雜交探針的概念
雜交探針是一小段單鏈DNA片段（十幾到幾百個堿基），用于檢測與其互補的核酸序列。......閱讀全文
雜交探針的概念
雜交探針是一小段單鏈DNA片段（十幾到幾百個堿基），用于檢測與其互補的核酸序列。
核酸分子雜交的概念、基本原理、探針及類型
主要內容：一、分子雜交的概念?二、分子雜交基本原理?（一）DNA變性：?1、DNA變性的方法2、增色效應3、溶解曲線4、融解溫度5、影響Tm值的因素。?（二）復性：退火一、分子雜交的概念：?分子雜交（molecular hybridization）指具有一定同源序列的兩條核酸單鏈（DNA或RNA），
雜交探針的檢測實驗
1. ?將載玻片以膠帶固定于硬紙板或廢膠片上。2. ?將Du Pont Cronex 成像膠片（MRF 34 Clear） 輕壓在玻片上4℃曝光。3. ?當用這種膠片時，應注意以膠片的膠乳面正對樣品。
雜交探針的檢測實驗
實驗步驟 1. ?暗室中，以42~45℃水浴，溫育盛有4盎司（113.3 g）Kodak NTB-2放射自顯影膠乳瓶30 min。同時，在500 ml 三角瓶中預熱等體積的水至相同溫度。 2. ?膠乳熔化后，緩慢沿三角瓶壁（以一角度）倒入瓶中
雜交探針的檢測實驗1
放射自顯影膠片用于檢測與細胞學樣品進行雜交的32P或35S-標記探針，并可應用于在大的器官或組織進行的實驗，欲獲得單細胞水平結果，需要用乳膠放射自顯影。實驗步驟1. ?將載玻片以膠帶固定于硬紙板或廢膠片上。2. ?將Du Pont Cronex 成像膠片（MRF 34 Clear） 輕壓在玻片上4℃
雜交探針的檢測實驗2
實驗材料膠乳試劑、試劑盒顯影劑儀器、耗材浸泡盒水浴鍋玻片架實驗步驟1. ?在42℃~45℃水浴溶化小份稀釋的膠乳10 min，將膠乳倒入或吸入潔凈的玻片包裝盒中（浸泡盒）。?2. ?將玻片緩慢并輕柔地浸入浸泡盒中，緩慢取出并垂直放置在試管架上或將玻片置于干燥器中2 h，使其干燥。3. ?將充分干燥的
雜交探針的檢測實驗3
實驗步驟1. ?暗室中，以42~45℃水浴，溫育盛有4盎司（113.3 g）Kodak NTB-2放射自顯影膠乳瓶30 min。同時，在500 ml 三角瓶中預熱等體積的水至相同溫度。2. ?膠乳熔化后，緩慢沿三角瓶壁（以一角度）倒入瓶中并混勻（輕旋1~2次，防止氣泡產生）。?3. ?分裝膠乳于尼龍
核酸分子雜交探針的介紹
若雜交的目的是識別靶DNA中的特異核苷酸序列，這需要牽涉到另一項核酸操作的基本技術─探針（probe）的制備。探針是指帶有某些標記物（如放射性同位素32P，熒光物質異硫氰酸熒光素等）的特異性核酸序列片段。若我們設法使一個核酸序列帶上32P，那么它與靶序列互補形成的雜交雙鏈，就會帶有放射性。以適當
RNA探針的概念
RNA探針是一類很有前途的核酸探針，由于RNA是單鏈分子，所以它與靶序列的雜交反應效率極高。早期采用的RNA探針是細胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細胞基因轉錄或病毒復制過程中得到標記的，標記效率往往不高，且受到多種因素的制約。
DNA探針原位雜交
1、4—6微米切片,用防脫片膠（多聚賴氨酸）處理過的玻片貼附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鮮二甲苯脫蠟,10minX2（趁熱脫蠟） 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空氣干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液（蛋白酶K用蒸餾水稀釋,濃度為25μg/ml）,37℃消化1
關于Southern雜交的探針標記簡介
用于Southern印跡雜交的探針可以是純化的DNA片段或寡核苷酸片段。探針可以用放射性物質標記或用地高辛標記，放射性標記靈敏度高，效果好；地高辛標記沒有半衰期，安全性好。人工合成的短寡核苷酸可以用T4多聚核苷酸激酶進行末端標記。探針標記的方法有隨機引物法、切口平移法和末端標記法。
分子雜交基因探針的類型介紹
分子雜交基因探針根據標記方法不同可粗分為放射性探針和非放射性探針兩大類，根據探針的核酸性質不同又可分為DNA探針，RNA探針，cDNA探針，cRNA探針及寡核苷酸探針等幾類，DNA探針還有單鏈和雙鏈之分。
熒光探針技術的概念
受到激發光激發后，從激發態單重態回到基態，在紫外-可見-近紅外區有特征發光，稱之為熒光。熒光性質（激發和發射波長、強度、壽命、偏振等）可隨所處環境的性質，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子，被稱為熒光探針。熒光探針分類很多，可以根據材料屬性分為有機和無機探針，可以根據探針尺寸分為
光親和探針的概念
中文名稱光親和探針英文名稱photoaffinity probe定 義含有能被光照激活的基團并能與擬檢測對象結合的分子。受光照激活后能與被檢測物特異結合。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）
核酸探針雜交檢測技術介紹
一、核酸探針預雜交預雜交的目的是用非特異性 DNA 分子(鮭精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其他高分子化合物(Denhart’s溶液)將待測核酸分子中的非特異性位點封閉,以避免這些位點與探針的非特異性結合。雜交反應是使單鏈核酸探針與固定在膜上的待測核酸單鏈在一定溫度和條件下進行復性反應的過程。雜交
雜交嚴格性的概念
中文名稱雜交嚴格性英文名稱hybridization stringency定 義核酸分子雜交條件設置的高低。其設置主要看雜交鏈的長度和同源性。同源程度越高，雜交條件就可越嚴格。雜交嚴格性的控制主要參數是雜交液的溫度、鹽濃度、變性劑和pH等。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級
核酸分子雜交的概念
核酸分子雜交（簡稱雜交，hybridization）是核酸研究中一項最基本的實驗技術。互補的核苷酸序列通過Walson-Crick堿基配對形成穩定的雜合雙鏈DNA或RNA分子的過程稱為雜交。雜交過程是高度特異性的，可以根據所使用的探針已知序列進行特異性的靶序列檢測。
DNA探針原位雜交的相關介紹
1、4—6微米切片，用防脫片膠（多聚賴氨酸）處理過的玻片貼附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鮮二甲苯脫蠟，10minX2（趁熱脫蠟） 4、100%乙醇5minX2次，不用浸水，直接空氣干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液（蛋白酶K用蒸餾水稀釋，濃度為25μg/ml），37℃消化1
分子雜交技術RNA探針的相關介紹
許多載體如pBluescript, pGEM等均帶有來自噬菌體SP6或E.coli噬菌體T7或T3的啟動子,它們能特異性地被各自噬菌體編碼的依賴于DNA的RNA聚合酶所識別,合成特異性的RNA。在反應體系中若加入經標記的NTP，則可合成RNA探針。RNA探針一般都是單鏈,它具有單鏈DNA探針的優
雜交探針的技術特點和應用介紹
雜交探針是核酸分子上帶有可能被檢測的信號分子，如同位素或熒光標記的核酸分子。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈，隨后用放射性同位素（通常用磷-32）、螢光染料或者酶（如辣根過氧化物酶）標記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團中，而熒光染料和酶與核酸序列以共價鍵相連。分為cDNA探
熒光原位雜交（FISH）探針的制備
實驗概要本實驗介紹了熒光原位雜交（FISH）探針的制備原理及技術。實驗原理染色體熒光原位雜交始于傳統的細胞遺傳學和DNA技術的結合，這種結合開創了一門新的學科——分子細胞遺傳學。其基礎是Southern ? blot原理，以半抗原如生物素、地高辛間接標記或以熒光素直接標記的已知核酸分子為探針，探針和
分子雜交技術的核酸探針標記法
核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針。下面將介紹各種類型的探針及標記方法。 分子生物研究中，最常用的探針即為雙鏈DNA
核酸探針標記及原位雜交
一、核酸探針標記核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下（適宜的溫度及離子強度等）可按堿基互補原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針；根據標記物不同，可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類；根據是否
核酸探針標記及原位雜交
一、核酸探針標記 核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下（適宜的溫度及離子強度等）可按堿基互補原則形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。 核酸探針根據核酸的性質，可分為DNA和RNA探針；根據標記物不同，可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大
分子探針的概念和分類
分子探針是指能精準回答生物醫學問題的功能性物質。分子探針是實現分子成像的先決條件和核心技術。分子影像技術的發展除了需要先進的成像設備外，還需要發展新型而高效的分子探針。分子探針種類繁多，根據成像設備的不同，分子探針分為光學、核醫學、磁學、聲學、光聲等不同種類。
RNA探針的概念和分類
RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種：即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。
輻射性雜交的概念
輻射性雜交(radiationhybridRH)制圖技術是1975年由Goss和Harris創立的一種體細胞雜交技術，適用于構建人類基因組長范圍內的高分辨率連續物理圖譜。成熟的輻射性雜交制圖技術是由CoxVR等人于1990年建立的。
輻射性雜交的概念
輻射性雜交(radiationhybridRH)制圖技術是1975年由Goss和Harris創立的一種體細胞雜交技術，適用于構建人類基因組長范圍內的高分辨率連續物理圖譜。成熟的輻射性雜交制圖技術是由CoxVR等人于1990年建立的。
消減雜交的概念和意義
消減雜交(subtractive hybridization,扣除雜交) 是指利用不同組織、細胞或不同狀態下組織、細胞基因表達的差異性，并結合核酸雜交建立的克隆差異表達基因的技術。是差別雜交的改進，用過量的參照細胞的mRNA 或CDNA 與目的細胞的CDNA 或mRNA (目的序列) 雜交，形成的R
熒光原位雜交的概念
熒光原位雜交（Fluorescence in situ hybridization，FISH）是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術，是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。