核酸擴增—連接酶鏈反應
LCR由基因擴增技術和連接酶方法結合而成，是繼PCR之后的快速DNA擴增方法。與PCR不同的是，LCR采用2對寡核苷酸探針，每對寡核苷酸探針與變性正負靶鏈雜交時處于相鄰的位置，兩者之間形成一個缺口，只有當它們與靶DNA堿基配對且3'與5'端相鄰位置均正確時，DNA連接酶才能將其連接起來。一旦2個探針相連接，連接產物可在下一輪循環中充當模板，通過變性與連接的重復循環，靶DNA鏈片段呈指數擴增。擴增后應用微粒子酶免疫技術(MEIA)對擴增產物進行測定，進一步提高了檢測的敏感性和特異性。 LCR技術具有相當高的敏感性和特異性，其敏感性與PCR相同，由于LCR擴增的產物是正確退火并連接的寡核苷酸探針，所以其特異性高于PCR，且具有無創傷性采樣、操作簡單、分析時間短、無污染性、測定結果準確等特點。......閱讀全文
核酸擴增—連接酶鏈反應
LCR由基因擴增技術和連接酶方法結合而成，是繼PCR之后的快速DNA擴增方法。與PCR不同的是，LCR采用2對寡核苷酸探針，每對寡核苷酸探針與變性正負靶鏈雜交時處于相鄰的位置，兩者之間形成一個缺口，只有當它們與靶DNA堿基配對且3'與5'端相鄰位置均正確時，DNA連接酶才能將其連
核酸擴增—普通聚合酶鏈反應
把DNA分子變性后解鏈，兩條單鏈DNA分別經復性與兩條引物互補結合，在4種dNTP存在和合適的條件下，由DNA聚合酶催化引物由5'到3'擴增延長，每經過變性、復性、延伸一個循環，模板DNA增加1倍，新合成的DNA鏈又可作為下一個循環的模板，經過30-50個循環，可使原DNA量增加
何謂連接酶鏈反應？
連接酶鏈反應(ligase chain reaction, LCR)屬于一種探針擴增技術，是依賴靶核苷酸序列的寡核苷酸探針的連接技術。這種方法應用4種寡核苷酸探針(即兩對互補的引物)，當它們在體外結合到靶序列上以后，用耐熱DNA連接酶將它們連接起來。兩條探針被連接上以后又可以作為新的模板。由于使
連接酶鏈反應的原理
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上，引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增，又可鑒定D N A 異常，與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。
連接酶鏈反應的特點和應用
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上，引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增，又可鑒定D N A 異常，與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。
連接酶鏈反應的特點和應用
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上，引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增，又可鑒定D N A 異常，與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。
連接酶鏈反應的研究與發展
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是Backman1997年為檢出靶基因序列中的點突變而設計發明，并申報了ZL.1988年Landegren也進行了該項研究。1988年Backman等又因分離熱穩定的連接酶，而申報ZL，1991年Backman和Barany分別用耐
連接酶鏈反應的發展過程
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是Backman1997年為檢出靶基因序列中的點突變而設計發明，并申報了ZL.1988年Landegren也進行了該項研究。1988年Backman等又因分離熱穩定的連接酶，而申報ZL，1991年Backman和Barany分別用耐
關于基因擴增技術—聚合酶鏈反應的條件模板核酸的介紹
基因擴增技術—聚合酶鏈反應可以以DNA或RNA為模板進行核酸的體外擴增。不過RNA的擴增首先逆轉錄成cDNA后才能進行PCR循環。不同來源的核酸標本必須經處理后才能用于PCR的擴增，處理不當或處理過程中DNA掉失都會導致PCR擴增失敗。采集標本方法不當，未能獲得所要檢測的靶DNA都會導致出現假陰
核酸檢測是檢測什么
1、核酸檢測,即核酸擴增檢測技術泛指以擴增DNA或RNA為手段,從而篩查特定基因的檢測技術,如聚合酶鏈反應(PCR)、連接酶鏈反應(LCR)、轉錄依賴的擴增反應(TMA)等。2、核酸檢測試劑是基于核酸擴增檢測技術的體外診斷試劑，目前已經用于病原體檢測、特定疾病的早期診斷和體里物質的型別鑒定等。
DNA擴增的反應方法
在研究或診斷中，DNA擴增可以通過以下方法進行：聚合酶鏈反應（PCR）：一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸，重復復制靶標DNA片段的方法?[2]??。連接酶鏈反應（LCR）：一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條，連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此，LCR使用兩種酶：
人工基因擴增的方法
在研究或診斷中，DNA擴增可以通過以下方法進行：聚合酶鏈反應（PCR）：一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸，重復復制靶標DNA片段的方法?[2]??。連接酶鏈反應（LCR）：一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條，連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此，LCR使用兩種酶：
人工基因擴增的方法介紹
在研究或診斷中，DNA擴增可以通過以下方法進行：聚合酶鏈反應（PCR）：一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸，重復復制靶標DNA片段的方法。連接酶鏈反應（LCR）：一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條，連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此，LCR使用兩種酶：DNA聚合酶
關于人工基因擴增的介紹
在研究或診斷中，DNA擴增可以通過以下方法進行： 聚合酶鏈反應（PCR）：一種簡單、廉價、可靠的通過聚合核苷酸，重復復制靶標DNA片段的方法 [2] 。 連接酶鏈反應（LCR）：一種擴增核酸獲得探針的基因擴增方法。對于兩條DNA鏈中的每一條，連接酶連接兩個部分探針成實際的一條。因此，LCR使
連接酶鏈反應的基本原理
LCR ，即在D N A?連接酶的作用下，通過連接與模板D N A互補的兩個相鄰寡核苷酸鏈，快速進行D N A 片段擴增。D N A連接酶可將與模板D N A 鏈互補的兩條毗鄰寡核苷酸片段連接起來，兩條寡核苷酸鏈接頭處存在堿基錯配則阻止連接反應的發生。所以通過連接酶反應，可明確區分寡聚核苷酸是否與模
連接酶鏈反應技術的研究與發展
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是Backman1997年為檢出靶基因序列中的點突變而設計發明，并申報了ZL.1988年Landegren也進行了該項研究。1988年Backman等又因分離熱穩定的連接酶，而申報ZL，1991年Backman和Barany分別用耐
連接酶鏈反應的基本原理
LCR ，即在D N A?連接酶的作用下，通過連接與模板D N A互補的兩個相鄰寡核苷酸鏈，快速進行D N A 片段擴增。D N A連接酶可將與模板D N A 鏈互補的兩條毗鄰寡核苷酸片段連接起來，兩條寡核苷酸鏈接頭處存在堿基錯配則阻止連接反應的發生。所以通過連接酶反應，可明確區分寡聚核苷酸是否與模
連接酶鏈反應的基本原理
LCR ，即在D N A?連接酶的作用下，通過連接與模板D N A互補的兩個相鄰寡核苷酸鏈，快速進行D N A 片段擴增。D N A連接酶可將與模板D N A 鏈互補的兩條毗鄰寡核苷酸片段連接起來，兩條寡核苷酸鏈接頭處存在堿基錯配則阻止連接反應的發生。所以通過連接酶反應，可明確區分寡聚核苷酸是否與模
連接酶鏈反應的原理及應用介紹
1.定義：連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是一種新的DNA體外擴增和檢測技術，主要用于點突變的研究及靶基因的擴增。2.LCR的基本原理：利用DNA連接酶.特異地將雙鏈DNA 片段連接，經變性-退火-連接三步驟反復循環，從而使靶基因序列大量擴增。其程序為:在模DNA
連接酶鏈反應的基本概念和應用
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上，引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增，又可鑒定D N A 異常，與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。
連接酶鏈反應的基本原理介紹
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上，引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增，又可鑒定D N A 異常，與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。 LCR ，即在D N A 連接酶
核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術，采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中，該探針被摻入到雙鏈擴增產物中，由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開，從而釋放熒光，用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率，耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內
核酸擴增—多重PCR
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術，是在同一PCR體系中加入多對特異性引物，一次擴增多個DNA片斷，實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本，減少了工作量，提高了檢測效率，并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯，檢出率低等問題。淋病患者往往
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了
核酸擴增—轉錄介導的擴增技術(TMA)
TMA是一種利用RNA聚合酶和逆轉錄酶在約42℃等溫條件下來擴增RNA或DNA的技術，其原理是帶有T7 RNA聚合酶識別的啟動子序列的啟動子引物與模板退火經反轉錄形成RNA-DNA雜交分子，被反轉錄酶的RNase H活性水解形成單鏈RNA，然后與引物2退火，通過反轉錄合成雙鏈DNA，在T7 RN
核酸擴增—環介導的等溫擴增法
2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術，即環介導等溫擴增技術，英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的
關于連接酶鏈反應的發展過程介紹
連接酶鏈反應(Ligase chain reaction，LCR)，是Backman1997年為檢出靶基因序列中的點突變而設計發明，并申報了ZL.1988年Landegren也進行了該項研究。1988年Backman等又因分離熱穩定的連接酶，而申報ZL，1991年Backman和Barany分別
連接酶動態變換核酸納米結構
DNA連接酶憑借其穩定且出眾的連接能力，不僅肩負細胞內DNA的損傷修復，更在DNA分子重組中有許多妙用。DNA連接酶修復磷酸骨架的缺口來實現分子間的共價連接從而增強分子結構的穩定性。但你是否有想象過，利用DNA連接酶的特性來實現DNA納米結構的多樣動態變換？在缺口處斷裂的磷酸二酯鍵，是否能分開本就鎖
關于基因擴增技術—聚合酶鏈反應的擴增產物分析
基因擴增技術—聚合酶鏈反應擴增DNA片段只是一個重要手段。擴增片段的檢測和分析才是目的，根據研究對象和目的的不同而采用不同的分析法。瓊脂糖凝膠電泳可幫助判斷擴增產物的大小，有助于擴增產物的鑒定，點雜交除可鑒定擴增產物外，還有助于產物的分型；Southern雜交分析可從非特異擴增產物中鑒定出特異產
恒溫核酸擴增技術通量
在實際的產業化中，分子診斷儀器的通量往往至關重要。對于qPCR而言，由于引物設計的成熟和熒光通道的多樣性，往往可以比較好的實現高通量檢測。由于恒溫核酸擴增技術引物設計較為困難，單一的反應溫度會造成引物和模板，引物與引物之間的非特異性鏈接和擴增，使得恒溫擴增的檢測通量受到限制。但同時也得益于反應溫