谷胱甘肽的高效液相色譜法測量相關介紹
原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。 流動相:磷酸二氫鈉和辛烷磺酸鈉混合溶液(磷酸二氫鈉3.0 g、辛烷磺酸鈉1.0 g,加水溶解并定容至500 mL,用磷酸調溶液pH為3):乙腈 = 96:4(體積比)。 檢測波長:210 nm,流速0.8 mL/min,柱溫30℃,進樣量10 μL [9] 。 ②制作標準溶液 準確稱取谷胱甘肽標準品適量,用去離子水溶解于容量瓶中,混合均勻,定容,制成25 μg/mL、50 μg/mL、100 Vg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL系列濃度樣品液,作為標準溶液 。 ③樣品制備 準確稱取谷胱甘肽樣品,加去離子水,混合均勻,制成濃度為25 ~ 800 μg/m......閱讀全文
谷胱甘肽的高效液相色譜法測量相關介紹
原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)。 流動相:磷酸二氫鈉和辛烷磺酸鈉混合溶液(磷酸二氫鈉3.0 g、
關于谷胱甘肽的高效液相色譜法檢測介紹
一、谷胱甘肽的高效液相色譜法檢測原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 二、谷胱甘肽的高效液相色譜法檢測的操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm)
高效液相色譜法正反色譜的相關介紹
正相色譜法 采用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動相為相對非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用于分離中等極性和極性較強的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。 反相色譜法 一般用非極性固定相(如
高效液相色譜法的相關敘述
高效液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發展起來的一項高效、快速的分析分離技術,是現代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時,由于與固定相(station phase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同,在固定
高效液相色譜法相關詞匯基線
基線(base line)——經流動相沖洗,柱與流動相達到平衡后,檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應平行于時間軸。
高效液相色譜法相關詞匯峰高
峰高(peak height,h)—峰的最高點至峰底的距離。
高效液相色譜法相關詞匯漂移
漂移(drift)——基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩定所引起,柱內的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產生漂移。
高效液相色譜法相關詞匯噪音
噪音(noise)——基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。
液相色譜儀的高效液相色譜法的相關介紹
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體
谷胱甘肽的DTNB比色法測量的介紹
原理:DTNB與谷胱甘肽的巰基反應生成黃色的5 ?-硫代 ?-2 ?-硝基苯甲酸,在412 nm波長處有最大吸收峰,而DTNB在400nm以上幾乎沒有吸收峰。向含有谷胱甘肽的試樣中加入少量的DTNB,將反應液在412 nm處測定吸收值,根據吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量 。 方法步驟: 1
高效液相色譜法相關詞匯色譜圖
色譜圖(chromatogram)——樣品流經色譜柱和檢測器,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elution profile)。
高效液相色譜法相關詞匯峰面積
峰面積(peak area,A)—峰與峰底所包圍的面積。
高效液相色譜法相關詞匯峰底
峰底—基線上峰的起點至終點的距離。
高效液相色譜法相關詞匯峰寬
峰寬(peak width,W)—峰兩側拐點處所作兩條切線與基線的兩個交點間的距離。W=4σ
高效液相色譜法相關詞匯色譜峰
色譜峰(peak)——組分流經檢測器時響應的連續信號產生的曲線。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對稱形正態分布曲線(高斯Gauss曲線)。
高效液相色譜法相關詞匯分離度
分離度(resolution,R)——相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度。R≥1.5稱為完全分離。
高效液相色譜法相關詞匯保留時間
保留時間(retention time,tR)——從進樣開始到某個組分在柱后出現濃度極大值的時間。
高效液相色譜法相關詞匯拖尾因子
拖尾因子(tailing factor,T)——T=,用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetry factor)或不對稱因子(asymmetry factor)。
高效液相色譜法相關詞匯半峰寬
半峰寬(peak width at half-height,Wh/2)—峰高一半處的峰寬。Wh/2=2.355σ
谷胱苷肽的高效液相色譜法檢測介紹
原理:高效液相色譜法是由于溶質在同定相和流動相之間的分配系數、親和力、分子大小、吸附能力等不同,而進行連續分離的過程。 操作步驟: ①色譜條件 色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm) 。 流動相:磷酸二氫鈉和辛烷磺酸鈉混合溶液(磷酸二氫鈉3.0 g
高效液相色譜法檢測苯并芘的介紹
高效液相色譜法是目前應用范圍最廣的色譜分析法,首先選取合適的液體作為流動相,采用高壓輸液系統,將流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離,再進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。目前,我國檢測動植物油中苯并芘主要采用GB/T 22509-2008(3)中規定的反相高效液相色譜法,但該
關于離子高效液相色譜法的介紹
用離子交換樹脂為固定相,電解質溶液為流動相。以電導檢測器為通用檢測器,為消除流動相中強電解質背景離子對電導檢測器的干擾,設置了抑制柱。試樣組分在分離柱和抑制柱上的反應原理與離子交換色譜法相同。 以陰離子交換樹脂(R-OH)作固定相,分離陰離子(如Br-)為例。當待測陰離子Br-隨流動相(NaO
關于高效液相色譜法的發展介紹
高效液相色譜法是用微細顆粒得到高效分離的辦法,也已用于薄層層析。使用5~10微米的吸附劑制板,可得較好的分離效果,為與一般的薄層層析法相區別,稱為高效薄層層析。其優點是樣品量少(只需納克量樣品)、展開距離小、展開時間短,是薄層層析法的一個重要發展。
潑尼松的測定—高效液相色譜法介紹
方法名稱潑尼松的測定—高效液相色譜法應用范圍該方法采用高效液相色譜法測定潑尼松的含量。該方法適用潑尼松。方法原理供試品和內標均制成甲醇溶液,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,于波長254nm處檢測潑尼松(C21H26O5)和內標乙酰苯胺的吸收值,計算出其含量。試劑1、甲醇2、水3、四
高效液相色譜法相關詞匯理論塔板數
理論塔板數(theoretical plate number,N)——用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。
高效液相色譜法的梯度洗脫的介紹
類似于GC中的程序升溫。已成為現代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果。梯度洗提可以分為兩種: a.低壓梯度(也叫外梯度):在常
高效液相色譜法檢測蓖麻毒素的介紹
高效液相色譜檢測將待測物質溶于流動相中,利用色譜柱固定相將流動相的組成進行分離,對檢測器收集到的峰信號轉換為待測物質濃度,進而來判定待測物質含量的一種方法,具有速度快、分辨率高、靈敏度高等特點。采用PROTEIN KW-802.5凝膠色譜柱,在柱溫25℃、流速1mL/min、進樣量10μL的條件
高效液相色譜法儀器的梯度洗脫介紹
類似于GC中的程序升溫。已成為現代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果。梯度洗提可以分為兩種: a.低壓梯度(也叫外梯度):在常
關于高效液相色譜法的實例說明介紹
高效液相色譜法,只要求試樣能制成溶液,而不需要氣化,因此不受試樣揮發性的限制。對于高沸點、熱穩定性差、相對分子量大(大于400以上)的有機物(這些物質幾乎占有機物總數的75%~80%)原則上都可應用高效液相色譜法來進行分離、分析。據統計,在已知化合物中,能用氣相色譜分析的約占20%,而能用液相色
關于高效液相色譜法的歷史發現介紹
1903年俄國植物化學家茨維特(Tswett)首次提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法 chromatography (來自希臘字, chroma 意思是顏色, graphy 意思是記錄 ?-直譯為顏色記錄)來描述他的彩色