基因芯片實驗的步驟
(1)樣品制備和標記 為了獲得目的基因的雜交信號必須對目的基因進行標記,由于目前常用的熒光檢測系統的靈敏度還不夠高,為了提高檢測靈敏度,需要在對樣品核酸進行熒光標記時,對目的基因進行擴增。生物樣品成分復雜,往往含有較多的抑制物,在對樣品進行擴增、熒光標記之前,必須先提取、純化樣品核酸。目前普遍采用的熒光標記方法有體外轉錄(NASBA),PCR,逆轉錄(RT)等。(2)雜交反應 雜交反應是熒光標記的樣品與芯片上的探針進行雜交產生一系列信息的過程。在合適的反應條件下,靶基因與芯片上的探針進行堿基互補形成穩定的雙鏈,未雜交的其他核酸分子隨后被洗去(如果用實時熒光檢測可省去此步)。雜交條件的選擇與研究目的有關,基因的差異性表達檢測需要長的雜交時間、高嚴謹性、高樣品濃度和較低溫度,這有利于增加檢測的特異性和低拷貝基因檢測的靈敏度。在進行突變體檢測和單核苷酸多態性(SNP)分析時,要鑒別出單堿基錯配,需要更高的雜交嚴......閱讀全文
基因芯片實驗的步驟
(1)樣品制備和標記? 為了獲得目的基因的雜交信號必須對目的基因進行標記,由于目前常用的熒光檢測系統的靈敏度還不夠高,為了提高檢測靈敏度,需要在對樣品核酸進行熒光標記時,對目的基因進行擴增。生物樣品成分復雜,往往含有較多的抑制物,在對樣品進行擴增、熒光標記之前,必須先提取、純化樣品核酸。目前普遍采用
表達譜基因芯片實驗
表達譜基因芯片可應用于：（1）疾病診斷；（2）新藥開發；（3）環境保護。實驗方法原理按照預定位置固定在固相載體上很小面積內的千萬個核酸分子所組成的微點陣陣列。在一定條件下，載體上的核酸分子可以與來自樣品的序列互補的核酸片段雜交。如果把樣品中的核酸片段進行標記，在專用的芯片閱讀儀上就可以檢測到雜交信號
基因芯片技術的應用實驗研究
包括基因表達檢測、尋找新基因、雜交測序、基因突變和多態性分析以及基因文庫作圖以及等方面。1、基因表達檢測。人類基因組編碼大約10萬個不同的基因,僅掌握基因序列信息資料,要理解其基因功能是遠遠不夠的,因此,具有監測大量mRNA(信使RNA,可簡單理解為基因表達的中介物)的實驗工具很重要。有關對芯片技術
基因芯片實驗原理與方法
本實驗的目的是學會cDNA芯片的使用方法。了解各種基因芯片的基本原理和優缺點。基因芯片這一技術方法在1991年的Science雜志上被首次提出，其高通量、并行檢測的特點適應了分析人類基因組計劃所提供的海量的基因序列信息的需要，可以說，人類基因組計劃是基因芯片技術發展的原因，而對深人研究基因突變和基因
表達譜基因芯片實驗操作流程
一、試劑1. TRIzol2. 異丙醇3. 氯仿4. 75%乙醇（RNase-free）5. Milli-Q水（RNase-free）6. 無水乙醇7. dNTPs8. Cy5-dCTP和Cy3-dCTP9. 雜交試劑110. 標記試劑I11. 雜交試劑212. 標記試劑II13. 反轉錄酶14.
基因芯片實驗原理與方法（一）
一、目的本實驗的目的是學會cDNA芯片的使用方法。了解各種基因芯片的基本原理和優缺點。基因芯片這一技術方法在1991年的Science雜志上被首次提出，其高通量、并行檢測的特點適應了分析人類基因組計劃所提供的海量的基因序列信息的需要，可以說，人類基因組計劃是基因芯片技術發展的原因，而對深人研究基因突
基因芯片實驗操作流程圖
???芯片實驗操作流程包括樣本DNA或RNA制備、標記、雜交及洗滌等步驟基因芯片實驗操作流程圖???? 1．樣本DNA或RNA制備??? 芯片實驗中核酸的抽提沒有特殊之處，參照常規的分子生物學實驗手冊就可以。但對于RNA樣本，由于RNA的穩定性很差，在活體內的半衰期也很短，因此取材一定要新鮮，取材后
實驗室檢驗檢測工具?基因芯片
基因芯片(genechip)(又稱DNA芯片、生物芯片)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對應位置的
基因芯片
基因芯片(genechip)（又稱DNA芯片、生物芯片）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯片上對應位置的
細胞轉染實驗的實驗步驟
細胞傳代(1)試驗準備：200ul/1mlTip頭各一盒（以上物品均需高壓滅菌），酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基，用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液，消化1分鐘（37。C，5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁，
薄層色譜實驗的實驗步驟
偶氮苯和蘇丹Ⅲ由于極性不同，利用薄層色譜(TLC)可以將二者分離。 (1)點樣。 取兩塊制好的薄層板，分別在距一端1 cm處用鉛筆輕輕畫一條橫線作為起始線。取管口平整的毛細管插入樣品溶液[6]中，在一塊板的起點上點1%偶氮苯的甲苯溶液和混合液兩個樣點。在第二塊板的起點線上點1% 蘇丹Ⅲ 的甲
基因芯片的應用
1998 年底 美國科學促進會將基因芯片技術列為 1998 年度自然科學領域十大進展之一，足見其在科學史上的意義。現在，基因芯片這一時代的寵兒已被應用到 生物科學眾多的領域之中。它以其可同時、快速、準確地分析數以千計 基因組信息的本領而顯示出了巨大的威力。這些應用主要包括 基因表達檢測、突變檢測
基因芯片的應用
DNA芯片技術就是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后與標記的樣品雜交，通過對雜交信號的檢測分析，即可獲得樣品的遺傳信息。是伴隨“人類基因組計劃”的研究進展而快速發展起來的一門高新技術。通俗地說，基因芯片是通過微加工技術，將數以萬計、
基因芯片的原理
基因芯片（gene chip）的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，可以用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與基因芯片上對應位置
基因芯片的應用
1998 年底美國科學促進會將基因芯片技術列為 1998 年度自然科學領域十大進展之一，足見其在科學史上的意義。現在，基因芯片這一時代的寵兒已被應用到生物科學眾多的領域之中。它以其可同時、快速、準確地分析數以千計基因組信息的本領而顯示出了巨大的威力。這些應用主要包括基因表達檢測、突變檢測、基因組多態
pcr實驗步驟
一、 樣品RNA的抽提1. 取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。2. 兩相分離 每1 ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2 ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12 000 rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相，中間層以
Western實驗步驟
一、樣品制備?對于Western Blotting實驗而言，樣品處理是關鍵步驟之一，獲得的蛋白樣品必須均質、可溶，并解離成單個多肽亞基，且盡量減少相互間的聚集，使其最終僅依賴本身的分子量大小進行分離。當目標蛋白的含量很低時，需要選取目標蛋白含量較高的組織或細胞器（如核抽提物），或者通過免疫沉淀等方式
細胞劃痕實驗實驗步驟
一.準備：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內）二.流程：1.先用marker筆在6孔板背后，用直尺比著，均勻得劃橫線，大約每隔0.5~1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2.在空中加入約5X105個細胞，具體數量因細胞不同而不同，掌握為過一夜能鋪
ELISA實驗檢測抗體的實驗步驟
（1）將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。 （2）加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。 （3）加酶標抗抗體,主要根據你的一抗來確定二抗用
ELISA實驗檢測抗體的實驗步驟
操作步驟： （1）將特異性抗原與固相載體聯結，形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。 （2）加稀釋的受檢血清，保溫反應。血清中的特異抗體與固相抗原結合，形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體，血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。 （3）加酶標抗抗體,主要根據你的一抗來
基因芯片簡介
隨著人類基因組（測序）計劃（Human genome project）的逐步實施以及分子生物學相關學科的迅猛發展，越來越多的動植物、微生物基因組序列得以測定，基因序列數據正在以前所未有的速度迅速增長。然而，怎樣去研究如此眾多基因在生命過程中所擔負的功能就成了全世界生命科學工作者共同的課題。為此，建立
基因芯片概念
基因芯片（又稱 DNA 芯片、生物芯片）技術就是順應這一科學發展要求的產物，它的出現為解決此類問題提供了光輝的前景。該技術系指將大量（通常每平方厘米點陣密度高于 400 ）探針分子固定于支持物上后與標記的樣品分子進行雜交，通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進而獲取樣品分子的數量和序列信息。通俗地說，
基因芯片－簡介
隨著人類基因組（測序）計劃（ Human genome project ）的逐步實施以及分子生物學相關學科的迅猛發展，越來越多的動植物、微生物基因組序列得以測定，基因序列數據正在以前所未有的速度迅速增長。然而 , 怎樣去研究如此眾多基因在生命過程中所擔負的功能就成了全世界生命科學工作者共
基因芯片－原理
基因芯片(gene chip)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法，即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法，可以基因芯片的測序原理用圖11-5-1來說明。在一塊基片表面固定了序列已知的八核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG，與
ELISA實驗重中之重的步驟
看似簡單的ELISA實驗在操作過程中稍有不合理的地方，會造成很多問題，影響檢測精度，降低測試質量。如花板，假陽性，全彩色，全彩色，顏色空間的低等問題，這就要求我們在實驗過程多做總結，逐步完善，篩選ELISA實驗各項步驟中的重點之重。 ? ?第一：包衣液的選擇 ? ?碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時
基因敲除的實驗步驟
構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染色體靶位
有絲分裂的實驗步驟
實驗目標1、初步掌握制作根尖細胞有絲分裂裝片的技術。2、觀察植物細胞有絲分裂的過程，識別分裂的不同時期。3、初步掌握繪制生物圖的方法。實驗原理細胞的有絲分裂是一個連續動態的變化過程，但可以通過它的形態變化，特別是細胞核中的染色體行為，人為地劃分階段，并進行比較研究。在自然狀態下，一大群處于各個分裂期
細胞轉染實驗的步驟
細胞傳代(1)試驗準備：200ul/1mlTip頭各一盒（以上物品均需高壓滅菌），酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基，用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液，消化1分鐘（37。C，5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁，
基因敲除的實驗步驟
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
腺苷的實驗操作步驟
1、標準曲線的繪制精密吸取上述對照品溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0μL注入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外檢測器檢測器，于260nm檢測腺苷的吸收值，以腺苷的進樣量對其峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。2、供試品的測定精密吸取上述供試品溶液10μL，注入高效液相色譜儀，