脫氧核酶的卟啉金屬螯合作用和過氧化物酶活性
已篩選出一個只有24 nt富含鳥嘌呤G的脫氧核酶“PS5M”,PS5M形成一個G四聚體結構的催化活性中心,結合一個扭曲的卟啉分子,使卟啉分子類似于金屬螯合反應的中間過渡態,從而促進了金屬的螯合作用,PS5M還能與血紅素結合,形成的復合物具有過氧化物酶活性,能催化氯高鐵血紅素-氫過氧化物的分解。......閱讀全文
脫氧核酶的卟啉金屬螯合作用和過氧化物酶活性
已篩選出一個只有24 nt富含鳥嘌呤G的脫氧核酶“PS5M”,PS5M形成一個G四聚體結構的催化活性中心,結合一個扭曲的卟啉分子,使卟啉分子類似于金屬螯合反應的中間過渡態,從而促進了金屬的螯合作用,PS5M還能與血紅素結合,形成的復合物具有過氧化物酶活性,能催化氯高鐵血紅素-氫過氧化物的分解。
?脫氧核酶的功能介紹
1、RNA切割作用脫氧核酶最重要的一種性質,也是目前研究最活躍的一個方面,是具有通過酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA這種獨特的性質,使其有可能應用于破壞體內細胞和病毒的RNA,具有潛在的體內治療作用。脫氧核酶發揮RNA切割作用有以下幾種形式:(1)以金屬離子為輔因子:用“催化洗脫”的方法從一個
脫氧核酶的功能介紹
1、RNA切割作用脫氧核酶最重要的一種性質,也是目前研究最活躍的一個方面,是具有通過酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA這種獨特的性質,使其有可能應用于破壞體內細胞和病毒的RNA,具有潛在的體內治療作用。脫氧核酶發揮RNA切割作用有以下幾種形式:(1)以金屬離子為輔因子:用“催化洗脫”的方法從一個
根據催化功能將脫氧核酶分類
根據催化功能的不同,可以將脫氧核酶分為5大類:切割RNA的脫氧核酶、切割DNA的脫氧核酶、具有激酶活力的脫氧核酶、具有連接酶功能的脫氧核酶、催化卟啉環金屬螯合反應的脫氧核酶。其中以對RNA切割活性的脫氧核酶更引人注意,不僅能催化RNA特定部位的切割反應,而且能從mRNA水平對基因進行滅活,從而調控蛋
脫氧核酶的分類介紹
根據催化功能的不同,可以將脫氧核酶分為5大類:切割RNA的脫氧核酶、切割DNA的脫氧核酶、具有激酶活力的脫氧核酶、具有連接酶功能的脫氧核酶、催化卟啉環金屬螯合反應的脫氧核酶。其中以對RNA切割活性的脫氧核酶更引人注意,不僅能催化RNA特定部位的切割反應,而且能從mRNA水平對基因進行滅活,從而調
?脫氧核酶的分類
根據催化功能的不同,可以將脫氧核酶分為5大類:切割RNA的脫氧核酶、切割DNA的脫氧核酶、具有激酶活力的脫氧核酶、具有連接酶功能的脫氧核酶、催化卟啉環金屬螯合反應的脫氧核酶。其中以對RNA切割活性的脫氧核酶更引人注意,不僅能催化RNA特定部位的切割反應,而且能從mRNA水平對基因進行滅活,從而調控蛋
脫氧核酶的作用和主要類型
脫氧核酶(deoxyribozyme)是利用體外分子進化技術合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段,具有高效的催化活性和結構識別能力。自 1994年首次發現脫氧核酶以來,迄今已發現了幾十種脫氧核酶。根據其功能可分為7大類:具有RNA切割活性,具有DNA連接酶活性,具有卟啉金屬化酶和過氧化酶活性,具有
金屬螯合親和層析實驗
天然MCAC純化帶組氨酸尾的可溶性融合蛋白 變性條件下用MCAC純化帶組氨酸尾的不溶性融合蛋白 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質
金屬螯合親和層析實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 IPTGNiSO4蛋白酶抑制劑MCAC-EDTATriton儀器、耗材 層析柱轉子實驗步驟 1. ?接種含以pET載體表達帶組氨酸尾融合蛋白的大腸扦菌BL21(DE3)pLyaS菌株于10 ml M9ZB/氨芐青霉素/氯霉素培養基。于37℃搖蕩培養過夜。2. ?轉接1
簡述螯合物的螯合反應
又稱螯合作用或螯合效應。螯合配位體 (含兩個或兩個以上具有孤對電子原子的配位體) 與中心離子同時形成兩個或更多的配位鍵而生成環狀結構的配位化合物,即螯合 [物] 的反應。例如,乙二胺四乙酸[EDTA,(—OOCCH2)2NCH2CH2N (CH2COO—)2]能與許多金屬離子如Fe、Th、Hg、
脫氧核酶DNA激酶活性功能的介紹
脫氧核酶還具有DNA激酶活性,類似T4多核苷酸激酶的作用,能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基團轉移到DNA的5′-OH上。從一個隨機單鏈DNA庫中篩選出50個不同序列類型的具有自我磷酸化作用的脫氧核酶,都能把NTP或dNTP上的γ-磷酸基團轉移到DNA的5′-OH上,實現DNA分子5′-OH端自
螯合物的螯合程度的檢測
如果配體和銀離子結合后,紫外可見區有變化,可以用紫外光譜測定反應進行的程度;如果沒有光信號變化,也可以使用電化學手段,用銀-氯化銀電極測定體系游離銀離子濃度;如果是固體的話,只能用溶劑洗滌固體,將游離銀離子洗脫,然后用原子吸收或其他手段檢測銀離子含量。
關于螯合物螯合程度的檢測
如果配體和銀離子結合后,紫外可見區有變化,可以用紫外光譜測定反應進行的程度;如果沒有光信號變化,也可以使用電化學手段,用銀-氯化銀電極測定體系游離銀離子濃度;如果是固體的話,只能用溶劑洗滌固體,將游離銀離子洗脫,然后用原子吸收或其他手段檢測銀離子含量。
金屬螯合親和層析實驗(二)
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒GuMCAC-EDTA緩沖液鹽酸胍儀器、耗材轉子離心機實驗步驟1. ?制備表達帶組氨酸尾的融合蛋白的大腸桿菌菌體沉淀。2. ?準備NTA介質層析柱,但柱子最后以GuMCAC-0緩沖液洗滌.3. ?在冰浴中凍融菌體沉淀。加5 ml GuMCAC-0緩沖液,用吸管抽吸重懸,超聲
脫氧核酶的DNA切割作用介紹
脫氧核酶不僅具有RNA切割作用,而且也能切割DNA 分子。已篩選出了兩類具有DNA自我切割作用的脫氧核酶,Ⅰ類自我切割脫氧核酶需要Cu2+和維生素C參與,而Ⅱ類脫氧核酶只需要Cu2+。Ⅱ類脫氧核酶以順式方式切割DNA靶分子,與不加酶的反應相比,它提高催化效率106倍。多數脫氧核酶只能與底物形成二
脫氧核酶實驗
實驗方法原理 隨著體外分子實驗技術的發展,近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子,這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應,而且還具有 DNA 激酶活性。實驗材料 脫氧核酶試劑、試劑盒 脫氧核酶切割緩沖液終止緩沖液脂質體儀器、耗材
脫氧核酶實驗
隨著體外分子實驗技術的發展,近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子,這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應,而且還具有 DNA 激酶活性。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理隨著體外分子實驗技術的發展,近年
脫氧核酶實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 隨著體外分子實驗技術的發展,近年來相繼發現了許多具有不同催化功能的 DNA 分子,這些被稱為脫氧核酶的催化型 DNA 分子可以催化切割反應、連接反應、卟啉環金屬化等許多化學反應,而且還具有 DNA 激酶活性。
關于脫氧核酶的RNA切割作用介紹
脫氧核酶最重要的一種性質,也是目前研究最活躍的一個方面,是具有通過酯化作用而切割RNA分子的功能。DNA這種獨特的性質,使其有可能應用于破壞體內細胞和病毒的RNA,具有潛在的體內治療作用。脫氧核酶發揮RNA切割作用有以下幾種形式: (1)以金屬離子為輔因子:用“催化洗脫”的方法從一個隨機序列庫
什么叫螯合物,螯合物有什么特點
螯合物是具有環狀結構的配合物,是通過兩個或多個配位體與同一金屬離子形成螯合環的螯合作用而得到。螯合物最顯著的一種特性是其熱力學穩定性和熱穩定性。螯合環的穩定性與芳香環相似。螯合物可為不帶電荷的中性分子,也可為帶電的絡離子,前者易溶于有機溶液中,后者可溶于水中,此性質可用于分離和分析金屬離子。金屬離子
脫氧核酶的研究前景
對于脫氧核酶的研究有望成為基因功能研究、核酸突變分析、治療腫瘤、對抗病毒及腫瘤等疾病的新型基因治療藥物的新型核酸工具酶。盡管自然界沒有發現脫氧核酶,但實驗已證明DNA具有酶活性。由于脫氧核酶比核酶更加穩定,且相對生產成本低廉,脫氧核酶的開發應用已成為新藥開發的熱門課題。目前對脫氧核酶的結構和功能已有
關于脫氧核酶的簡介
1994年,Gerald.F.Joyce等報道了一個人工合成的35bp的多聚脫氧核糖核苷酸能夠催化特定的核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸形成的磷酸二酯鍵,并將這一具有催化活性的DNA稱為脫氧核酶或DNA酶(DNA enzyme,DE)。 1995年,Cuenoud等在Nature報道了一個具有連接酶
螯合物的組成
螯合物是具有環狀結構的配合物,是通過兩個或多個配位體與同一金屬離子形成螯合環的螯合作用而得到。
關于脫氧核酶的研究前景和展望介紹
對于脫氧核酶的研究有望成為基因功能研究、核酸突變分析、治療腫瘤、對抗病毒及腫瘤等疾病的新型基因治療藥物的新型核酸工具酶。 盡管自然界沒有發現脫氧核酶,但實驗已證明DNA具有酶活性。由于脫氧核酶比核酶更加穩定,且相對生產成本低廉,脫氧核酶的開發應用已成為新藥開發的熱門課題。目前對脫氧核酶的結構和
關于脫氧核酶的基本介紹
脫氧核酶(deoxyribozyme)是利用體外分子進化技術合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段,具有高效的催化活性和結構識別能力。自 1994年首次發現脫氧核酶以來,迄今已發現了幾十種脫氧核酶。根據其功能可分為7大類:具有RNA切割活性,具有DNA連接酶活性,具有卟啉金屬化酶和過氧化酶活性,
?脫氧核酶的基本信息
脫氧核酶(deoxyribozyme)是利用體外分子進化技術合成的一種具有催化功能的單鏈DNA片段,具有高效的催化活性和結構識別能力。自 1994年首次發現脫氧核酶以來,迄今已發現了幾十種脫氧核酶。根據其功能可分為7大類:具有RNA切割活性,具有DNA連接酶活性,具有卟啉金屬化酶和過氧化酶活性,具有
螯合物的基本類型和特性
具有環狀結構的配合物,由具有兩個或多個配位體與同一金屬離子形成螯合環的化學反應——螯合作用而得到。配體和金屬離子間的配位鍵通常有兩種類型:(1)配體上酸的基團離解去H+,然后與金屬離子配位;(2)配體上含有孤電子對的中性基團與金屬離子配位.螯合物最顯著的一種特性是其熱力學穩定性和熱穩定性。螯合環的穩
慢性重金屬中毒·毒性元素尿液螯合分析
由于不良生活方式與環境污染,現代人極容易出現慢性重金屬在體內累積,過度的重金屬累積是影響健康的重要原因。血液檢測最常用于急性重金屬中毒,對于慢性重金屬的累積血液檢測并不能有效反映出來。頭發與尿液螯合分析是用來檢測慢性重金屬中毒的可靠指標。雖然頭發檢測與尿液螯合都可以反映體內元素的長期蓄積水平,但尿液
螯合物萃取體系
a. 螯合劑:螯合劑(應有較多的疏水基團)溶于有機相,難溶于水相,有些也(微)溶于水相,但在水相中的溶解度依賴于水相的組成特別是 pH 值(雙硫腙溶于堿性水溶液);b. 螯合劑在水相與待萃取的金屬離子形成不帶電荷的中性螯合物,使金屬離子由親水性轉變為親油性; c. 螯合物萃取體系廣泛應用于金屬陽離子
螯合程度的檢測分析
如果配體和銀離子結合后,紫外可見區有變化,可以用紫外光譜測定反應進行的程度;如果沒有光信號變化,也可以使用電化學手段,用銀-氯化銀電極測定體系游離銀離子濃度;如果是固體的話,只能用溶劑洗滌固體,將游離銀離子洗脫,然后用原子吸收或其他手段檢測銀離子含量。