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  • 結核桿菌PCR鑒定

    從痰等臨床標本直接診斷結核分枝桿菌和非結核分枝桿菌也稱直接擴增試驗(Direct Amplification Test,DAT),主要是利用PCR技術特異性地擴增核酸片斷達到鑒定結核分枝桿菌的目的。RocheLight Cycler 熒光定量PCR儀,從標本處理、核酸擴增到產物鑒定都有配套的試劑和設備,基本是自動化過程,檢測質量容易控制。擴增靶基因可以是DNA,也可以是RNA,商用試劑一般多用結核分枝桿菌的特異性片斷,如16SRNA、插入序列IS6110、編碼38KD磷酸結合蛋白的PAB基因等。 核酸擴增技術可在數小時內完成,可以鑒別結核分枝桿菌和非結核分枝桿菌,同時具有很高的敏感性,可以少到檢出標本中的10個結核分枝桿菌,與涂片抗酸染色相比,具有很大的優勢。在痰涂片抗酸染色陽性的標本,DAT的敏感性為95%,特異性為98%;在涂片陰性而培養陽性的痰標本,其敏感性為48~53%,特異性為9......閱讀全文

    結核桿菌PCR鑒定

    ?? 從痰等臨床標本直接診斷結核分枝桿菌和非結核分枝桿菌也稱直接擴增試驗(Direct Amplification Test,DAT),主要是利用PCR技術特異性地擴增核酸片斷達到鑒定結核分枝桿菌的目的。RocheLight Cycler 熒光定量PCR儀,從標本處理、核酸擴增到產物鑒定

    PCR技術應用十二:結核桿菌診斷

      結核桿菌可以導致全身性疾病,特別是在發展中國家,其發病率較高,危害性極大.近幾年結核桿菌的變異性較大,對抗癆藥物的耐藥性增加,從而使結核病的發病大幅度增高.雖然傳統的涂片抗酸染色、細菌培養以及胸片檢查對大部分結核能作出正確的診斷,但對某些病人亦可造成誤診或漏診;動物接種雖特異性較高,但因時間較長

    PCR產物的電泳鑒定

    一、準備工作1、實驗器具與材料:(1)移液槍:10ul(2)吸頭:20ul(3)吸頭臺:放置200ul和20ul的吸頭一個(4)三角燒瓶:50ml一個(5)瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備(1) 塑料制品:(包括吸頭等)送至高壓3次,試驗前將槍頭放入吸頭臺。(2)電泳板及電泳槽:用自來水沖洗干凈備用3

    PCR產物的電泳鑒定

    一、準備工作1、實驗器具與材料:(1)移液槍:10ul(2)吸頭:20ul(3)吸頭臺:放置200ul和20ul的吸頭一個(4)三角燒瓶:50ml一個(5)瓊脂糖2、實驗器具的處理與準備(1) 塑料制品:(包括吸頭等)送至高壓3次,試驗前將槍頭放入吸頭臺。(2)電泳板及電泳槽:用自來水沖洗干凈備用3

    臨床化學檢查方法介紹結核桿菌基因檢測(PCR)介紹

    結核桿菌基因檢測(PCR)介紹:  結核分枝桿菌在體外培養周期長,陽性檢出率不高,因此對臨床的早期診斷和確定藥物治療都帶來一定的困難,應用聚合酶鏈反應(PCR)技術檢測結核分枝桿菌,能大大提供結核分枝桿菌的檢出率和檢出特異性,有利于臨床即使治療。標本采自患者的痰、支氣管分泌物、腦脊液、心包積液、胸腔

    DNA的化學檢測項目介紹結核桿菌基因檢測(PCR)

    結核桿菌基因檢測(PCR)介紹:  結核分枝桿菌在體外培養周期長,陽性檢出率不高,因此對臨床的早期診斷和確定藥物治療都帶來一定的困難,應用聚合酶鏈反應(PCR)技術檢測結核分枝桿菌,能大大提供結核分枝桿菌的檢出率和檢出特異性,有利于臨床即使治療。標本采自患者的痰、支氣管分泌物、腦脊液、心包積液、胸腔

    PCR擴增產物的鑒定

    實驗概要PCR擴增產物可以通過酶切分析、凝膠電泳(瓊脂糖電泳、聚丙烯酰胺電泳、毛細管電泳等)、Southern雜交、克隆、測序等方法分析,電泳前還可以應用紫外分光光度計定量DNA。當采用凝膠電泳時也有溴化乙錠顯色、銀染法、熒光顯色等不同的顯色方法。本實驗室采用的是非變性連續緩沖系統聚丙烯酰胺凝膠垂直

    PCR擴增產物的鑒定

    實驗原理生物大分子如蛋白質、核酸、多糖等常以顆粒分散在溶液中.它們的凈電荷取決于介質的H 濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中,帶電顆粒向陰極或陽極遷移.遷移的方向取決于它們帶電的符號.這種遷移現象即謂電泳。遷移的方式目前可以根據分子尺寸大小、分子所帶的電荷或分子的生物學與化學特性分為三類

    PCR擴增產物的鑒定

    PCR擴增產物的鑒定實驗原理生物大分子如蛋白質、核酸、多糖等常以顆粒分散在溶液中.它們的凈電荷取決于介質的H 濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中,帶電顆粒向陰極或陽極遷移.遷移的方向取決于它們帶電的符號.這種遷移現象即謂電泳。遷移的方式目前可以根據分子尺寸大小、分子所帶的電荷或分子的生物學與化學

    菌落PCR,快速鑒定重組質粒

    質粒快速鑒定????試劑:?Protoplasting buffer:?30mM Tris-HCl, pH8.0????????????????????0.33ml/1.0M????????5mM?EDTA????????????????????????????????0.1ml/0.5M?????

    PCR擴增產物的鑒定

    實驗原理生物大分子如蛋白質、核酸、多糖等常以顆粒分散在溶液中.它們的凈電荷取決于介質的H 濃度或與其他大分子的相互作用。在電場中,帶電顆粒向陰極或陽極遷移.遷移的方向取決于它們帶電的符號.這種遷移現象即謂電泳。遷移的方式目前可以根據分子尺寸大小、分子所帶的電荷或分子的生物學與化學特性分為三類。如

    PCR擴增產物鑒定與純化

    實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DNA制

    PCR擴增產物鑒定與純化

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    PCR擴增產物鑒定與純化

    實驗概要通過瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物,并對獲得的產物進行割膠純化回收,為接下來的DNA重組和轉化實驗提供外源DNA片段。實驗原理瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗) 本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purifi

    PCR擴增產物鑒定與純化

      實驗原理  瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR擴增產物。(原理參照瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA實驗)  本實驗使用了TaKaRa公司的膠純化試劑盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),該試劑盒是從瓊脂糖凝膠中回收并純化DNA片段的試劑盒。試劑盒采用了獨特的凝膠融解系統,結合DN

    結核桿菌簡介

      結核分枝桿菌(M.tuberculosis),俗稱結核桿菌(tubercle bacillus),是引起結核病的病原體。1882年由德國細菌學家郭霍(Robert Koch,1843-1910)發現并證明為人類結核病的病原菌,該菌可侵犯全身各器官,但以引起肺結核最多見。結核病是一種古老的疾病,全

    結核桿菌介紹

    結核分枝桿菌,俗稱結核桿菌,是引起結核病的病原菌。可侵犯全身各器官,但以肺結核為最多見。結核病至今仍為重要的傳染病。據WHO報道,每年約有800萬新病例發生,至少有300萬人死于該病。我國建國前死亡率達200-300人/10萬,居各種疾病死亡原因之首,建國后人民生活水平提高,衛生狀態改善,特別是開展

    結核桿菌介紹

    ? 結核桿菌(Mycobecterium Tuberculosis)引起結核病。對人類致病的有人型結核桿菌和牛型結核桿菌,非典型分枝桿菌也可引起類似結核樣病變,但少見。  一、生物學性狀  (一)形態染色  結核桿菌細長略彎曲,端極鈍園,大小約1~4×0.4um ,呈單個或分枝狀排列,無莢膜、無

    全基因組測序鑒定非洲結核桿菌病原體早期感染情況

      最近,發表在《PNAS》雜志上的一項研究檢查了南非地區爆發的廣泛耐藥結核病流行株LAM4 / KZN的進化和流行病學歷史。  該菌株首次報道于2005年在夸祖魯-納塔爾省的圖格拉渡輪,此后已在全省廣泛傳播。這項新研究確定了促進XDR-TB菌株疫情爆發的關鍵宿主,病原體和環境因素,以及可以采取的早

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      最近,發表在PNAS的一項研究檢查了南非地區爆發的廣泛耐藥結核病流行株LAM4 / KZN的進化和流行病學歷史。  該菌株首次報道于2005年在夸祖魯-納塔爾省的圖格拉渡輪,此后已在全省廣泛傳播。這項新研究確定了促進XDR-TB菌株疫情爆發的關鍵宿主,病原體和環境因素,以及可以采取的早期發現和遏

    數字PCR在基因型鑒定的應用

    PCR也可以用于檢測一個生物中是否存在某特定DNA序列,這被稱為基因型鑒定。例如,基因型鑒定可通過發現樣品中是否存在某種群特異性序列來判斷樣本的真實性。基因型鑒定還可用于法醫分析判斷在現場發現的DNA樣品是否和嫌疑人的吻合,令兇手無處遁形。

    結核桿菌的檢測

    結核桿菌與麻風桿菌是分枝桿菌屬中的主要病原菌。 結核桿菌菌體細長略帶彎曲,有分枝生長趨勢。 菌體含脂量高,與其抗酸特性、抵抗力特性、致病性與免疫 ?性等都有密切關系。 該菌營養要求高,生長緩慢,形成“菜花狀”菌落。一、結核桿菌檢驗程序 結核病人病灶中查到結核桿菌,是病原學診斷的重要

    結核桿菌標本留取

    當你懷疑有肺結核就診時,首先要進行胸部透視,醫生若發現你的肺內有異常陰影,就會給你作痰液檢查.查痰,就是用顯微鏡查找結核 桿菌,痰內一旦發現結核菌,肺結核的診斷便可確定,查痰是診斷肺結核,發現傳染源最準確的方法.另外,病人在治療過在中醫生也會 要求你定期查痰,用以考核和評價治療效果.痰菌陽性

    什么是結核桿菌?

      結核分枝桿菌(M. tuberculosis)簡稱為結核桿菌(tubercle bacilli),是人類結核病的病原體。是專性需氧的一類細菌,抗酸染色陽性。無鞭毛,有菌毛,有微莢膜但不形成芽孢,其細菌壁既沒有革蘭陽性菌的磷壁酸,也沒有革蘭陰性菌的脂多糖。德國細菌學家郭霍(Robert Koch,

    數字PCR在甲基化含量鑒定的應用

    作為表觀遺傳學研究中重要的一個研究方向——甲基化程度分析,現階段有不同的方法或技術來進行研究:如傳統的亞硫酸氫鹽處理后的克隆測序法、抗體檢測法、定量PCR檢測法等受限于方法學的問題,不能獲得甲基化程度的精確定量,而數字PCR系統通過對樣品的微液滴處理及目標分子的絕對拷貝數定量,為甲基化程度的精確定量

    cDNA文庫組標準流程七:快速鑒定、菌落PCR

    1.質粒快速鑒定??試劑:Protoplasting buffer:30mM Tris-HCl, pH8.0 ??????????????????0.33ml/1.0M????? 5mM EDTA ??????????????????????????????0.1ml/0.5M????? 50mM

    骨碎補PCR鑒定試劑盒特點及樣品制備

    聚合酶鏈式反應(PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復性)及適溫延伸等幾步反應組成一個周期,循環進行,使目的DNA得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。 特異性強 PCR反應的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結合...”骨碎

    中藥快速PCR鑒定方法被納入廣東藥檢平臺

      由博奧晶典聯合中國中醫科學院中藥資源中心開發的蛇類PCR快檢試劑盒被納入廣東省藥品檢驗所平臺,標志著中藥分子快速檢測方法的應用取得階段性成果。中藥快速PCR鑒定方法是中國中醫科學院資源中心多年研究成果,并被即將出版的《中藥材快速鑒別手冊》第二冊收載。  博奧晶典與中國中醫科學院中藥資源中心在中藥

    Pichia酵母表達直接PCR鑒定重組子的方法

    模板的處理:1.平板上的菌落長到肉眼可見時(約12小時);2.將除了模板之外的其它PCR反應液的組分準備好,并分裝。引物最好使用Kit中已有的檢測專用的引物,或者一條使用載體上的引物,一條使用基因的特異性引物(這樣做可以鑒定非定向克隆的方向);3.用半根滅菌的牙簽(節約,而且好用)挑取菌落,在PCR

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