關于細胞自噬的觀察檢測的介紹
細胞經誘導或抑制后，需對自噬過程進行觀察和檢測，常用的策略和技術有： 1、觀察自噬體的形成 由于自噬體屬于亞細胞結構，普通光鏡下看不到，因此，直接觀察自噬體需在透射電鏡下。Phagophore的特征為：新月狀或杯狀，雙層或多層膜，有包繞胞漿成分的趨勢。自噬體（AV1）的特征為：雙層或多層膜的液泡狀結構，內含胞漿成分，如線粒體、內質網、核糖體等。自噬溶酶體（AV2）的特征為：單層膜，胞漿成分已降解。（autophagic vacuole，AV） 2、在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成 由于電鏡耗時長，不利于監測（Monitoring）自噬形成，人們利用LC3在自噬形成過程中發生聚集的現象開發出了此技術。無自噬時，GFP-LC3融合蛋白彌散在胞漿中；自噬形成時，GFP-LC3融合蛋白轉位至自噬體膜，在熒光顯微鏡下形成多個明亮的綠色熒光斑點，一個斑點相當于一個自噬體，可以通過計數來評價自噬活性的高低。 ......閱讀全文
關于細胞自噬的觀察檢測的介紹
細胞經誘導或抑制后，需對自噬過程進行觀察和檢測，常用的策略和技術有： 1、觀察自噬體的形成 由于自噬體屬于亞細胞結構，普通光鏡下看不到，因此，直接觀察自噬體需在透射電鏡下。Phagophore的特征為：新月狀或杯狀，雙層或多層膜，有包繞胞漿成分的趨勢。自噬體（AV1）的特征為：雙層或多層膜的
關于細胞自噬的自噬形式的介紹
細胞自噬主要有三種形式：微自噬（microautophagy)、巨自噬（macroautophagy）和 分子伴侶介導的自噬 (Chaperone-mediated autophagy，CMA）。 微自噬 定義 ：指 溶酶體或者液泡內膜直接內陷底物包裹并降解的過程。 作用時間：多在種子成熟
細胞自噬過程的觀察和檢測方法
細胞自噬過程的觀察和檢測可應用于：（1）研究細胞防御和應激調控機制；（2）自噬體膜的來源問題研究。（3）細胞器自噬研究。實驗方法原理正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥，以及反義RNA干擾技術（Knockdown）、突變株篩選
細胞自噬過程的觀察和檢測方法
工具藥、融合蛋白等示蹤自噬形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥，
細胞自噬過程的觀察和檢測方法
工具藥、融合蛋白等示蹤自噬形成 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，包括自噬誘導劑、自噬抑制劑等工具藥，
關于細胞自噬的簡介
細胞自噬（autophagy）一詞來自希臘單詞auto-，意思是“自己的”，以及phagein，意思是“吃”。所以，細胞自噬的意思就是“吃掉自己”。 細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后，
細胞自噬系統介紹
自噬是近年來很熱門的領域，做一下系統的介紹或討論，內容：1） 什么是自噬？包括自噬的定義、形態學特征、分子基礎、調控等2）自噬的意義自噬與細胞存活、細胞死亡、疾病、衰老等的關系3）怎么研究自噬？主要談談怎么證明細胞發生了自噬，即自噬的判斷標準和各種研究自噬的方法及局限性。一、自噬的過程——從一張圖片
細胞自噬的研究方法介紹
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有：一、自噬誘導劑(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
細胞自噬的蛋白定位介紹
在研究自噬相關蛋白時，需對其進行定位。由于自噬體與溶酶體、線粒體、內質網、高爾基體關系密切，為了區別，常用到一些示蹤蛋白在熒光顯微鏡下來共定位： Lamp-2：溶酶體膜蛋白，可用于監測自噬體與溶酶體融合。 LysoTrackerTM 探針：有紅或藍色可選，顯示所有酸性液泡。 pDsRed2
如何檢測原代細胞中的自噬
凋亡會染色體固縮，染色加深，細胞膜內陷形成凋亡小體，最后細胞解體；壞死貌似是細胞的直接裂解（我不是很了解）；自噬是形成雙層膜的自噬泡，包裹胞質內的物質，然后與溶酶體融合消化掉內容物。
如何檢測原代細胞中的自噬
凋亡會染色體固縮，染色加深，細胞膜內陷形成凋亡小體，最后細胞解體；壞死貌似是細胞的直接裂解（我不是很了解）；自噬是形成雙層膜的自噬泡，包裹胞質內的物質，然后與溶酶體融合消化掉內容物。
關于細胞自噬的未來應用的敘述
遭到擾亂的自噬過程與帕金森氏病、2型糖尿病和老年人體內其他疾病都有所關聯。自噬基因的突變可以導致遺傳病，自噬機制受到的擾亂還與癌癥有關。目前人們正在進行緊張的研究以開發藥物，能夠在各種疾病中影響自噬機制。 人們知道自噬機制的存在已經50年，但是它在生理學和醫學中的核心重要性只有在大隅良典20世
細胞自噬過程
細胞自噬(autophagy)是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行周轉的重要過程。該過程中一些損壞的蛋白或細胞器被雙層膜結構的自噬小泡包裹后，送入溶酶體(動物）或液泡（酵母和植物 ）中進行降解并得以循環利用。
細胞自噬過程
a、吞噬泡噬過程存在于膜的形態變化，體現了膜的流動性特點，a正確；b、線粒體是有氧呼吸的場所，氧氣在線粒體中被消耗，線粒體功能退化，氧氣的消耗量減少，b正確；c、細胞及時清除受損的線粒體，維持了細胞內部環境的相對穩定，c正確；d、當細胞養分不足時，細胞“自噬作用”一般都會增強，為細胞提供更多的養分，
細胞自噬現象
細胞自噬（autophagy）的過程（以下有視頻講解）1）細胞接受自噬誘導信號后，在胞漿的某處形成一個小的類似"脂質體"樣的膜結構，然后不斷擴張，被稱為Phagophore。2）Phagophore不斷延伸，將胞漿中的任何成分，全部攬入，然后"收口"，成為密閉的球狀的autophagosome，即"
細胞自噬工具
就像我們會打掃以保持房間整潔一樣，細胞也演化出了一系列“清潔”機制，來維持有序的生命活動。自噬（autophage）就是其中最重要的機制之一。自噬于上個世紀60年代被發現，但引起科學界的廣泛關注，還是在1990年代日本科學家大隅良典（Yoshinori Ohsumi）做的相關研究。大隅良典也因此獲得
自噬的自噬的研究方法
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有：（一）自噬誘導劑1）Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激2）Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chloride
細胞自噬的研究方法
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有：一、自噬誘導劑(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Chlor
細胞自噬的研究方法
正常培養的細胞自噬活性很低，不適于觀察，因此，必須對自噬進行人工干預和調節，經報道的工具藥有：?一、自噬誘導劑 ?(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin ：模擬內質網應激(2) Carbamazepine/ L-690，330/ Lithium Ch
細胞自噬的功能作用
營養不足自噬在各種細胞功能中都發揮作用。營養不足會導致高水平的自噬，降解不需要的蛋白質，并且回收氨基酸，以合成對細胞生存至關重要的蛋白質。在高等真核生物中，自噬作用因動物在出生后切斷了來自胎盤的食物供應而被響應。自噬能力降低的突變酵母細胞會在營養缺乏的情況下迅速消失。對APG突變體的研究表明，在饑餓
自噬流的檢測方法
自噬是真核細胞降解長壽蛋白、錯誤折疊蛋白和受損細胞器的重要生物學過程。細胞自噬由多個步驟組成, 其中包括: ① 吞噬泡的形成； ② 自噬體的形成； ③ 自噬體與溶酶體融合形成自噬溶酶體； ④ 自噬溶酶體的降解。自噬流是這些步驟在細胞內連續出現的動態過程, 自噬流中的任一環節出現障礙自噬將無法完成
自噬的自噬發生過程
在此過程中，自噬體的形成是關鍵，其直徑一般為 300 ~ 900 nm，平均 500 nm，囊泡內常見的包含物有胞質成分和某些細胞器如線粒體、內吞體、過氧化物酶體等。與其他細胞器相比，自噬體的半衰期很短，只有 8 min 左右，說明自噬是細胞對于環境變化的有效反應。由于自體吞噬較少受到關注,而且很難
自噬性死亡的自噬機制
細胞為維持正常新陳代謝，其生長過程始終都有自噬現象，這已在形態學中得到證實。但自噬的消長受多種因素影響，營養缺乏、胰高血糖素可誘導自噬，胰島素抑制自噬，細胞腫脹也同胰島素一樣有抑制自噬的作用，它們的作用點在于改變氨基酸的濃度。當氨基酸濃度降低時，自噬啟動可產生氨基酸，保證器官成活；相反則自噬被抑制。
自噬體的自噬發生條件
自噬體（autophgosome）自噬溶酶體（autolysosome）當自噬體與溶酶體融合后，形成自噬溶酶體。自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡, 作用底物是內源性的,即細胞內的蛻變、破損的某些細胞器或局部細胞質。這種溶酶體廣泛存在于正常的細胞內，在細胞內起“清道夫”作用，作為細胞內細胞器和其它結構自然
細胞自噬研究策略
醫學科研實驗基礎知識筆記（四）：細胞自噬研究策略細胞自噬是指細胞在外界環境因素的影響下， 細胞利用溶酶體降解自身受損、 變性或衰老的大分子物質以及細胞器的自我消化過程。自噬是細胞的一種自我保護機制， 廣泛存在于真核細胞內， 在調節細胞生存和死亡的過程中， 起著重要的作用。當細胞發生自噬后， 在自噬相
什么是細胞自噬？
自噬（英語：Autophagy，或稱自體吞噬）是一個涉及到細胞自身結構通過溶酶體機制，負責將受損的細胞器、錯誤折疊的蛋白及其他大分子物質等運送至溶酶體降解并再利用的進化保守過程。自噬是廣泛存在于真核細胞的現象，并且可分為巨自噬、微自噬和分子伴侶介導的自噬三大類。這是一個受到緊密調控的步驟，此步驟是細
什么是細胞自噬
自噬是指細胞分解細胞質等自身構成成分的現象。自噬作用是細胞加速新陳代謝，或者在饑餓時獲得能量的一個重要手段。自噬在各種生命活動中發揮著重要作用，比如它可以加速細胞內的新陳代謝，或者在細胞處于饑餓狀態時從分解產物中獲得能量。自噬過程中，細胞需要一個特殊的“口袋”將有待分解的物質包圍并隔離起來，這個叫做
自噬流怎么檢測
1.檢測LC3II/LCI: lc3參與自噬的形成，自噬形成時，胞漿型LC3(即LC3-I)會酶解掉一小段多肽，轉變為(自噬體)膜型(即LC3-II)，LC3II升高代表自噬的啟動；2.檢測P62：P62可以通過自噬來降解，因此P62可以反映自噬的強弱。當LC3 II升高，P62同時降低，表明自噬流
自噬流怎么檢測
1.檢測LC3II/LCI: lc3參與自噬的形成，自噬形成時，胞漿型LC3(即LC3-I)會酶解掉一小段多肽，轉變為(自噬體)膜型(即LC3-II)，LC3II升高代表自噬的啟動；2.檢測P62：P62可以通過自噬來降解，因此P62可以反映自噬的強弱。當LC3 II升高，P62同時降低，表明自噬流
自噬流怎么檢測
1.檢測LC3II/LCI: lc3參與自噬的形成，自噬形成時，胞漿型LC3(即LC3-I)會酶解掉一小段多肽，轉變為(自噬體)膜型(即LC3-II)，LC3II升高代表自噬的啟動；2.檢測P62：P62可以通過自噬來降解，因此P62可以反映自噬的強弱。當LC3 II升高，P62同時降低，表明自噬流