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  • RNA病毒類型提取方法

    試劑準備1、 TROzlo試劑、氯仿、75%乙醇(0.1% DEPC配制)。2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡。3、 0.1%DEPC水:100ml dd水中加入DEPC0.1ml,充分振蕩,37℃孵育12h以上,121℃高壓滅菌20min,于4℃保存。操作步驟1、 樣品處理(1) 組織:50-100mg組織中加入1ml TROzlo試劑。(2) 單層細胞:加入TROzlo試劑1ml/cm2平板。(3) 懸浮細胞:處理前洗滌細胞,以防止RNA降解。每5-10×105動物、植物或酵母細胞,或1×107細菌加入1 ml TROzlo試劑。2、 將上述樣品于15-30℃靜置5min,使核蛋白充分解離。3、 加入0.2ml(1 ml TROzlo試劑)氯仿,蓋緊蓋子,充分劇烈振蕩15s并于15-30℃靜置2-3min。4、 于2-8℃ 12000g離心15min。離心后樣品分層,上層水相中含RNA,下層有機相中含蛋白和DNA。5......閱讀全文

    RNA病毒類型提取方法

    試劑準備1、 TROzlo試劑、氯仿、75%乙醇(0.1% DEPC配制)。2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡。3、 0.1%DEPC水:100ml dd水中加入DEPC0.1ml,充分振蕩,37℃孵育12h以上,121℃高壓滅菌20min,于4℃保存。操作步驟1、 樣品處理(1) 組織:5

    提取病毒RNA方法

    一、用異硫氰酸胍提取提禽流感病毒的詳細步驟,可參考(我提過N次做定量PCR都沒問題):1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,

    病毒RNA提取實驗方法

    實驗概要本實驗旨在掌握病毒RNA提取的實驗方法,包括用異硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA、TRIzol LS提取病毒RNA及Trizol法提禽流感病毒RNA。實驗步驟1. 用異硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA1) 取200ul樣品數 陰性對照 陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管; 2) 加600u

    病毒RNA提取實驗方法

    1,用異硫氰酸胍提取提病毒的詳細步驟,可參考(我提過N次做定量PCR都沒問題):1.取 200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,另取

    病毒RNA提取實驗方法(protocol)

    1,用異硫氰酸胍提取提禽流感病毒的詳細步驟,可參考(我提過N次做定量PCR都沒問題):1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,

    病毒RNA提取實驗

    TE-飽和酚/氯仿提取法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ,并且其極性與mRNA 極性相同,植物病毒RNA 提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲

    病毒RNA提取實驗

    實驗方法原理 大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ,并且其極性與mRNA 極性相同,植物病毒RNA 提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。實驗材料 TMV病毒液試劑、試劑盒 TE-飽和酚:氯仿氯仿NaAc乙醇TE緩沖液雙菌水儀器、耗材 冷凍臺式離心機低溫真空干燥儀電泳儀電泳槽實驗步驟 一、實驗

    植物病毒RNA提取

    大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。?  一、材料?  提純TMV病毒液(10mg/ml)。?  二、設備?  冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。?  三、試劑?  TE-飽和酚:氯仿(1:1),氯仿

    病毒RNA提取實驗

    病毒RNA提取可以:(1)用于RNA病毒復制機制研究;(2)用于反向遺傳學研究;(3)用于分子病毒學其他研究。實驗方法原理大多植物病毒RNA 為單鏈RNA ,并且其極性與mRNA 極性相同,植物病毒RNA 提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。實驗材料TMV病毒液試劑、試劑盒TE-飽和酚:氯

    RNA病毒類型介紹

    病毒的核酸包括雙鏈DNA(dsDNA)、單鏈DNA(ssDNA)、雙鏈RNA(dsRNA)、正單鏈RNA(+ssRNA)、負單鏈RNA(-ssRNA)五種不同類型。病毒顆粒中的組成成分有簡有繁,有的用顆粒自帶專門用于病毒復制的核酸酶,有的則無。有些RNA病毒的RNA并不僅有一個分子,如流感病毒有8條

    流感病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 10%SDS 蛋白酶 K lOXLiCI 溶液 RSB 飽和的酚 氯仿 異戊醇 2mol L 乙酸鈉 無水乙醇 TSE 溶液 LiCl 緩沖液平衡酚 TSE 飽和酚 4mol LLiCL實驗步驟 一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LT

    甲型肝炎病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 TSES 緩沖液 TSES 緩沖液飽和酚 氯仿 辛醇 乙酸鉀 乙醇 緩沖液 A lmol L

    流感病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 10×RSB 溶液 ?10%SDS ?蛋白酶 K ?lOXLiCI 溶液 ?RSB 飽和的酚 ?氯仿

    乙型腦炎病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 酚氯仿 異戊醇 乙醚 KAc 乙醇 DEPC 處理水 TBE 緩沖液 上樣液 KCI。儀器、耗材 透析袋實驗步驟 一 材料與設備1) 酚:氯仿:異戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 處理水6)TBE 緩沖液7〕上樣液:40% 甘油,0.

    甲型肝炎病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒 TSES 緩沖液TSES 緩沖液飽和酚氯仿辛醇乙酸鉀乙醇緩沖液 Almol LNaH2P04 緩沖液氯胺 T 溶液Na125I5 mmol LNa2S2O5lOOmmol LKINET 緩沖液酵母 tRNA蔗糖纖維素柱平衡液三重蒸餾水0.1mol LNaOH5 mmol L

    乙型腦炎病毒-RNA-提取

    ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酚 氯仿 異戊醇 ?乙醚 ?KAc ?乙醇 ?DEPC 處理水 ?TBE 緩沖

    2.8.3-甲型肝炎病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒TSES 緩沖液TSES 緩沖液飽和酚氯仿辛醇乙酸鉀乙醇緩沖液 Almol LNaH2P04 緩沖液氯胺 T 溶液Na125I5 mmol LNa2S2O5lOOmmol LKINET 緩沖液酵母 tRNA蔗糖纖維素柱平衡液三重蒸餾水0.1mol LNaOH5 mmol LEDTA0.1

    植物病毒(plant-viruses)RNA提取

    ?? 大多植物病毒RNA為單鏈RNA,并且其極性與mRNA極性相同,植物病毒RNA提取較為簡單,一般使用酚氯仿即可獲得滿意結果。   一、材料   提純TMV病毒液(10mg/ml)。   二、設備   冷凍臺式離心機,低溫真空干燥儀,電泳儀,電泳槽。   三、試劑   TE

    2.8.2-乙型腦炎病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒酚氯仿異戊醇乙醚KAc乙醇DEPC 處理水TBE 緩沖液上樣液KCI。儀器、耗材透析袋實驗步驟一 材料與設備1) 酚:氯仿:異戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 處理水6)TBE 緩沖液7〕上樣液:40% 甘油,0.4% 啡叮溴紅的 TB

    2.8.1-流感病毒-RNA-提取

    試劑、試劑盒10×RSB 溶液10%SDS蛋白酶 KlOXLiCI 溶液RSB 飽和的酚氯仿異戊醇2mol L 乙酸鈉 無水乙醇TSE 溶液LiCl 緩沖液平衡酚TSE 飽和酚4mol LLiCL實驗步驟一 材料與設備1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LTris,O.OOlmol/

    TRIzol-RNA提取方法

    (一)試劑準備1.TRIzol試劑。2.氯仿3.異丙醇4.75%乙醇(DEPC H2O配制)5.DEPC H2O(二)操作步驟1. 樣品處理:(1)培養細胞:收獲細胞1-5×107,移入1.5ml離心管中,加入1ml Trizol,混勻,室溫靜置5min。(2)組織:取50-100mg組織(新鮮或-

    TRIzol-RNA提取方法

    研究基因的表達和調控時常常要從組織和細胞中分離和純化RNA。TRIzol RNA提取方法:(1)操作簡單的,提取方便,回收率高; (2)提取的RNA的質量高,對cDNA庫,RT-PCR和Northern?Blot等分子生物學實驗起著很重要的影響。實驗方法原理Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采

    提取植物rna方法

      提到RNA的提取,是不是充滿了心酸和無奈呀,抽提過程中已十分小心謹慎了,但是有時候還是會出現RNA污染、降解的悲劇。別怕,今天小編給您介紹一種新的RNA提取方法,比以前的方法更快、更有效和更可靠,讓您從此不用再擔心的RNA的抽提了。  眾所周知:獲得純凈、完整的RNA樣品,是對一種植物的活性基因

    TRIzol-RNA提取方法

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Trizol是一種新型總RNA抽提試劑,采用變性劑即內含異硫氰酸胍酚和β-巰基乙醇等變性物質,能迅速破碎細胞,抑制細胞釋放出的核酸酶。異硫氰酸胍屬于解偶劑,是一類強力的蛋白質變性劑,可溶解蛋白質,并使蛋白質二級結構消失,細胞結構

    禽流感病毒RNA提取protocol

    1,用異硫氰酸胍提取1.取200ul樣品數+陰性對照+陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管2.加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿,顛倒混勻3.13000rpm離心15min4.在第3步離心快結束時,另取同樣多eppendorf管,加入400ul -20度預冷的異丙

    禽流感病毒RNA的三種提取方法

    實驗概要本實驗介紹了禽流感病毒RNA的三種提取方法:異硫氰酸胍提取,TRIzol LS提取及Trizol法。實驗步驟1. 用異硫氰酸胍提取?? 1) 取200ul樣品數 陰性對照 陽性對照個1.5ml滅菌eppendorf管。?? 2) 加600ul異硫氰酸胍,然后加入對照和樣品,再加200ul氯仿

    RNA提取實驗方法

    總RNA(total RNA)和信使RNA(mRNA)的抽提(自己的總結)1、實驗目的提取人體細胞的總RNA和mRNA。?2、本實驗所需試劑1)、CNE-2細胞及培養細胞的一系列條件,2)、PBS緩沖液, TRIZOL試劑,3)、DEPC處理過的水、大、中、小Tip及1.5 ml EP管,4)、新的

    細胞RNA的提取方法

    (一)細胞總RNA的提取1、6孔板細胞匯合度為90-100%時,取出無菌室,去其上清,用PBS洗兩次后,每孔加TRIZOL試劑 1 ml,搖勻,無菌罩內消化3-5 min。2、將各孔內消化好的細胞裂解液吸到一DEPC處理過的1.5 ml EP管中,加新開的氯仿0.2 ml,輕搖15 s。3、室溫靜置

    組織RNA提取方法介紹

    1. 最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0~4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后加入一定量的TRIZOL試劑,

    RNA提取心得(組織RNA提取和培養細胞的RNA提取)

    一.組織RNA提取 1.最好新鮮組織,這樣RNA提取的效果比較好,這是肯定的。 2. 如果不是新鮮的(最好在半年之內,-80℃或者液氮中凍存的)組織,注意不要反復凍融,從冰凍狀態拿到0-4℃,注意不要拿到常溫,待組織解凍后,用 DEPC泡過的剪刀剪一小塊組織,稱重后,放到預冷的勻漿器中,然后

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