免疫熒光簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。......閱讀全文
免疫熒光簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique )又稱熒光抗體技術,是標記免疫技術中發展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質結合,利用抗原抗體反應進行組織或細胞內抗原物質的定位。
免疫熒光技術簡介
一些基本概念和基本知識:1 熒光免疫測定技術的概念:將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記,試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術,稱為免疫熒光素技術。2.技術分類:??⑴熒光抗體技術(熒光顯微鏡技術)? ?? ?抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判? ?? ?定結果的檢測
免疫熒光技術簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique)又稱熒光抗體技術,根據抗原抗體反應的原理,將熒光素偶聯到已知的抗原或抗體上制成熒光探針,與血清或體液、細胞、組織中存在的相應抗體(或抗原)結合,從而對這些組織中存在的抗原或抗體進行定性、定量和(或)定位的檢測。抗體的選擇
免疫熒光技術簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique) 1941年,Coons等于首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescent antibody technique)。該技術的主要特點是:特異性強、敏
免疫熒光技術簡介
免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的
免疫熒光技術簡介
免疫熒光技術(Immunofluorescence technique)1941年,Coons等于首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescent antibody technique)。該技術的主要特點是:特異性強、敏感性
免疫熒光技術(immunofluorescent-technique)簡介
1、熒光免疫測定技術的概念將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記,試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術,稱為免疫熒光素技術。2、技術分類(1)熒光抗體技術(熒光顯微鏡技術):抗原抗體反應后,利用熒光顯微鏡判定結果的檢測方法。(2)免疫熒光測定技術:抗原抗體反應后,利用
簡介免疫熒光定量檢測原理
將特異的熒光抗體先固體于硝酸纖維素膜的某一區帶,當該干燥的硝酸纖維素一端滴加樣品后,由于毛細管作用,樣品將沿著該膜向前移動,當移動至固定有抗體的區域時,樣品中相應的抗原即與該熒光體發生特異性結合,隨著進一步的層析作用,用此抗原的另一個抗體對此復合物進行捕捉,多余的熒光抗體用其二抗進行捕捉,兩次捕
免疫組化方法免疫熒光方法簡介
是最早建立的免疫組織化學技術。它利用抗原抗體特異性結合的原理,先將已知抗體標上熒光素,以此作為探針檢查細胞或組織內的相應抗原,在熒光顯微鏡下觀察。當抗原抗體復合物中的熒光素受激發光的照射后即會發出一定波長的熒光,從而可確定組織中某種抗原的定位,進而還可進行定量分析。由于免疫熒光技術特異性強、靈敏
關于免疫熒光技術的方法原理的簡介
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。 直接法 將
關于熒光素免疫熒光層析技術的簡介
熒光素是指具有熒光特性的有機染料。1942年Coons等首次報道了異氰酸熒光素標記抗體用于檢測鼠組織切片中肺炎球菌抗原分布的研究,由此出了免疫熒光技術。后來,為了改進異氰酸熒光素的性能,Ruggas等合成了性質穩定、毒性較低的異硫氰酸熒光素。自Marshall等改良了熒光抗體標記技術后,熒光免疫
免疫熒光
Immunofluorescence Technique?(Spector Lab)protocol for immunofluorescence on cells??Immunofluorescence Protocol?(Walter Steffen)Methanol fixationForma
免疫熒光原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
免疫熒光概述
免疫熒光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記而獲得成功。這種以熒光物質標記抗體而進行抗原定位的技術稱為熒光抗體技術(fluorescentantibodytechnique)。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片,置于合適的培養皿中。如 13 mm 蓋玻片可用24 孔
免疫熒光技術
免疫熒光技術是標記免疫技術中發展最早的一種.它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術的基礎上建立起來的一項技術。Coons等于1941年首次采用熒光素進行標記抗體獲得成功。經過幾十年的發展,該技術已相當成熟。 用熒光抗體示蹤或檢查相應抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標記物示蹤或檢查相應抗體的
免疫熒光技術
免疫熒光技術1)??直接法1.標本經固定后,PBS洗滌3×3分鐘。2.加熒光素標記的抗體,濕盒內37℃孵育50分鐘。3.PBS洗滌3×3分鐘。4.0.1%伊文氏蘭復染。5.PBS洗3次,蒸餾水洗2次,每次3分鐘,以除去NaCl結晶。6.緩沖甘油封片,鏡檢。?2)??間接法1.標本固定后,PBS洗滌3
間接免疫熒光
方案16.11 間接免疫熒光實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片產生一抗種屬的二抗豬血清或其他封閉劑D-PBSA試劑、試劑盒新鮮制備的固定劑用含10%的FBS培養液封固劑實驗步驟1. 用 D-PBSA 洗滌長有細胞的蓋玻片,置于合適的培養皿中。如 1
免疫熒光原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。 直接法 將
間接免疫熒光
中文名稱間接免疫熒光英文名稱indirect immunofluorescence定 義直接免疫熒光技術的改進。待檢細胞首先用未標記的抗體處理,使之與特異的抗原形成復合物,然后再用抗抗體的熒光標記抗體著色,即可檢測出特異抗原在細胞中的存在部位,具有熒光增強效應。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞
免疫熒光技術
基本原理 將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。試劑與儀器l??????????磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):
間接免疫熒光
實驗方法原理固定細胞,順序加入一抗和二抗,通過 UV 光觀察。實驗材料細胞培養在蓋玻片 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?產生一抗種屬的二抗 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
免疫熒光技術
實驗方法原理 直接法是以熒光素標記的抗體直接與標本內的抗原反應,形成抗原—熒光素標記抗體復合物。根據熒光的分布位置及強度,確定相應抗原的存在與否及其所在部位。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBS伊文氏蘭儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. 標本經固定后,PBS洗滌3×3 分鐘;2. 加熒光素標記的抗體,濕
直接免疫熒光
中文名稱直接免疫熒光英文名稱direct immunofluorescence定 義直接用熒光標記抗體來研究特異性抗原在細胞內定位的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
間接免疫熒光和直接免疫熒光染色方法的異同
免疫熒光細胞化學方法的原理是根據抗原抗體反應的規律,把已知的抗原或抗體標記上熒光素,制成熒光抗原或抗體,然后以它作為探針來檢測組織或細胞內的相應物質。方法具體種類有直接法、間接法、夾心法和補體法等。在熒光顯微鏡下,根據其形成復合物所發的熒光,來確定判斷檢測物的來源、性質和部位。?1、直接法:這是最早
直接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的異同
1、接免疫熒光和間接免疫熒光染色方法的不同:直接免疫熒光的實驗方案通常較短,因為它只需要一個標記步驟。間接免疫熒光使用偶聯二抗檢測一抗會增加額外的操作步驟。直接免疫熒光方法的實驗方案步驟較少,更簡單。間接免疫熒光方法中必須選擇適當的二抗,增加了復雜度。這種情況在需要使用多個二抗的多色實驗中尤為突出,
免疫熒光技術特點
該技術的主要特點是:特異性強、敏感性高、速度快。主要缺點是:非特異性染色問題尚未完全解決,結果判定的客觀性不足,技術程序也還比較復雜。 熒光免疫法按反應體系及定量方法不同,還可進一步分做若干種。與放射免疫法相比,熒光免疫法無放射性污染,并且大多操作簡便,便于推廣。國外生產的TDM用試劑盒,有相