酶免疫技術基本原理及種類
一、基本原理酶聯免疫技術和其他免疫技術一樣,都是以抗體和抗原的特異性結合為基礎的,其差別在于酶免疫方法以酶或者輔酶標記抗原或者抗體,用酶促反應的放大作用來顯示初級免疫學反應,使檢測水平接近放射免疫測定法。酶免疫測定法可分為非均相免疫測定法和均相免疫測定法,非均相法又有固相法和液相法之分。實踐中,常用的是非均相酶固相免疫測定法即 ELISA 法,該法將抗原或抗體結合到固相載體表面,將抗原或抗體相關物質與酶交聯成酶結合物,一方面保持了與相應抗原或抗體結合的免疫特性,另一方面還具有酶活性。當酶結合物同相應的抗原或抗體結合后,則形成酶標抗原-抗體復合物,復合物上的酶遇到相應底物時,可以催化產物水解、氧化或還原,從而產生有色物質。根據有色物質的有無及其濃度,即可間接推斷被檢樣品中有無相應抗原或抗體存在、數量多少,從而達到定性和定量測定的目的。ELISA 測定原理見圖1-1。圖1-1 ELISA 測定原理示意圖二、ELISA 的種類在實際應......閱讀全文
酶免疫技術基本原理及種類
一、基本原理酶聯免疫技術和其他免疫技術一樣,都是以抗體和抗原的特異性結合為基礎的,其差別在于酶免疫方法以酶或者輔酶標記抗原或者抗體,用酶促反應的放大作用來顯示初級免疫學反應,使檢測水平接近放射免疫測定法。酶免疫測定法可分為非均相免疫測定法和均相免疫測定法,非均相法又有固相法和液相法之分。實踐中,常用
酶免疫標記技術（ELISA）基本原理
酶免疫標記技術（ELISA）基本原理：指酶標記抗體或酶標記抗體進行的抗原抗體反應，然后通過酶與底物產生顏色反應，用于定量測定。
酶聯免疫法基本原理及注意事項
?酶聯免疫法基本原理及注意事項??? 這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性。但在ELSIA試劑盒中，正常人血清反應后常可出現呈色的本底，此本底的深淺因elisa試劑盒的組成和實驗的條件不同而異，因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物
免疫酶標的基本原理簡介
1971年Engvall和Perlmann發表了酶聯免疫吸附劑測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標抗體技術發展成液體標本中微量物質的測定方法。免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高
標記免疫分析技術的種類
免疫標記分析技術主要包括：放射物標記、酶標記、發光標記、熒光標記和金標記方法。1 放射物標記分析：用放射物標記抗原或抗體發展的放射免疫分析(radio immunoassay, RIA)是美國科學Yalow和Berson于1959年創立的一種微量分析法,它是將具有高靈敏度的放射性核素示蹤技術和特異性
酶聯免疫法的基本原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合
酶免疫技術酶與底物
酶結合物是酶與抗原或者抗體、半抗原在交聯劑作用下聯結的產物,是 ELISA 成敗的關鍵試劑。它不僅具有抗原抗體的特異性反應,還具有酶促反應的特性,最終產生生物放大的特性。酶免疫反應中,最常用的酶是辣根過氧化物酶,HRP的催化反應需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2)。供氫體多為無色的還原型染
免疫酶技術介紹
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷
免疫酶標技術
1） 直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1％ H2O2（或1％ H2O2 甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘，鏡下控制染色
免疫酶技術介紹
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷
酶免疫技術分類
酶免疫技術一般分成酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術與熒光抗體技術相似，酶標記抗體與組織切片上的抗原起反應，然后與酶底物作用，形成有色沉淀物，可以在普通光學顯微鏡下觀察。如酶作用的產物電子密度發生一定的改變，則可用電子顯微鏡觀察，稱為酶免疫電鏡技術。 酶免疫測定根據抗原抗體反應后
免疫酶標技術
免疫酶標技術1）??直接法1．標本固定。2．PBS洗滌2×3分鐘。3．1％?H2O2（或1％?H2O2?甲醇）抑制內源性過氧化物，室溫10～20分鐘。4．正常血清（1：10）孵育，室溫20分鐘。5．滴加酶標記的抗體37℃1小時或4℃過夜。6．PBS洗滌3×3分鐘。7．DAB＋H2O2顯色5～10分鐘
酶免疫電鏡技術
（一）??原理?酶免疫電鏡技術是利用酶的高效率的催化作用對其底物的反應形成不同的電子密度，借助于電子顯微鏡觀察，證明酶的存在，從而對抗原進行定位。（二）材料與試劑1．PBS液? 取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液? 取5m
免疫酶標技術
實驗方法原理 先將酶與抗體結合形成酶標抗體，然后和相應的抗原反應，使抗原抗體復合物上帶有酶分子，再與酶的底物H2O2—DAB（3’3—二胺荃聯苯胺）發生顯色反應，在顯微鏡下觀察，根據顏色產物檢測相應抗原。實驗材料 抗體試劑、試劑盒 PBSH2O2血清儀器、耗材 顯微鏡實驗步驟 1. ?標本固定；2.
免疫酶標技術
中文名稱免疫酶標技術英文名稱immunoenzymatic technique定 義以酶標記抗體（或抗原），通過相應底物被酶解后的顯色反應，對細胞和組織標本中的抗原-抗體復合體進行定位、定性分析和鑒定的方法。也可根據酶催化底物顯色的深淺程度，定量測定體液標本中待測抗原或抗體的含量。應用學科細胞生物
免疫細胞的組成及種類
組成 免疫器官 類型：扁桃體、淋巴結、胸腺、脾、骨髓等。 功能：免疫細胞生成、成熟、或集中分布的場所。 免疫細胞 吞噬細胞：①與體液中的殺菌物質構成人體的第二道防線，參與非特異性免疫。 ②攝取和處理抗原，參與細胞免疫和體液免疫。 淋巴細胞：①T細胞 ②B細胞 免疫活性物質 抗
核心酶的組成及種類
核心酶(core enzyme)：大腸桿菌的RNA聚合酶全酶由6個亞基組成(2αββ’ωσ)(即兩個α亞基、β亞基、β′亞基、ω亞基和σ亞基)，還含有兩個鋅原子。而無σ亞基的酶(2αββ’ω)叫核心酶。亦指DNA聚合酶Ⅲ中由α、ε、θ三種亞基組成全酶的核心酶(core enzyme)。
酶的種類及組成差異
按照酶的化學組成可將酶分為單純酶和結合酶兩類。單純酶分子中只有氨基酸殘基組成的肽鏈。結合酶分子中則除了多肽鏈組成的蛋白質，還有非蛋白成分，如金屬離子、鐵卟啉或含B族維生素的小分子有機物。結合酶的蛋白質部分稱為酶蛋白(apoenzyme)，非蛋白質部分統稱為輔助因子 (cofactor)，兩者一起組成
免疫酶技術的技術原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），它是使抗
免疫酶技術的技術原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），它是使抗
免疫酶技術的技術原理
免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），它是使抗
免疫熒光技術基本原理
免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。直接法將標記的特異性
熒光酶免疫測定的基本原理
堿性磷酸酶（ALP）標記抗體（或抗原），以固相載體包被抗原（或抗體），堿性磷酸酶分解熒光底物4-甲基傘酮磷酸鹽（4-MUP）形成4-MU，經360nm激發光的照射，發出450nm的熒光。
酶聯免疫法的基本原理簡介
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體，這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標本（測定其中的抗體或抗原）和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
酶免疫技術的概述
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展，應用不同標記物，根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮，而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型，對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
免疫酶技術的簡介
免疫酶技術是指在一定的生物反應器內,利用酶的催化作用,進行物質轉化的技術.其應用范圍已遍及工業、醫藥、農業、化學分析、環境保護、能源開發和生命科學理論研究等各個方面。
什么是免疫酶技術？
免疫酶技術(immunoenzymatic technique)也叫酶免疫測定，是通過酶標記抗體或抗原來檢測抗原或抗體的方法，其應用范圍極廣。顯示方法是用酶的特殊底物來處理反應后的標本，通過酶催化底物的顯色反應來測定抗原或抗體的存在，以酶標作定量或定性分析。標記酶有辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷
酶免疫技術的概述
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展，應用不同標記物，根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮，而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型，對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技
酶免疫技術的分類
酶免疫技術一般分成酶免疫組化技術和酶免疫測定兩大類。酶免疫組化技術與熒光抗體技術相似，酶標記抗體與組織切片上的抗原起反應，然后與酶底物作用，形成有色沉淀物，可以在普通光學顯微鏡下觀察。如酶作用的產物電子密度發生一定的改變，則可用電子顯微鏡觀察，稱為酶免疫電鏡技術。 酶免疫測定根據抗原抗體反應后
酶免疫技術的概述
酶免疫技術是以酶標記的抗體或抗原為主要試劑的方法，是標記免疫技術的一種。近年來標記免疫技術飛速發展，應用不同標記物，根據不同原理、不同技術建立起來的檢測方法層出不窮，而方法的創建者往往給同類的方法以不同的名稱。因此確知某一方法屬于哪一類型，對該方法的正確理解有著重要意義。本節先敘述各種標記免疫技