搞定恒溫擴增分子診斷（RPA／RAA）
分子診斷技術今日不同以往，著實借力突飛猛進，恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種，今天就回顧RPA/RAA，讓大家一文通俗搞定！為了確保大家所認知的基本概念是一致的，請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術，RPA, recombinase polymerase amplification重組酶介導的擴增技術，RAA, recombinase-aidamplification重組酶，recombinase，同引物形成蛋白-核酸復合物，指導引物與模板結合，起到定位作用；幫助DNA 模板的解鏈和促使模板與引物之間發生鏈替換。單鏈DNA結合蛋白，SSB, single stranded DNA binding。同置換出來的單鏈DNA結合，防止DAN配對兩條鏈再次結合。DNA聚合酶，DNA polymerase，以DNA為模板，利用dNTP合成子代DNA。核酸內切酶，endonuclease，可水......閱讀全文
搞定恒溫擴增分子診斷（RPA/RAA）
分子診斷技術今日不同以往，著實借力突飛猛進，恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種，今天就回顧RPA/RAA，讓大家一文通俗搞定！為了確保大家所認知的基本概念是一致的，請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術，RPA, recombinase polymeras
熒光定量PCR－vs.－恒溫擴增，誰才是分子診斷的未來？
熒光定量PCR 和恒溫擴增在分子診斷方面的應用日漸受關注，兩種技術孰優孰劣，且聽作者娓娓道來。基于核酸擴增的分子診斷，是通過引物介導特異性擴增目的基因，以檢測內源性（遺傳或變異）或外源性（病原體）目的基因的存在與否，從而對疾病的診斷和治療提供信息和決策依據。其主要應用場景有傳染病的診斷，血篩，腫瘤早
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了
恒溫核酸擴增技術概述
恒溫核酸擴增技術是利用各種酶，引物，脫氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及緩沖液的混合物在同一溫度下溫浴一定時間，讓不同的酶與DNA進行反應，從而達到特定DNA片段的擴增。與傳統的PCR核酸擴增相比，恒溫核酸擴增不需要在不同溫度之間的轉換，只要保持酶反應的最佳溫度，37℃、42℃、56℃或6
恒溫核酸擴增技術通量
在實際的產業化中，分子診斷儀器的通量往往至關重要。對于qPCR而言，由于引物設計的成熟和熒光通道的多樣性，往往可以比較好的實現高通量檢測。由于恒溫核酸擴增技術引物設計較為困難，單一的反應溫度會造成引物和模板，引物與引物之間的非特異性鏈接和擴增，使得恒溫擴增的檢測通量受到限制。但同時也得益于反應溫
恒溫擴增技術與PCR－區別
如果是恒溫的話怎么來完成變性、退火以及延伸過程呢下面是摘錄的:操作技術和普通PCR沒區別，反應溫度上不要高溫低溫中文三步，只要60度就可以。原理，在常規PCR基礎上增加了3對引物（普通1對）使得引物幾乎涵蓋了目的基因序列的三分之一以上。如果定量加熒光探針，定性就不必了。
恒溫核酸擴增技術的特異性
由于恒溫核酸擴增的整個反應是沒有溫度的變化，模板DNA雙鏈的打開，引物與互補片段的鏈接以及新片段的合成都是在同一溫度下進行的。這就造成某些情況下的反應體系里引物之間形成非特異性互補，擴增，最后造成假陽性的結果。與PCR相比，恒溫核酸擴增更易出現假陽性的結果。
切刻內切酶（NEAR）恒溫擴增
切刻內切酶（NEAR）恒溫擴增是目前相關研究最少的一種恒溫核酸擴增技術。它是在2008年由Ionian科技公司的研究人員開發并申請ZL的（Brain等2009）。除了鏈置換酶（Bst）外，NEAR反應中還需添加一個切刻內切酶。NEAR反應的引物設計需要將所使用的切刻內切酶的DNA作為序列加在引物
恒溫核酸擴增技術與傳統PCR對比
和傳統的PCR技術相比，恒溫核酸擴增不僅僅是縮短了核酸擴增的時間，更重要的是核酸擴增擺脫了對硬件的束縛。PCR技術原理是利用94℃高溫使DNA雙鏈解開，并在耐高溫的DNA聚合酶的作用下擴增DNA片段。PCR反應至少需要2個不同的溫度使DNA片段得到特異性的擴增。恒溫核酸擴增是利用各種酶與DNA之
最簡單的恒溫擴增PCR——RCA/RCT
小背景滾環擴增技術，rolling circle amplification，RCA——基于DNA的擴增方法；滾環轉錄技術，rolling circle transcription，RCT——基于RNA的擴增方法。?滾環擴增/轉錄技術是基于借鑒了自然界中環狀DNA/RNA復制和轉錄方式開發的一種恒溫
一文搞定恒溫擴增——RPA/RAA
分子診斷技術今日不同以往，著實借力突飛猛進，恒溫擴增技術由于其擴增期間不需要特殊的儀器設備而更受矚目。恒溫擴增方法有多種，今天就回顧RPA/RAA，讓大家一文通俗搞定~~嗯啊, 如果有疑問，決定開小灶，包會！哈哈~~為了確保大家所認知的基本概念是一致的，請先了解以下名詞解釋重組酶聚合酶擴增技術，RP
分子診斷經驗篇：如何應對等溫擴增時出現的假陽性問題
等溫擴增技術作為一種核酸分子診斷技術，從誕生之日起就不斷受到研究者的青睞，但也少不了唏噓、質疑，甚至摒棄。引起這種截然相反的態度的原因在于等溫擴增技術自身所存在的缺陷。而最為突出的一點是，在建立方法或者實際樣本檢測的過程中，等溫擴增技術引起假陽性結果的概率相對較高，使得其實際應用范圍變窄，未能真正顯
腫瘤中基因擴增的分子分析實驗
實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒NaCl 溶液乙醇TE 緩沖液小牛胸腺 DNA 標準品毛細試驗溶液1 X TNE 緩沖液亞精胺限制酶和相關的10 X 緩沖液牛血清白蛋白6 X 上樣緩沖液HCl20 X 和 60 X SSC緋精子DNA雙鏈 DNA 探針20% SDS儀器、耗材DNA 提取試劑盒7. 5
恒溫擴增熒光檢測儀有哪些特點？
1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿足外出實驗的需求。 2.內置7寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡便快捷。 3.Marlow高品質Peltier制冷片，結合德國高端PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補償邊緣的溫度控制模式，最大升溫速度6℃，最大降溫速度5℃，大大縮短實驗時間。 4.整板
恒溫擴增熒光檢測儀的用途舉例
非洲豬瘟PCR檢測儀(實時熒光定量PCR儀)用于運行病毒檢測實驗，并對實驗數據進行分析；儀器既可在實驗室內操作，又可用于野外科學實驗，配合相應試劑，對取自待檢測樣本的分析物或其他分析物中的目標核酸進行快速、準確的定性檢測。 儀器配套非洲豬瘟病毒核酸快速檢測試劑盒(熒光 RPA 法)、非洲豬瘟病
分子生態學詞匯隨機擴增多態
隨機擴增多態 DNA (randomly amplified polymorphic DNA, RAPD)，是美國學者Williams和Welsh于1990年首先提出的該技術是通過分析DNA的PCR產物的多態性來推測生物體內基因排布與外在性狀表現的規律的技術。RAPD技術是以8-lObp的隨機寡核苷
恒溫核酸擴增技術對引物的高要求
自80年代PCR技術發明以來，PCR引物的設計已經相當成熟，市場上有很多關于PCR引物設計的軟件可供使用。所以設計一對好的PCR的引物并不困難。恒溫核酸擴增剛好相反。一對或者幾對好的引物對任何一種恒溫核酸擴增技術都是相當關鍵的，可是由于恒溫核酸擴增技術各不相同，引物設計方法很難相互借鑒。目前雖然
恒溫核酸擴增反應引物探針設計問題合集
重組酶聚合酶擴增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術（由英國公司開發）。以此為基礎的核酸擴增產品，能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全
丹納赫重視分子診斷市場－展出Veris分子診斷平臺
2015年1月12日-15日，第33屆JP摩根健康投融資大會在美國舊金山舉行。大會上，各家公司都派出重量級陣營，公布上年度經營業績，發布最新產品。 丹納赫公司新任總裁兼CEO Thomas Joyce在大會上展示貝克曼庫爾特公司最新的Veris分子診斷平臺，該產品定于今年下半年在歐洲推向市場
分子診斷設計思考
背景相比于藥的研發周期長，體外診斷試劑盒更像是手游市場，是一個快速變革的紅海市場。比如說從ibrutinib到Acalabrutinib，同一個靶點的二代產品要做完整個臨床試驗，證明安全性有效性才可以申請上市。而未來隨著科學發展，某一天新的靶點與某種癌癥的關系得到學界的共識，也許從試劑盒設計而言就是
分子診斷工具介紹
因分子技術具有內在準確性、敏感性、特異性和周轉迅速的特點，帶來了分子診斷行業的快速發展。此外，因為分子診斷技術具有準確性、敏感性和特異性，實驗室人員能夠從很小量的樣本中就可獲得有效的結果。這對法醫檢測領域來說是非常有用的，但同時該技術也可以檢測到目標物質的極低濃度，從而使臨床醫生在極早期階段就能檢測
帶分子診斷“下鄉”
傳統分子診斷因儀器精密、價格昂貴、對中央實驗室要求高而只限于高等醫院，優思達正努力將其帶入偏遠村莊。 在今年“創新中國DEMO CHINA”醫療健康專場中，最耀眼的莫過于在專場總決賽拔得頭籌的杭州優思達生物技術有限公司(下簡稱“優思達”)了。這是一家研發、生產快速分子診斷試劑和設備的高
HIV的分子診斷
確定病毒載量的分子技術的發展和基因型耐藥性的發展，使HIV病治療發生了根本的改變。商業上可獲得的病毒載量檢測技術有許多，從逆轉錄PCR到分支鏈DNA擴增等不同方法。這些檢測的局限性在于沒有一個國際標準來比較不同方法測定的病毒載量，以及由于HIV的不同分化枝的差異性引起某些患者樣本檢出低下或未被檢出。
腫瘤分子診斷概述
二十一世紀的今天,惡性腫瘤仍然是嚴重危害人類生命健康的重大疾病?從世界范圍內看,腫瘤的發生?發展不容樂觀?隨著人口逐漸老齡化?吸煙?感染?環境污染?膳食結構等問題的存在,腫瘤診斷所面臨的形勢極為嚴峻?一?腫瘤生物標志物的發現腫瘤發生?發展的有跡可循,促使人們投放了更多的精力于發現新標志物?自從184
分子診斷發展簡史
沃森和克里克提出DNA雙螺旋結構，“生命之謎”被打開，經過PCR技術、生物芯片技術、DNA測序技術之后分子診斷正在快速成為人類疾病診斷的最有效方式之一。分子診斷發展四階段第一階段：利用分子雜交技術進行遺傳病基因診斷：通過嬰兒胚胎期進行產前診斷，超早期預知某些疾病發生、發展和預后。1978年著名沒計劃
什么是分子診斷
分子診斷：應用分子生物學方法檢測患者體內遺傳物質的結構或表達水平的變化而做出診斷的技術，稱為分子診斷。分子診斷是預測診斷的主要方法，既可以進行個體遺傳病的診斷，也可以進行產前診斷。分子診斷的材料包括DNA、RNA和蛋白質。分子診斷主要是指編碼與疾病相關的各種結構蛋白、酶、抗原抗體、免疫活性分子基因的
從新冠疫情看分子診斷POCT的發展
? ?? 疾病檢測技術一直處于高速發展的過程中，越來越多的手段使人類對疾病的診斷日漸精準。但是，準確率更高的檢測手段通常意味著更高的成本、更長的時間、更繁復且條件苛刻的診斷流程，這使得臨床往往在面對高度傳染性疾病時陷入兩難的境地，即大規模確診病人的緊迫性與捉襟見肘的高端檢測資源相沖突。在此次新冠疫情
布魯克收購傳染病分子診斷公司Hain－擴展分子診斷產品
分析測試百科網訊 近日，布魯克表示已簽署最終協議，獲得傳染病分子診斷公司Hain Lifescience的多數股權。據布魯克表示，總部位于德國的Hain將增加結核病和分枝桿菌，以及病毒學和人類遺傳學的能力檢測。 布魯克計劃收購Hain的80％股權，其余20％的股權可以在2021年之后行使。布魯
恒溫擴增熒光檢測儀能應用到哪些領域？
應用領域 □ 基礎科學研究 □ 病原體檢測 □ 肉制品摻假 □ 轉基因檢測 □ 食品安全檢測 □ 藥物開發及合理用藥 □ 基因表達 □ 水體監測
獸醫體外診斷的趨勢——分子診斷
寵物已成為現代人的重要家庭成員，圍繞其吃穿用度、生老病死，形成了一條千億級的“經濟”產業鏈。其中，需求剛性大、消費支出高的寵物醫療更占據了產業鏈中的核心地位，成了寵物消費中的“大頭”。寵物醫療服務包括為寵物提供疾病診療和日常保健服務，是寵物行業中僅次于寵物食品的第二大細分行業。按疾病種類劃分，寵物醫