超薄切片取材的基本要求
組織從生物活體取下以后,如果不立即進行適當處理,會由于細胞內部各種酶的作用,出現細胞自溶現象。此外,還可能由于污染,微生物在組織內繁殖使細胞的微細結構遭受破壞。因此,為了使細胞結構盡可能保持生前狀態,必須做到快、小、準、冷:(1).動作迅速,組織從活體取下后應在最短時間內 (爭取在1分鐘內) 投入2.5%戊二醛固定液。(2).所取組織的體積要小,一般不超過1mm×1mm×1mm。也可將組織修成1mm×1mm×2mm大小長條形。因為固定劑的滲透能力較弱,組織塊如果太大,塊的內部將不能得到良好的固定。(3).機械損傷要小,解剖器械應鋒利,操作宜輕,避免牽拉、挫傷與擠壓。(4).操作最好在低溫(0℃~4℃)下進行,以降低酶的活性,防止細胞自溶。(5).取材部位要準確。......閱讀全文
超薄切片取材的基本要求
組織從生物活體取下以后,如果不立即進行適當處理,會由于細胞內部各種酶的作用,出現細胞自溶現象。此外,還可能由于污染,微生物在組織內繁殖使細胞的微細結構遭受破壞。因此,為了使細胞結構盡可能保持生前狀態,必須做到快、小、準、冷:(1).動作迅速,組織從活體取下后應在最短時間內 (爭取在1分鐘內) 投入2
超薄切片儀器取材的基本要求
組織從生物活體取下以后,如果不立即進行適當處理,會由于細胞內部各種酶的作用,出現細胞自溶現象。此外,還可能由于污染,微生物在組織內繁殖使細胞的微細結構遭受破壞。因此,為了使細胞結構盡可能保持生前狀態,必須做到快、小、準、冷:(1).動作迅速,組織從活體取下后應在最短時間內 (爭取在1分鐘內) 投入2
超薄切片技術
在透射電鏡的樣品制備方法中,超薄切片技術是最基本、最常用的制備技術。超薄切片的制作過程基本上和石蠟切片相似,需要經過取材、固定、脫水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步驟。
超薄切片的制備
制備超薄切片的設備為超薄切片機,使用的刀為玻璃刀或鉆石刀。為了能切成薄片,包埋標本的包埋劑一定要達到一定的硬度,通常是用樹脂聚合包埋。方法與步驟:鋨酸和戊二醛固定樣品→丙酮逐級脫水→環氧樹脂包埋_→以熱膨脹或機械伸縮的方式切片_→重金屬(鈾,鉛)鹽染色.
電鏡超薄切片流程
超薄切片流程包括以下幾個步驟:?1、切片前的準備:銅網清洗(用丙酮和乙醇浸洗)?2、支持膜制備:常用Formvar膜(用聚乙烯醇縮甲醛和氯仿配置,濃度為0.5%)?3、玻璃刀制備:專用制刀機制作。?4、半薄切片光鏡定位(主要確定超薄切片的位置)。?5、修塊(表面修成梯形或長方形)。?6、超薄切片:專
超薄切片技術簡介
由于電鏡產生的電子束穿透能力很弱,必須把標本切成厚度小于0.1um以下的薄片才適用,這種薄片稱為超薄切片。常用的超薄切片厚度是50-70nm。在透射電鏡的樣品制備方法中,超薄切片技術是最基本、最常用的制備技術。超薄切片的制作過程基本上和石蠟切片相似,需要經過取材、固定、脫水、浸透、包埋聚合、切片及染
電鏡所需的切片之超薄切片介紹
超薄切片(Ultrathin sectioning) 系供電子顯微鏡觀察用的切片。由于電子穿透組織的能力低, 所以供電子顯微鏡觀察用的切片要求極薄(一般厚度為40~50 nm) ,即為超薄切片??。
徠卡冰凍超薄切片技術
?徠卡冰凍超薄切片技術是使樣品迅速冷凍,然后用冷凍切片機進行徠卡冷凍超薄切片。它省去了普通超簿切片法中繁雜的化學固定與包埋操作,在細胞化學研究中有著特殊的用途。為了很好保存形態結構,必須使游離水形成玻璃態的冰,防止產生冰晶。這就要求很高的冰凍速率(~度/秒),這對于傳熱性能差的生物材料來說是困難的。
冷凍超薄切片術
中文名稱冷凍超薄切片術英文名稱cryoultramicrotomy;ultracryotomy定 義將低溫冷凍標本在低溫超薄切片機中制成供電鏡觀察使用的超薄切片的技術。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
超薄切片儀器的功能介紹
超薄切片(Ultrathin sectioning) 系供電子顯微鏡觀察用的切片。由于電子穿透組織的能力低, 所以供電子顯微鏡觀察用的切片要求極薄(一般厚度為40~50 nm) ,即為超薄切片 。
關于病理切片制作的取材介紹
(1)病理切片— 材料新鮮:取材組織愈新鮮愈好,人體組織一般在離體后,動物組織在處死后迅速固定,以保證原有的形態學結構。 (2)病理切片—?組織塊的大小:所取組織塊較理想的體積為2.0cm×2.0cm×0.3cm,以使固定液能迅速而均勻地滲入組織內部,但根據制片材料和目的不同,組織塊的較理想體
快速了解冷凍含水超薄切片
冷凍超薄切片技術是在光學顯微冷凍切片和電鏡超薄切片的基礎上發展起來的。由于常規超薄切片技術中應用化學固定、有機溶劑脫水、樹脂包埋等一系列處理,均可使生物樣品受到物理和化學性損傷,引起組織和細胞內蛋白質分子變性,大部分可溶性成分及某些生物大分子物質被抽提或發生移位。為了彌補這些缺陷,人們創造了冷凍
冷凍超薄切片原理和使用
冷凍超薄切片技術是一種為了研究更接近于生物生活狀態結構和功能而發展起來的電鏡樣品制備技術。它是把樣品進行冷凍固定后,進行超薄切片,省去了經典超薄切片法的長時間的固定、脫水和也埋等處理。樣勵在切片前后,不經過強烈的化學處理,約胞結構能得到很好的保存;尤其是可溶性成分小會被抽提,使得電鏡圖像更接近于生物
透射電鏡標本取材的基本要求
取材的基本要求如下:?組織從生物活體取下以后,如果不立即進行及時固定處理,就有可能出現缺血缺氧后的細胞超微結構的改變,如細胞出現細胞器變性或溶解等現象,這些都可造成電鏡觀察中的人為假象,直接影響觀察結果分析,甚至導致實驗失敗。此外,由于處理不當造成組織微生物污染,導致細胞的超微結構結構遭受破壞。?因
冷凍超薄切片術技術簡介
中文名稱冷凍超薄切片術英文名稱cryoultramicrotomy;ultracryotomy定 義將低溫冷凍標本在低溫超薄切片機中制成供電鏡觀察使用的超薄切片的技術。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
超薄切片機儀器的功能介紹
超薄切片機制作供透射型電子顯微鏡用的超薄切片的切片機。它可將各種包埋劑包埋的樣品用玻璃刀或鉆石刀切成50納米以下的超薄切片。
石蠟塊做超薄切片的樣品制作流程
石蠟塊做超薄切片的樣品制作流程如下:?1、取材:從石蠟塊上相應部位切下約1mm3?的小塊。?2、溶蠟:將取下的標本放在一張濾紙上,40℃烘箱內烘1小時,然后轉放入二甲苯溶液中40℃烘箱內繼續浸泡8—12h。?3、水化:純丙酮30分鐘、90%、80%、70%丙酮各15分鐘。?4、漂洗:用緩沖液漂洗(0
制備超薄切片儀器所需樣本的方法與步驟
制備超薄切片的設備為超薄切片機,使用的刀為玻璃刀或鉆石刀。為了能切成薄片,包埋標本的包埋劑一定要達到一定的硬度,通常是用樹脂聚合包埋。方法與步驟:鋨酸和戊二醛固定樣品→丙酮逐級脫水→環氧樹脂包埋_→以熱膨脹或機械伸縮的方式切片_→重金屬(鈾,鉛)鹽染色.
透射電鏡超薄切片和染色實驗
實驗步驟1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。(2) 取材小,
透射電鏡超薄切片和染色實驗
實驗步驟1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。(2) 取材小,
透射電鏡超薄切片和染色實驗
實驗方法原理?實驗步驟?1. 取材 對一般的動物組織取材的要求如下:(1) 標本材料要新鮮,取材速度要快:由于生物組織離體后,細胞將會立即釋放出各種水解酶而引起細胞自溶,使其微細結構發生改變而產生假象,故要盡量保持材料的新鮮,經解剖、手術或活檢取材后迅速投入固定液內,以盡量保持細胞在活體狀態的結構。
透射電鏡生物制樣超薄切片
這是一個為電鏡觀察提供極薄(約為60nm)的樣品切片的過程,它是整個制樣程序的中心環節。大部分生物樣品只有被切割成超薄切片的形式才能在電鏡下進行觀察。能否提供理想的超薄切片關系到能否進行電鏡觀察,以及能否有令人滿意的觀察效果。在此以前的環節都是為了能給切片提供一個合格、切割性好的樣品,而最后的染
聚焦離子束法制備冷凍含水超薄切片
低溫電子斷層成像三維重構(cryo-ET)技術是發展結構生物學和細胞生物學重要的研究手段。該技術可以得到更真實的接近天然狀態的細胞內部高分辨率的三維結構以及蛋白質大分子定位及相互作用的信息,是蛋白質組學研究的重要輔助手段被成為“可視化蛋白質組學”(Visual Approach to Prote
連續斷層3D重構中的超薄切片制備
當需要以納米級分辨率觀察樣品超微結構時,科學家通常借助電子顯微鏡(觀察表面結構的掃描電鏡 SEM 和觀察內部結構的透射電鏡 TEM)——它們是當前科研界可使用的最大顯微成像工具。電鏡成像要求對樣品進行通常 20-150 nm的超薄切片,使用超薄切片機切割的切片厚度薄、表面平整、光滑且無人為干
連續斷層3D重構中的超薄切片制備
當需要以納米級分辨率觀察樣品超微結構時,科學家通常借助電子顯微鏡(觀察表面結構的掃描電鏡 SEM 和觀察內部結構的透射電鏡 TEM)——它們是當前科研界可使用的最大顯微成像工具。電鏡成像要求對樣品進行通常 20-150 nm的超薄切片,使用超薄切片機切割的切片厚度薄、表面平整、光滑且無人為干擾因
透射電鏡樣品超薄切片常規制作規程
? 1.取材:根據實驗目的取材,要求部位準確,體積小于2mm3 2.醛類固定:用2%-3%的戊二醛固定2小時 3.清洗:用磷酸緩沖液清洗3次,每次10min 4.鋨酸固定:用1%-2%的鋨酸固定2~3小時 5.清洗:用磷酸緩沖液清洗3次,每次10min 6.脫水:用50%、70%、80%、
電鏡組織化學技術樣品制備
良好的樣品制備是電鏡酶細胞化學技術成功的關鍵。酶電鏡組織化學 樣品制備要求既要保存酶的活性,同時又要保存細胞的超微結構。并能防止酶反應產物擴散。每種酶對固定液的要求和顯示方法雖不盡相同。但電鏡酶組織化學的基本程序相似,下面簡要介紹其基本要求: 1.取材? 組織標本的取材是樣品制備的第一步,
超薄切片技術在材料科學研究中的應用
超薄切片技術是一種常見的透射電鏡制樣技術,在材料科學領域有著非常廣泛的應用,尤其適合有機高分子材料和無機粉體材料,可以非常簡單方便的獲得納米級切片,供透射電鏡觀察;對金屬材料和其他無機材料也有一定的應用。另外,因為這一技術也可以非常方便的獲得樣品的截面信息,因此在掃描電鏡和原子力顯微鏡制樣方面也有一
清華大學儀器共享平臺Leica-冷凍超薄切片機
儀器名稱:冷凍超薄切片機儀器編號:16002271產地:德國生產廠家:Leica型號:UC7+FC7出廠日期:201408購置日期:201602所屬單位:生命學院>蛋白質研究技術中心>冷凍電鏡平臺樣品制備>設施細胞冷凍電鏡平臺放置地點:清華大學生物譯學館U6-109(何添樓北側,地下六層出1號電梯連
電鏡與樣品制備技術
電鏡樣品取材方法 1 動物及人體組織的取材 動物組織的取材,應在麻醉(1%戊巴比妥鈉按5ml/kg體重腹腔注射)或斷頭急性處死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小塊組織,放在干凈的紙板上,滴一滴冷卻的固定液,用新的、無油污鋒利的(雙面)刀片將材料切成大約1㎜寬,2~3㎜長的小塊,從中挑選損傷小的小條