多彩色熒光原位雜交技術的特點、分類和應用
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發光譜和吸收光譜不同的熒光索按一定調色方法標記不同的探針,從而對不同靶DNA同時進行定位和分析,并能對不同探針在染色體上的位置進行排序。探針熒光素顏色調配的方法有非調色法,混合調色法和比例調色法。這3種調色法中,比例調色法只需要極少幾種熒光素就可標記多種探針,因而更有發展潛力。染色體描繪(chromosome painting),比較基因組雜交(comparative genomic hybridization,CCH)、光譜染色體自動核型分析(speetral karyolyping.,SKY)、交叉核素色帶分析(cross-spec......閱讀全文
多彩色熒光原位雜交技術的特點、分類和應用
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
DNA纖維熒光原位雜交技術技術的特點、分類和應用
FISH的分辨率取決于載體DNA的濃縮程度,如何提高分辨率一直是一個重要課題。Wiegant等和Heng等首先利用化學方法對染色體進行線性化,再以此為載體進行FISH,使其分辨率顯著提高,這就是最初的纖維-FISH。纖維-FISH應用各種不同技術,將待研究細胞的全部遺傳物質即DNA在載玻片上制備出D
多彩色熒光原位雜交的技術特點
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
熒光原位雜交技術原理和應用特點
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
多彩色熒光原位雜交技術的原理與應用
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
多彩色熒光原位雜交技術介紹
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
多彩色熒光原位雜交技術介紹
多彩色熒光原位雜交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FIS
熒光原位雜交的技術分類
(一)多彩色熒光原位雜交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次
熒光原位雜交的技術特點
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
熒光原位雜交技術的特點
原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。采用熒光標記系統則可克服這些不足,這就是FISH技術。
熒光原位雜交的技術特點
與其他原位雜交技術相比,熒光原位雜交具有很多優點,主要體現在:①FISH不需要放射性同位素標記,更經濟安全。②FISH的實驗周期短,探針穩定性高,特異性好,定位準確,能迅速得到結果。③FISH通過多次免疫化學反應,使雜交信號增強,靈敏度提高,其靈敏度與放射性探針相當。④多色FISH通過在同一個核中顯
熒光原位雜交的技術應用
(一)基因(或DNA片段)染色體定位和基因圖譜繪制目前應用的基因定位的主要方法是FISH。分離到的DNA序列直接通過FISH,同時采用多種顏色熒光素的標記探針,結合中期染色體和間期細胞方面的信息,可快速確定一-系列DNA序列之間的相互次序和距離,完成基因制圖。用不同顏色炎光索標記2個不同的DNA鏈,
熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
?-熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
熒光原位雜交技術的應用
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置
熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
概述熒光原位雜交的技術應用
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。 熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染
熒光原位雜交技術的應用介紹
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
熒光原位雜交技術的應用介紹
作為一種可視化特定DNA序列的分子細胞遺傳學技術,熒光原位雜交技術目前被廣泛應用于染色體畸變。如非整倍體、染色體重組。其基本流程包括探針標記、探針的變性、樣本變性、雜交和熒光信號采集。熒光原位雜交技術在基因定性、定量,整合、表達等方面的研究中頗具優勢,目前已經被廣泛應用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產
DNA纖維熒光原位雜交技術的技術特點
FISH的分辨率取決于載體DNA的濃縮程度,如何提高分辨率一直是一個重要課題。Wiegant等和Heng等首先利用化學方法對染色體進行線性化,再以此為載體進行FISH,使其分辨率顯著提高,這就是最初的纖維-FISH。纖維-FISH應用各種不同技術,將待研究細胞的全部遺傳物質即DNA在載玻片上制備出D
流式熒光技術的特點和應用
流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、
流式熒光技術的特點和應用
流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發展起來的多指標聯合診斷技術。該技術以熒光編碼微球為核心,集流式原理、激光分析、高速數字信號處理等多種技術于一體,多指標并行分析,最多可一管同時準確定量檢測2-500種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點;可用于免疫分析、核酸研究、
關于熒光原位雜交技術的應用介紹
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
熒光原位雜交的特點
原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。采用熒光標記系統則可克服這些不足,這就是FISH技術。
原位雜交技術的原理和特點
原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞
熒光原位雜交的應用
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置
多色熒光原位雜交實驗
M-FISH 被成功地用于鑒別先天性疾病中的標記染色體或衍生染色體。近來該方法越來越多地被用于確認復雜核型中的多重染色體異常;在進行血液疾病的診斷時,M-FISH 在檢測臨界染色體重排中非常有用試劑、試劑盒DAPI 復染液乙醇SSC鹽酸HClNP-40胰酶NaCl檸檬酸鈉Spectra Vysion
多色熒光原位雜交實驗
實驗方法原理 試劑、試劑盒?DAPI 復染液乙醇SSC鹽酸HClNP-40胰酶NaCl檸檬酸鈉Spectra Vysion探針M-FISH 探針實驗步驟 一、染色體標本制備1.標本制備:不同標本來源的樣品(血液、羊水、成纖維細胞培養物或骨髓)用其相應的標準程序進行制備。2.用相差顯微鏡找到合適的中期
多色熒光原位雜交實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 DAPI 復染液 乙醇 SSC 鹽酸 HCl