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  • DNA聚合酶的基本特性

    DNA聚合酶,又稱DNA依賴的DNA聚合酶(DNA—dependent DNA polymerase,DNA pol),它是以親代DNA為模板,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的,被稱為DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymerase Ⅰ,簡稱polⅠ)以后陸續在其他原核生物及真核生物中找到了多種DNA聚合酶。這些DNA聚合酶的共同特征為:①具有5’→3’聚合酶活性,這就決定了DNA只能沿著5’→3’方向合成;②需要引物,DNA聚合酶不能催化DNA新鏈從頭合成,只能催化dNTP加入核苷酸鏈的3'-OH末端。因而復制之初需要一段DNA引物的3’一OH端為起點,合成5’→3’方向的新鏈。......閱讀全文

    DNA聚合酶的基本特性

    DNA聚合酶,又稱DNA依賴的DNA聚合酶(DNA—dependent DNA polymerase,DNA pol),它是以親代DNA為模板,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的,被稱為DNA聚合酶Ⅰ(DNA

    DNA聚合酶的基本信息和特性

    也稱耐高溫DNA聚合酶。1988年,Saiki從嗜熱水生真菌Thermus aquatics YT-1株中分離得到,該菌株于1969年從美國黃石國家森林公園火山溫泉中分離出。特性良好的熱穩定性;70℃ 2h,殘留90%活性;93℃ 2h,殘留60%活性;94℃ 2h,殘留40%活性。5’→3’聚合酶

    DNA聚合酶的特性

    良好的熱穩定性;70℃ 2h,殘留90%活性;93℃ 2h,殘留60%活性;94℃ 2h,殘留40%活性。5'→3'聚合酶活性,對dATP有優先聚合活性;5'→3'外切酶活性;無3'→5'外切酶活性。

    DNA聚合酶的特性

    DNA聚合酶有多種,E.coli就有三種。通常DNA聚合酶具有以下共同特點:?①需要DNA模板,因此這類酶又稱為依賴DNA的DNA聚合酶;②需要RNA或DNA作為引物(primer),即DNA聚合酶不能從頭催化;?③催化dNTP加到引物的3'-OH末端,其速率為1000nt/min,因而DN

    DNA聚合酶的特性

    原核生物大腸桿菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中發現,到目前為止已確定有5種類型,分別為DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V,都與DNA鏈的延長有關。?其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比較明確。DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe

    聚合酶的基本特性

    聚合作用在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進入結合位點后,可能使酶的構象發生變化,促進3'-OH與5

    復制聚合酶的基本特性

    中文名稱復制聚合酶英文名稱replication polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。大腸桿菌細胞內真正負責重新合成DNA的DNA聚合酶Ⅲ。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)

    DNA聚合酶的特性、用途和缺點

    特性良好的熱穩定性;70℃ 2h,殘留90%活性;93℃ 2h,殘留60%活性;94℃ 2h,殘留40%活性。5'→3'聚合酶活性,對dATP有優先聚合活性;5'→3'外切酶活性;無3'→5'外切酶活性。用途聚合酶鏈反應(polymerase chai

    Taq-DNA-聚合酶的基本信息

    中文名稱Taq DNA 聚合酶英文名稱Taq DNA polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。存在于水生嗜熱菌(Thermus aquaticus)的嗜熱DNA聚合酶,可在74℃復制DNA,在95℃仍具有酶活力。該酶可在離體條件下,以DNA為模板,延伸引物,合成雙鏈DNA。這個酶只有

    Mlu-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Mlu DNA聚合酶英文名稱Mlu DNA polymerase定  義來自藤黃微球菌(Micrococcus luteus)的DNA聚合酶。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)

    Tth-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Tth DNA聚合酶英文名稱Tth DNA polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。存在于嗜熱細菌(Thermus thermophilus) 的耐熱DNA聚合酶,有逆轉錄活性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)

    Pfu-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Pfu DNA聚合酶英文名稱Pfu DNA polymerase定  義存在于嗜熱古菌(Pyrococcus furiosus) 的耐熱DNA聚合酶,兼具5′→3′DNA聚合酶活性及3′→5′外切酶活性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)

    Vent-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Vent DNA聚合酶英文名稱Vent DNA polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。從極端嗜熱細菌(Thermococcus litoralis)中提純的耐熱DNA聚合酶,有3′→5′外切酶活性。用此酶催化的PCR產物為平端。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(

    Vent-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Vent DNA聚合酶英文名稱Vent DNA polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。從極端嗜熱細菌(Thermococcus litoralis)中提純的耐熱DNA聚合酶,有3′→5′外切酶活性。用此酶催化的PCR產物為平端。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(

    Mlu-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Mlu DNA聚合酶英文名稱Mlu DNA polymerase定  義來自藤黃微球菌(Micrococcus luteus)的DNA聚合酶。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)?

    Pfu-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Pfu DNA聚合酶英文名稱Pfu DNA polymerase定  義存在于嗜熱古菌(Pyrococcus furiosus) 的耐熱DNA聚合酶,兼具5′→3′DNA聚合酶活性及3′→5′外切酶活性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)

    Tth-DNA聚合酶的基本信息

    中文名稱Tth DNA聚合酶英文名稱Tth DNA polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。存在于嗜熱細菌(Thermus thermophilus) 的耐熱DNA聚合酶,有逆轉錄活性。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),酶(二級學科)

    Taq-DNA-聚合酶的基本信息

    中文名稱Taq DNA 聚合酶英文名稱Taq DNA polymerase定  義編號:EC 2.7.7.7。存在于水生嗜熱菌(Thermus aquaticus)的嗜熱DNA聚合酶,可在74℃復制DNA,在95℃仍具有酶活力。該酶可在離體條件下,以DNA為模板,延伸引物,合成雙鏈DNA。這個酶只有

    關于DNA聚合酶I的基本介紹

      DNA聚合酶I(DNA-pol I),分子量109kD,為單肽鏈組成,400分子數/細胞,是原核生物的DNA聚合酶,由于發現最早命名為DNA聚合酶I,其他原核生物的DNA聚合酶,按發現的先后順序分別命名為DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶Ⅴ。

    DNA聚合酶的基本信息和共性

    DNA聚合酶,又稱DNA依賴的DNA聚合酶(DNA—dependent DNA polymerase,DNA pol),它是以親代DNA為模板,催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一類酶。此酶最早是美國科學家Arthur Komberg于1957年在大腸桿菌中發現的,被稱為DNA聚合酶Ⅰ(DNA

    聚合酶的功能特性

    聚合作用在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進入結合位點后,可能使酶的構象發生變化,促進3'-OH與5

    DNA聚合酶的功能

      1)通過核苷酸聚合反應,使DNA鏈沿5’→3’方向延長(DNA聚合酶活性)[1]  2)催化由3’端水解DNA鏈(3’→ 5’核酸外切酶活性,用于切除錯配的堿基)[1]  3)催化由5’端水解DNA鏈(5’→ 3’核酸外切酶活性,用于切除引物)[1]  4)催化由3’端使DNA鏈發生焦磷酸解  

    DNA聚合酶的應用

    E.coli的DNA pol Ⅰ涉及DNA損傷修復,在半保留復制中起輔助的作用。DNA polⅡ在修復損傷中也具有重要的作用。DNA polⅢ是一種多亞基的蛋白質,在DNA新鏈的從頭合成中起復制酶的作用。復制的忠實性問題會影響到翻譯的精確性,這種忠實性主要依賴于堿基的特異性配對。據估計每個堿基對將有

    DNA聚合酶的發現

      在50年代的中期,A. Kornberg和他的同事們就想到DNA的復制必然是一種酶的催化作用,于是決心分離出這種酶并研究其結構和作用機制。為了達到這個目的,他們分離的蛋白,然后加到體外合成系統中即 同位素標記的dNTP、Mg2+及模板DNA,經過大量的工作,于1956年終于發現了DNA聚合酶Ⅰ(

    DNA聚合酶的功能

      [1] 聚合作用:在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸  加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。 酶的專一性主要表現為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有 催化作用。dNTP進入結合位點后,可能使酶的 構象發生變化,促進3&

    DNA聚合酶的定義

      真核細胞有5種DNA聚合酶,分別為DNA聚合酶α(定位于胞核,參與復制引發,不具有5'-3'外切酶活性及3'-5'外切酶活性,有5'-3'聚合酶活性),β(定位于核內,參與高保真度復制,不具有5'-3'外切酶活性,其中疑似存在5&#

    DNA聚合酶的用途

    聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction, PCR)。Taq酶擴增的PCR產物,3'末端總是帶有1個非模板依賴型的突出堿基,而這個堿基幾乎總是A,因為Taq酶對dATP具有優先聚合活性,故可用T載體克隆。

    DNA聚合酶的概述

      DNA聚合酶(DNA polymerase)是 細胞復制DNA的重要作用酶。DNA聚合酶 , 以DNA為復制模板,從將DNA由5'端點開始復制到3'端的酶。DNA聚合酶的主要活性是催化DNA的合成(在具備模板、 引物、dNTP 等的情況下)及其相輔的活性。  真核細胞有5種DNA

    DNA聚合酶的缺點

    缺點無3'→5'閱讀校正功能,在PCR擴增過程可引起錯配,30次循環錯配率約0.25%。措施:選擇高保真Taq酶,如Pfu。原因:Pfu具有3'→5'外切酶活性。注意:Pfu擴增產物為平末端。

    DNA聚合酶的種類

    原核生物大腸桿菌DNA聚合酶DNA聚合酶最早在E.coli中發現,到目前為止已確定有5種類型,分別為DNA聚合酶Ⅰ、DNA聚合酶Ⅱ、DNA聚合酶Ⅲ、DNA聚合酶Ⅳ和DNA聚合酶V,都與DNA鏈的延長有關。其中DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ研究得比較明確。?DNA聚合酶Ⅰ是1956年由Arthur Kombe

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