 尿液分析儀潛血反應既能與完整的RBC發生陽性反應，也可與RBC溶解釋放的Hb發生陽性反應，而顯微鏡只能檢出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量極微，定性為陰性。疾病時，尿中Hb有兩個來源：一是發生血管內溶血，血
PCR儀PCR結果出現假陽性是什么原因？
假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔
什么酶重組等溫擴增技術？
通過模擬生物體遺傳物質自身擴增復制的原理,將來源于細菌,病毒和噬菌體的特定重組酶、外切酶、聚合酶等多酶體系進行改造突變并篩選其功能,通過不同的核酸擴增反應體系進行優化組合,從而獲得核心的重組等溫擴增體系,建立特殊擴增反應體系,在37-42℃恒溫條件下,可將微量DNA/RNA的特異性區段在數分鐘內擴增
核酸等溫擴增技術及其應用
據微生物學家的估計，采用培養技術，僅有約1%的細菌可以培養。在過去的一個世紀里，以聚合酶鏈反應（PCR）為代表的基于核酸的檢測技術發展迅速，為其他病原體的精確檢測診斷提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis發明的PCR技術是20世紀80年代分子生物學領域的一項革命性突破。也許他本人當時也沒有想
環介導等溫擴增技術原理
環介導等溫擴增(loop-mediated isothermal amplification)，是一個比較公認的等溫擴增方法，現如今等溫擴增法很多，比如RCA,NASBA,RPA...如果可以，你可以參考這篇文獻：Loop-mediated isothermal amplification inte
核酸等溫擴增技術有什么
環介導等溫擴增技術（LAMP）。依賴于核酸序列的擴增技術（NASBA）。滾環擴增技術（RCA）。單引物等溫擴增技術（SPIA）。依賴于解旋酶的等溫擴增技術（HAD）。鏈接代擴增技術（SDA）。快速等溫檢測放大技術（RIDA）。切刻內切酶核酸恒溫擴增技術（NEMA）。核酸等溫擴增技術，無論是在實際操作
LAMP（環介導等溫擴增）技術
PCR方法在人類及動植物疾病基因診斷、食品分析和環境監測等領域發揮著舉足輕重的作用，其靈敏度高、特異性好，是目前最精準的基因診斷方法。然而PCR方法操作起來較復雜，對儀器和人員要求比較高，不適合基層或現場快速診斷，因此在國內的推廣速度并不是很快。2000年日本學者Notomi在Nucleic Aci
等溫擴增技術的原理及應用
等溫擴增技術（isothermal amplification technology，ITA）是近年來發展起來的基于恒溫擴增的新型核酸擴增技術,主要包括環介導等溫擴增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP)[1]、交叉引物擴增（crossing pr
PCR反應出現假陰性結果無擴增條帶原因分析
PCR 反應的關鍵環節有 ： ① 模板核酸的制備; ② 引物的質量與特異性; ③ 酶的質量; ④ PCR循環條件; 尋找原因亦應針對上述環節進行分析研究 ， 可能出現的原因有以下幾點： 1 ) 模板： ① 模板中含有雜蛋白質; ② 模板中含有Taq酶抑制劑; ③
避免假陽性結果
2008年9月美國應用生物系統公司推出超高靈敏度的5500三重四極桿串聯質譜系統和Qtrap5500三重四極桿串聯質譜-線性離子阱質譜復合系統。這為要求超高靈敏度的藥物研發、食品安全殘留檢測、環境激素分析、毒物分析等相關領域提供了可靠的技術平臺。該系統以獨特的質譜數據采集方式——四極桿-
等溫擴增到底行不行？
最近又看到一些同行寫的關于等溫擴增的文章。不禁想起幾年前看到的RPA技術介紹。當時第一次看到這個技術的時候，簡直可以用“震驚”、“驚艷”來形容。擴增速度真快啊，十幾分鐘就能出結果，比現在吭哧吭哧做PCR豈不是方便多了！可是幾年過去了，似乎也沒看到基于RPA技術的臨床產品上市。說真的是有點失望的。就像
什么是PCR假陽性？
假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔，防止
PCR的假陽性和假陰性如何解釋
假陽性假陽性是指出現的 PCR 擴增條帶與目的靶序列條帶一致，有時其條帶更整齊，亮度更高。產生的原因有：①引物設計不合適：選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性，因而在進行 PCR 擴增時，擴增出的 PCR 產物為非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或擴增產物的交叉污染。解決方法有：操作輕柔
PCR實驗中假陽性和假陰性的防治
1，標本采集必須合格，否則不做。2，嚴格按照操作規程，避免人為實驗誤差。3，用于操作的各種儀器，加樣器，必須通過審核驗收，儀器選貴的，進口的！4，最主要的就是試劑，選擇公認的，優質試劑