基因敲入技術介紹和技術分類
基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重組，將外源有功能基因（基因組原先不存在、或已失活的基因），轉入細胞與基因組中的同源序列進行同源重組，插入到基因組中，在細胞內獲得表達的技術。基因敲入有兩種，一種是原位敲入,即在原基因敲除的位點插入新基因,它是基因敲除的逆過程；另一種是定點敲入,即無論敲除基因的位點在哪里,敲入的基因是在特定啟動子下，以轉移載體的形式轉座進去,所以插入的位點是一定的。......閱讀全文
基因敲入技術介紹和技術分類
基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重組，將外源有功能基因（基因組原先不存在、或已失活的基因），轉入細胞與基因組中的同源序列進行同源重組，插入到基因組中，在細胞內獲得表達的技術。基因敲入有兩種，一種是原位敲入,即在原基因敲除的位點插入新基因,它是基因敲除的逆過程；另一種是定點敲入,即
基因敲入的定義和方式介紹
基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重組，將外源有功能基因（基因組原先不存在、或已失活的基因），轉入細胞與基因組中的同源序列進行同源重組，插入到基因組中，在細胞內獲得表達的技術。基因敲入有兩種，一種是原位敲入,即在原基因敲除的位點插入新基因,它是基因敲除的逆過程；另一種是定點敲入,即
基因敲減技術介紹
基因敲減（Gene knock-down）是指通過降解具有同源序列靶基因的mRNA，達到阻止基因表達的作用。
新技術推動CRISPR、TALEN廣泛介導基因敲入
使用一種新型的基因敲入（knock-in）技術，來自日本的科學家們將外源基因有效地插入到了人類細胞和包括蠶及青蛙在內的動物模型中。這種策略不僅能夠在培養細胞中，還可以在各種生物體中普遍實現基因敲入。相關研究結果發布在近日的《自然通訊》（Nature Communications）雜志上。 當前
基因敲入的概念
基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重組，將外源有功能基因（基因組原先不存在、或已失活的基因），轉入細胞與基因組中的同源序列進行同源重組，插入到基因組中，在細胞內獲得表達的技術。基因敲入有兩種，一種是原位敲入,即在原基因敲除的位點插入新基因,它是基因敲除的逆過程；另一種是定點敲入,即
基因敲入的概念和基本方式
基因敲入（gene knock in）是利用基因同源重組，將外源有功能基因（基因組原先不存在、或已失活的基因），轉入細胞與基因組中的同源序列進行同源重組，插入到基因組中，在細胞內獲得表達的技術。?基因敲入有兩種，一種是原位敲入,即在原基因敲除的位點插入新基因,它是基因敲除的逆過程；另一種是定點敲入,
Nature子刊：TALEN/CRISPR介導的新型替代基因敲入技術
來自廣島大學的專任講師Tetsushi Sakuma、Takashi Yamamoto教授，專任副教授Ken-Ichi T Suzuki及同事們在《Nature Protocols》雜志上，報告了一種利用基因組編輯技術的替代基因敲入方法的精簡實驗方案。這一創新方法被稱作為PITCh系統（精確整合
Cell子刊介紹一種高效精確的基因敲入技術：TildCRISPR
一組研究人員設計了一種新型基因靶向整合策略Tild-CRISPR，它可以在小鼠和人的細胞中實現高效精確的基因敲入。Tild-CRISPR不僅適用于高效地構建小鼠動物模型，同時為研究體內的基因功能以及開發潛在的基因療法提供新思路。 這一研究成果公布在Developmental Cell期刊上，題
張鋒創立的Editas公司發布基因敲入技術，助力開發新療法
撰文 | 王聰編輯 | 王多魚排版 | 水成文盡管CRISPR-Cas基因編輯技術在基因敲除方面取得了重大突破，并深刻改變了基因編輯領域乃至整個生命科學的研究模式。但CRISPR-Cas基因編輯技術通常是以破壞DNA的方式實現基因敲除的效果，該技術在實現高效基因敲入方面仍然面臨重大挑戰。為了解決這一
CRISPR新改良實現高效基因敲入
細菌一直在與病毒或入侵核酸進行斗爭，為此它們演化出了多種防御機制，CRISPR/Cas適應性免疫系統就是其中之一。該系統能在小RNA分子（crRNA）的引導下，靶標并沉默入侵者的遺傳物質。 發現CRISPR系統之后不久，人們就開始用它來進行特異性的基因編輯。這種基因編輯技術更容易操
新“基因魔剪”按需敲入長DNA序列
北京11月27日電 據最新一期《自然·生物技術》發表的一項研究，在CRISPR基因編輯系統的基礎上，美國麻省理工學院研究人員設計了一種新工具，可以更安全、更高效的方式剪除有缺陷的基因并用新基因替換它們。 使用這個系統，研究人員可將長達36000個DNA堿基對的基因傳遞給幾種類型的人類細胞，以及小
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
轉基因技術的技術分類
植物轉基因技術植物轉基因技術是采用克隆等方式，在受體細胞中置入外源DNA，代表性的使用方式如載體介導法、DNA直接攝取法。動物轉基因技術顯微注射法就是利用玻璃針將DNA注入到動物胚胎細胞核，再將胚胎細胞移植到動物體，使其正常發育，是早期常用的動物轉基因技術。體細胞核移植法就是先在體外培養細胞，篩選優
基因敲除技術的技術分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
轉基因技術的技術分類
植物轉基因技術植物轉基因技術是采用克隆等方式，在受體細胞中置入外源DNA，代表性的使用方式如載體介導法、DNA直接攝取法。動物轉基因技術顯微注射法就是利用玻璃針將DNA注入到動物胚胎細胞核，再將胚胎細胞移植到動物體，使其正常發育，是早期常用的動物轉基因技術。體細胞核移植法就是先在體外培養細胞，篩選優
全新CRISPR/Cas9基因敲入系統助力肝癌建模
最近發表在開放獲取期刊《基因組醫學》（Genome Medicine）上的一項研究，報道了一種建立肝癌小鼠模型的新方法，即利用CRISPR/Cas9系統快速將癌癥相關基因敲入小鼠的DNA中。 研究的通訊作者、麻省大學醫學院RNA療法研究所的王文說：“為了更好地理解腫瘤生物學、開展臨床前研究以及
世界首例ROSA26基因敲入豬模型誕生
近日，中科院廣州生物醫藥與健康院研究員賴良學與美國密西根大學教授王忠合作，獲得了世界首例ROSA26定點基因敲入豬模型。據稱，該研究成功地實現了豬重組酶介導的基因交換，從而解決了一直困擾轉基因豬研究領域效率低下、表型不確定的問題。相關研究成果日前在線發表于《細胞研究》。 轉基因豬
科學家首次獲得基因敲入的食蟹猴
獲得基因敲入的食蟹猴。中科院神經所供圖 中科院神經科學研究所、腦科學與智能技術卓越創新中心、神經科學國家重點實驗室楊輝研究組與蘇州非人靈長類研究平臺孫強團隊合作，利用了一種以同源臂介導的末端接合（HMEJ）為基礎的基因敲入策略，在世界上首次獲得了基因敲入的食蟹猴。近日，該成果在線發表于《細胞研究》
基因診斷的技術分類
基因診斷可分為兩類：基因直接診斷直接檢查致病基因本身的異常。它通常使用基因本身或緊鄰的DNA序列作為探針，或通過PCR擴增產物，以探查基因無突變、缺失、退化等異常及其性質，這稱為直接基因診斷，它適用已知基因異常的疾病；基因間接診斷SSCP、AMP－FLP等技術均可用于連鎖分析。
基因診斷的技術分類
基因診斷可分為兩類：基因直接診斷直接檢查致病基因本身的異常。它通常使用基因本身或緊鄰的DNA序列作為探針，或通過PCR擴增產物，以探查基因無突變、缺失、退化等異常及其性質，這稱為直接基因診斷，它適用已知基因異常的疾病；基因間接診斷SSCP、AMP－FLP等技術均可用于連鎖分析。
轉基因技術的分類
植物轉基因技術植物轉基因技術是采用克隆等方式,在受體細胞中置入外源DNA,代表性的使用方式如載體介導法、DNA直接攝取法。動物轉基因技術顯微注射法就是利用玻璃針將DNA注入到動物胚胎細胞核,再將DNA移植到動物體,使其正常發育,是早期常用的動物轉基因技術。體細胞核移植法就是先在體外培養細胞,篩選優質
基因敲除技術的分類
基因敲除分為完全基因敲除和條件型基因敲除（又稱不完全基因敲除）兩種。完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細胞或者動物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統實現特定時間和空間的基因敲除。噬菌體的Cre/LoxP系統、Gin/Gix系統、酵母細胞的FLP/FRT系統和R/RS系統是現階
科學家建立工業產油微藻基因敲低技術
微藻通過光合作用將二氧化碳、光和水轉化為油脂，因此，作為一種潛在的清潔能源生產和二氧化碳高值化方案，工業產油微藻受到了廣泛關注。然而，藻類高效遺傳工具的匱乏，一直是工業產油微藻分子育種和光驅固碳合成生物技術的重要瓶頸之一。近日，中國科學院青島生物能源與過程研究所與中國科學院水生生物研究所合作，以
基因捕獲技術的主要分類
根據報告基因在載體中的位置及報告基因激活表達的方式，基因捕獲分為3種類型。增強子捕獲載體基因捕獲含有一個最小的啟動子和翻譯起始位點,當載體整合到順式增強子元件附近時,此增強子將調控報告基因的表達 。對報告基因在體內表達的ES 細胞系插入位點進行克隆鑒定發現插入位置鄰近編碼序列。關于增強子捕獲的誘變比
基因敲減的概念和功能作用
利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細胞內同源mRNA，從而阻斷體內靶基因的表達，使細胞出現靶基因缺失的表型。它不同于基因敲除（Gene knock-out）使目標基因永久性的表達沉默，而是通過降解具有同源序列靶基因的mRNA，達到阻止基因表達的作用，因此被形象地稱為“基因敲低”（Gene knock-
將致癌基因敲入小鼠DNA中－“基因魔剪”讓癌癥建模更準確
據開放獲取期刊《基因組醫學》16日公開的一項研究，美國科學家報告了一種建立癌癥小鼠模型的新方法——利用有“基因魔剪”之稱的CRISPR/Cas9系統快速將癌癥相關基因敲入小鼠的DNA中。該方法以前所未有的高效，滿足了快速準確建立動物模型的需求。 研究通訊作者、麻省大學醫學院RNA療法研究所的
關于生物學技術—基因檢測的分類介紹
基因檢測可以分為以下五類： 1.基因篩檢 主要是針對特定團體或全體人群進行檢測。大多數通過產前或新生兒的基因檢測以達到篩檢的目的。 2.生殖性基因檢測 在進行體外人工授精階段可運用，篩檢出胚胎是否帶有基因變異，避免胎兒患有遺傳性疾病。 3.診斷性檢測 多數用來協助臨床用藥指導。 4
CRISPR/Cas9基因敲入鼠鑒定方法之Southern－Blot與PCR
基因工程小鼠基因型PCR鑒定的基本原則是利用基因工程小鼠基因組與野生型小鼠基因組的序列差異，以小鼠基因組DNA為模板進行PCR，并以凝膠電泳對比不同基因型特異產物的大小，根據條帶大小來區分小鼠的不同基因型。上期我們講述了CRISPR/Cas9條件性基因敲入鼠的鑒定，今天我們就開始學習CRISPR/C