轉移電泳技術介紹
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southern印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northern印跡，1979年Towbin等設計了將蛋白質從凝膠轉移到硝酸纖維素膜的裝置，將蛋白質轉移到膜上，再與相應的抗體等配體反應，被戲稱為Western印跡，這種裝置將膜和凝膠、濾紙等制成夾心餅干狀，用低電壓高電流電泳完成轉移。1982年Reinhart等用電轉移法將等電聚焦后的蛋白質區帶從凝膠轉移到特定膜上，稱Eastern印跡。國內外有多種核酸、蛋白質印跡轉移的電泳裝置出售，使印跡轉移速度快效率高、重復性好，應用更加廣泛。聚丙烯酰胺凝膠也可用于印跡轉移電泳，但轉移蛋白質時，凝膠中不可含有SDS、尿素等變性劑。用于轉移電泳的支持膜亦有多......閱讀全文
轉移電泳技術介紹
生物化學與分子生物學的研究工作經常需要對電泳分離后的DNA進行分子雜交，但瓊脂糖不適合于進行雜交操作，1975年，Southern創造了將DNA區帶原位轉移到硝酸基纖維素膜（NC膜）上，再進行雜交的方法，被稱為Southern印跡法。隨后，Alwine等將類似方法用于RNA印跡，被戲稱為Northe
電泳技術簡單介紹
電泳技術原理（以瓊脂糖凝膠電泳為例） 1、首先介紹使用的載體--瓊脂糖。 瓊脂糖是線性的多聚物，基本結構是1,3連結的β-D-半乳呋喃糖和1,4連結的3,6-脫水α-L-半乳呋喃糖。瓊脂果膠是由許多更小的分子組成的異質混合物。瓊脂糖在水中一般加熱到90℃以上溶解，溫度下降到35-40℃時形
電泳技術的過程介紹
電泳是電泳涂料在陰陽兩極，施加于電壓作用下，帶電荷的涂料離子移動到陰極，并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物，沉積于工件表面。它包括四個過程：電解（分解）在陰極反應最初為電解反應，生成氫氣及氫氧根離子OH-，此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層，當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質，涂膜沉積
電泳技術的應用介紹
過程如何運作有機分子通常帶有正電荷或負電荷,這會使它們對電流作出響應。帶正電荷的分子向電場的負極遷移,帶負電荷的分子向正極遷移。電荷較大的分子在施加電荷時趨向于更快地移動并傳播更遠。但是,它們也會因摩擦而減慢,而摩擦又受分子的大小和形狀以及測試所用介質的影響。通過控制電流和測試介質提供的摩擦力,研究
電泳技術的應用介紹
1．聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應，可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開，并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法，可以檢出10-9～10-12g的樣品，且重復性好，沒有電滲作用。
凝膠電泳技術介紹
一般瓊脂糖凝膠電泳只能分離小于20kb的DNA。這是因為在瓊脂糖凝膠中，DNA分子的有效直徑超過凝膠孔徑時，在電場作用下，迫使DNA變形擠過篩孔，而沿著泳動方向伸直，因而分子大小對遷移率影響不大。如此時改變電場方向，則DNA分子必須改變其構象，沿新的泳動方面伸直，而轉向時間與DNA分子大小關系極為密
影響電泳技術的因素介紹
1．電泳介質的pH值溶液的pH值決定帶電物質的解離程度，也決定物質所帶凈電荷的多少。對蛋白質，氨基酸等類似兩性電解質，pH值離等電點越遠，粒子所帶電荷越多，泳動速度越快，反之越慢。因此，當分離某一種混合物時，應選擇一種能擴大各種蛋白質所帶電荷量差別的pH值，以利于各種蛋白質的有效分離。為了保證電泳過
關于電泳技術的應用介紹
1．聚丙烯酰胺凝膠電泳可用做蛋白質純度的鑒定。聚丙烯酰胺凝膠電泳同時具有電荷效應和分子篩效應，可以將分子大小相同而帶不同數量電荷的物質分離開，并且還可以將帶相同數量電荷而分子大小不同的物質分離開。其分辨率遠遠高于一般層析方法和電泳方法，可以檢出10-9～10-12g的樣品，且重復性好，沒有電滲作用。
電泳技術
電泳技術簡介?電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。?????電泳技術的基本原理和分類
電泳技術
電泳法，是指帶電荷的供試品（蛋白質、核苷酸等）在惰性支持介質（如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等）中，于電場的作用下，向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動，使組分分離成狹窄的區帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。??? 電泳技術的基本原理和分類 在電場中，推
電泳技術
電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具 有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時，該蛋白質帶負電荷， 在電場中向正極移動，相反則帶正電荷，在電場中向負極移動，只有蛋白質溶液pH在 蛋白質的等電點時靜電荷是零，在電場中不向任何一極移動。 電泳現象早在1
關于腫瘤轉移的轉移方式介紹
良性腫瘤無轉移。惡性腫瘤容易發生轉移，其方式有四種： ①直接蔓延到鄰近部位； ②淋巴轉移：原發癌的細胞隨淋巴引流，由近及遠轉移到各級淋巴結，也可能超級轉移；或因癌阻礙順行的淋巴引流而發生逆向轉移。轉移癌在淋巴結發展時，淋巴結腫大且變硬，起初尚可活動，癌侵越包膜后趨向固定，轉移癌阻礙局部組織淋
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時，該蛋白質帶負電荷，在電場中向正極移動，相反則帶正電荷，在電場中向負極移動，只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零，在電場中不向任何一極
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類 電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時，該蛋白質帶負電荷，在電場中向正極移動，相反則帶正電荷，在電場中向負極移動，只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零，在電場中不向任何一極
電泳技術介紹及影響電泳的因素
一、基本知識和種類電泳是指帶粒子在電場中向與自身帶相反電荷的電極移動的現象。例如蛋白質具有兩性電離性質。當蛋白質溶液的pH在蛋白質等電點的堿側時，該蛋白質帶負電荷，在電場中向正極移動，相反則帶正電荷，在電場中向負極移動，只有蛋白質溶液pH在蛋白質的等電點時靜電荷是零，在電場中不向任何一極移動。電泳現
毛細管凝膠電泳技術介紹
中文名稱毛細管凝膠電泳英文名稱capillary gel electrophoresis;CGE定 義將凝膠移到毛細管中作支持物進行的一種電泳。由于溶質分子體積不同，在起分子篩作用的聚合物內進行電泳時被分離。適用于生物大分子的分析及PCR產物分析。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技
瓊脂糖電泳技術的特點介紹
天然瓊脂（agar）是一種多聚糖,主要由瓊脂糖（agarose,約占80%）及瓊脂膠（agaropectin）組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由于這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而
瓊脂糖凝膠電泳技術介紹
一、凝膠制備1.微波爐溶解瓊脂糖時，膠液沸騰沖溢出三角錐瓶微波爐加熱時膠液可能發生劇烈沸騰，1）總液體量不宜超過三角錐瓶的?50%?容量，2）2%?以上膠液設置中火加熱3）膠液劇烈沸騰時，停止加熱，移開三角錐瓶，請戴上防熱手套，小心搖動三角錐瓶，然后再次加熱，膠液沸騰直至膠液清澈，保證瓊脂糖完全溶解
關于基因轉移的化學轉移方法介紹
有DNA-陽離子-二甲基亞砜法。基因轉移的生物學方法包括細胞融合法、脂質體介導法、原生質體融合法等。除以上三種方法外，又出現了顆粒轟擊技術，就是將外源DNA包被在金屬上，在電場中包被DNA的金屬顆粒獲得能量并以高速度運動，穿入靶細胞組織或器官內，由于這種金屬顆粒可以涂成薄膜狀，所以可實現較多細胞
基因轉移的物理方法轉移法介紹
包括顯微鏡注射法、電脈沖介導法。顯微注射法是應用特別的玻璃顯微注射器在顯微鏡下把重組DNA導入靶細胞；電脈沖介導法又稱電穿孔法，是指在高壓電脈沖的作用下，使細胞膜上出現瞬間微小的孔洞，從而介導不同細胞之間的原生質膜發生融合，使外源DNA通過細膜上出現的瞬間小孔而進入細胞。
火箭電泳技術
（一）原理??? 抗原在含有抗體的凝膠中進行電泳，在電場作用下，抗原向一個方向移動，在移動的過程中，逐步與凝膠中的抗體結合而沉淀呈火箭狀。沉淀峰面積越大，說明抗原量越多，二者呈正相關，因此可用于抗原的定量測定。此法具有敏感性高、快速等優點。?（二）材料與試劑1．0.05mol/L pH8.6巴比妥緩
電泳技術概述
電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團，它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電，在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下，由于待分離樣品中各種分子帶電性質以
火箭電泳技術
（一）原理抗原在含有抗體的凝膠中進行電泳，在電場作用下，抗原向一個方向移動，在移動的過程中，逐步與凝膠中的抗體結合而沉淀呈火箭狀。沉淀峰面積越大，說明抗原量越多，二者呈正相關，因此可用于抗原的定量測定。此法具有敏感性高、快速等優點。（二）材料與試劑1．0.05mol/L pH8.6巴比妥緩沖液配成2
電泳技術概述
電泳是指帶電顆粒在電場的作用下發生遷移的過程。許多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白質、核苷酸、核酸等都具有可電離基團，它們在某個特定的pH值下可以帶正電或負電，在電場的作用下，這些帶電分子會向著與其所帶電荷極性相反的電極方向移動。電泳技術就是利用在電場的作用下，由于待分離樣品中各種分子帶電性質以
基因轉移方法介紹
（1）特異正常基因的分離與克隆：應用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果，已有不少基因并將會有更多人類基因被分離和克隆，這是基因治療的前提，在當代分子生物技術條件下，一般來說，只要有基因探針和準確的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，如今既可人工合成DNA探針，還可用DNA合成儀在體外人工合
免疫火箭電泳技術
一、原理定量的抗原加入到含有一定量的相應抗體的瓊脂糖凝膠中，在電場作用下，引起抗原抗體的遷移和相互反應，當比例合適時形成肉眼可見的沉淀峰，由于電泳繼續進行，樣品孔不斷有抗原移向抗原抗體復合物的沉淀峰，因抗原過剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗體復合物的沉淀峰。如此反復向前，直到再無游離抗原而反應終
電泳技術臨床應用
?隨著新的電泳技術的出現,各種自動化電泳分析儀問世并相繼被引入臨床實驗室,電泳技術在臨床疾病的診斷中正發揮越來越多的作用,特別是為各種體液蛋白質、同工酶等的檢測提供了新的手段。?1. 血清蛋白電泳:新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后,常見白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。血清蛋白質電冰
免疫火箭電泳技術
一、原理?定量的抗原加入到含有一定量的相應抗體的瓊脂糖凝膠中，在電場作用下，引起抗原抗體的遷移和相互反應，當比例合適時形成肉眼可見的沉淀峰，由于電泳繼續進行，樣品孔不斷有抗原移向抗原抗體復合物的沉淀峰，因抗原過剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗體復合物的沉淀峰。如此反復向前，直到再無游離抗原而反應
電泳技術臨床應用
隨著新的電泳技術的出現,各種自動化電泳分析儀問世并相繼被引入臨床實驗室,電泳技術在臨床疾病的診斷中正發揮越來越多的作用,特別是為各種體液蛋白質、同工酶等的檢測提供了新的手段。?1. 血清蛋白電泳:新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳、染色后,常見白蛋白、α1、α2、β和γ球蛋白5條帶。血清蛋白質電冰圖
電泳技術的過程
電泳是電泳涂料在陰陽兩極，施加于電壓作用下，帶電荷的涂料離子移動到陰極，并與陰極表面所產生的堿性物質作用形成不溶解物，沉積于工件表面。它包括四個過程：電解（分解）在陰極反應最初為電解反應，生成氫氣及氫氧根離子OH-，此反應造成陰極面形成一高堿性邊界層，當陽離子與氫氧根作用成為不溶于水的物質，涂膜沉積