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  • 循環腫瘤DNA片段更短小有助開發液體活檢新技術

    根據一項發表在國際學術期刊Plos Genetics上的最新研究,循環腫瘤DNA與正常游離DNA在長度上存在差別,據此或可利用病人血液幫助開發檢測腫瘤DNA的液體活檢新技術。 液體活檢技術可以從血液中發現和診斷癌癥,還可以幫助監測癌癥復發,評估治療效果,但是這項技術仍然存在監測靈敏度的問題,大大限制了該技術的發展。美國猶他大學和華盛頓大學的研究人員發現,相比于正常細胞的DNA片段,來源于腫瘤細胞的循環DNA長度更短。 文章作者Hunter Underhill表示:“根據不同來源的循環DNA片段長度不同,可以檢測到實體瘤的存在。” 研究人員在多形性成膠質細胞瘤小鼠模型中發現了上述現象。在研究中他們將人的多形性成膠質細胞瘤干細胞樣系導入小鼠腦部,隨后在血液中檢測到了人類ctDNA,他們對比了人類腫瘤來源ctDNA和小鼠正常游離DNA的差別,發現人類ctDNA的長度一般為134個堿基,而小鼠正常游離DNA長度一般為167個堿......閱讀全文

    循環腫瘤DNA片段更短小-有助開發液體活檢新技術

      根據一項發表在國際學術期刊Plos Genetics上的最新研究,循環腫瘤DNA與正常游離DNA在長度上存在差別,據此或可利用病人血液幫助開發檢測腫瘤DNA的液體活檢新技術。  液體活檢技術可以從血液中發現和診斷癌癥,還可以幫助監測癌癥復發,評估治療效果,但是這項技術仍然存在監測靈敏度的問題,大

    循環腫瘤DNA片段更短小-有助開發液體活檢新技術

      根據一項發表在國際學術期刊Plos Genetics上的最新研究,循環腫瘤DNA與正常游離DNA在長度上存在差別,據此或可利用病人血液幫助開發檢測腫瘤DNA的液體活檢新技術。  液體活檢技術可以從血液中發現和診斷癌癥,還可以幫助監測癌癥復發,評估治療效果,但是這項技術仍然存在監測靈敏度的問題,大

    循環腫瘤DNA比循環正常DNA矮半截

      如今,人們開始利用液體活檢技術來診斷癌癥,以及監測治療效果,不過靈敏度是個問題。美國猶他州大學和華盛頓大學的研究人員近日在《PLOS Genetics》上發表文章,稱來源于腫瘤的DNA片段比來源于正常細胞的片段要短,這個特征可用于改善液體活檢。  猶他州大學的Hunter Underhill及其

    -循環腫瘤DNA實時跟蹤癌癥發展

      據本周三在《Nature Communications》雜志發表的一項新的研究中,科學家首次發現,流進入血液中的腫瘤DNA,可用于實時跟蹤腫瘤的發展以及對治療的響應。  三年多來,劍橋大學的研究人員,從腫瘤已經擴散到身體其他部位的一名乳腺癌患者身上,采集了外科腫瘤樣本(活檢)和血液樣本。他們仔細

    肝癌復發預測:循環腫瘤細胞DNA

      根據最近公布的數據顯示,廣島大學的研究人員發現,循環腫瘤細胞DNA是能夠準確預測肝切除術后2年內肝細胞癌復發的一個因子。  “我們發現,循環腫瘤細胞DNA水平能夠準確反映肝細胞癌的腫瘤進程和治療效果,”廣島大學Atsushi Ono博士在新聞發布會上說。“通過進一步的研究,循環腫瘤細胞DNA的基

    新方法檢測循環腫瘤DNA效果良好

      本周的《自然—醫學》報道了一種可測量循環腫瘤DNA(ctDNA)的超靈敏方法,ctDNA是用來定量病人癌癥患病程度的非侵入式生物標記。該方法比現有的手段更有效,成本更便宜,靈敏度更高,并可用在攜帶不同腫瘤基因型的病人身上并且其復發型變異數據已知。   Maximilian Diehn等人利

    循環腫瘤DNA“液體活檢”或將顛覆癌癥治療

      循環DNA是一種無細胞狀態的胞外DNA,存在于血液、滑膜液和腦脊液等體液中,其主要是由單鏈或雙鏈DNA以及單鏈與雙鏈DNA的混合物組成,以DNA蛋白質復合物或游離DNA兩種形式存在。早在1947年Mandel和Metais就發現了循環核酸;30年后Leon等人的研究表明腫瘤患者外周血清DNA水平

    -循環腫瘤DNA“液體活檢”或將顛覆癌癥治療

      循環DNA是一種無細胞狀態的胞外DNA,存在于血液、滑膜液和腦脊液等體液中,其主要是由單鏈或雙鏈DNA以及單鏈與雙鏈DNA的混合物組成,以DNA蛋白質復合物或游離DNA兩種形式存在。早在1947年Mandel和Metais就發現了循環核酸;30年后Leon等人的研究表明腫瘤患者外周血清DNA水平

    Science子刊公布癌癥液體活檢成果:評估腫瘤DNA片段大小

      液體活檢已經成為了癌癥檢測的一大熱門詞匯,許多液體活檢都是通過循環腫瘤DNA(ctDNA)進行檢測,ctDNA就是腫瘤細胞遺傳物質脫落后進入血液的碎片。  來自劍橋大學的科學家們建立了一種新方法,通過分析ctDNA的大小,在血液中檢測難以追蹤的腫瘤DNA(又稱ctDNA),這種方法可提高對罹患腦

    DNA片段的連接技術

    一、目的與原理DNA酶切片段的聯接是兩DNA片段相鄰的5‘磷酸和3’羥基間可有連接酶催化形成磷酸二酯鍵,這個連接反應在體外一般都有大腸桿菌DNA連接酶和T4DNA連接酶催化,但是分子生物學試驗中主要采用T4DNA連接酶,因該酶在正常條件下,即能完成連接反應。本實驗擬通過T4DNA連接酶對酶切片斷的連

    DNA片段回收與純化

    ????質粒、噬菌體等經酶切,電泳;PCR產物經電泳后,常常需要對一些DNA電泳片段進行回收和純化,用于亞克隆、探針標記等。DNA回收和純化常用方法有壓碎法、低融點瓊脂糖法、凍融法等,也有現成的試劑盒供應。一、凍融法1.??紫外燈下仔細切下含待回收DNA的膠條,將切下的膠條(小于0.6g)搗碎,置于

    DNA片段的回收實驗

    樹脂回收法 微量柱法 液氮凍融法 常規方法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 本方法特別適合于PCR片段的回收,具有純度高、操作簡潔等特點,經此方法

    DNA片段的回收實驗

    實驗方法原理 本方法特別適合于PCR片段的回收,具有純度高、操作簡潔等特點,經此方法回收的片段可有效的用于重組載體構建。通過15分鐘的純化過程,PCR產物即能被有效地從含引物二聚體、非特異性擴增引物片斷等混合物中分離出來,成為高度無鹽的、不含其他大分子成分的純化片斷。在較寬的分子量范圍內有較高的回收

    DNA片段的制備方法

    常用以下方法獲得DNA片段:①用限制性核酸內切酶將高分子量DNA切成一定大小的DNA片段;②用物理方法(如超聲波)取得DNA隨機片段;③在已知蛋白質的氨基酸順序情況下,用人工方法合成對應的基因片段;④從mRNA反轉錄產生cDNA。

    檢測循環腫瘤DNA追蹤黑色素瘤進展

      最近一項新研究報道稱一種血液檢測方法能夠發現血液中死亡癌細胞的DNA片段,利用這種方法跟蹤預測轉移性黑色素瘤的進展和潛在擴散能力要比目前使用的標準檢測方法更好。這項研究由紐約大學的研究人員領導完成,發表在國際學術期刊Molecular Oncology上。  目前臨床使用的標準檢測方法需要檢測血

    DNA片段的亞克隆實驗

    實驗材料 DNA試劑、試劑盒 CIPdNTPDNA聚合酶T4聚合酶DTTATP儀器、耗材 水浴鍋電泳儀培養箱實驗步驟 1. ?在20 μl 反應體積內用合適的酶完全消化DNA。75℃加熱15 min,滅活酶。如若無需進一步的酶促處理,接歩驟6。2. ?如果5’磷酸需要去除,加入2 μl 10×CIP

    微量柱法純化DNA片段

    實驗概要目的DNA片段的回收技術是重組DNA中的關鍵技術,回收是指從電泳介質中純化出目的片斷。目前待回收的片斷主要有酶切片斷和各種PCR片斷;回收的介質主要有瓊脂糖和PAGE;回收的方法主要有樹脂回收、微量柱回收、玻璃奶回收、液氮凍凍融回收及透析袋大量回收等,下面分別介紹樹脂、微量柱及液氮凍凍融回收

    凍融法回收DNA片段

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 凍融法是指采用反復冷凍與融化時由于細胞中形成了冰晶及剩余液體中鹽濃度的增高可以使細胞破裂。這種方法簡單方便,但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜采用此法。? 實驗材料

    PCR擴增分離目的DNA片段

    一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用,掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域,它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分

    凍融法回收DNA片段

    凍融法回收DNA片段可用于:(1)獲取純化的DNA片段;(2)回收PCR產物。實驗方法原理凍融法是指采用反復冷凍與融化時由于細胞中形成了冰晶及剩余液體中鹽濃度的增高可以使細胞破裂。這種方法簡單方便,但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜采用此法。?實驗材料DNA膠條試劑、試劑盒Tris-HCl飽和酚

    DNA片段探針的應用實驗

    實驗材料 DNA試劑、試劑盒 雜交液洗膜液儀器、耗材 注射器超聲儀水浴鍋實驗步驟 1. ?用5~20 ml 雜交液Ⅰ依次浸泡10~20張硝酸纖維素濾膜。濾膜裝入雜交袋中,加入足夠的雜交液,密封后42℃預雜交1 h。?2. ?往帶螺蓋的試管中,加入放射性探針和2 mg 超聲波處理的鯡魚精DNA,煮沸1

    DNA小片段的純化回收

    DNA 電泳小于100bp的片斷通常在電泳時就比較難觀察分辨,需要用分辨率很高的瓊脂糖或者丙烯酰胺凝膠。比如Cambrex的NuSieve 3:1或者GTG,或者是大名鼎鼎的MetaPhor瓊脂糖。所以實際上對于小片斷,可以分為兩種情況:一個是真的要回收電泳中特別小的片斷,這種情況我們前面有提到,比

    DNA片段的亞克隆實驗

    基本方案 凝膠塊中DNA連接 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒

    DNA片段探針的應用實驗

    甲酰胺法 水溶液中雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 DNA 試劑、試劑盒

    DNA的酶切與連接——DNA片段連接

    實驗方法原理核酸片段可以通過連接酶的作用連接起來而獲得重組分子。實驗材料λDNA EcoT14I:由11條DNA片段組成試劑、試劑盒T4 DNA連接酶及其配套的10×連接緩沖液 0.5×TBE電泳緩沖液 6×Loading Buffer Goldview 瓊脂糖儀器、耗材電泳儀 水浴鍋 移液器 微波

    循環腫瘤DNA為卵巢癌提供精準治療新思路

      惡性漿液性卵巢癌(HGSOC)是卵巢癌中最常見和最具侵襲性的亞型。 HGSOC腫瘤由幾個具有大量突變的異質細胞群組成。這種遺傳變異性使得難以找到能夠殺死所有癌細胞的藥物,并且細胞在治療期間不會對其產生抗藥性。  超過一半的診斷為高級別漿液性卵巢癌的患者在診斷后五年內死亡,即每年全球超過150,0

    百余根硅納米線陣列監測循環腫瘤DNA

    ??近日,杭州電子科技大學副教授李杜娟通過引入高效能晶體管生物傳感器,在癌癥早期診斷以及術后監控上取得新進展。相關研究成果發表于《生物傳感器和生物電子》Biosensors and Bioelectronics。 生物傳感器是一類用于檢測特定分析物的分析設備,通常由生物識別元件、換能器和電子檢測

    循環腫瘤DNA為難治性前列腺癌提供線索

    前列腺癌是西方國家老年男性常見的癌癥。許多患有前列腺癌的男性死于其他原因,而不知道自己身患癌癥。多數前列腺癌生長非常緩慢,不會引起癥狀,但有些癌癥是侵襲性的,生長和擴散的速度很快。然而,醫生往往無法判斷哪種前列腺癌是侵襲性的。近日,加拿大英屬哥倫比亞大學領導的研究團隊表明,血漿中循環腫瘤DNA的“年

    NEJM:循環腫瘤DNA監測轉移性乳腺癌潛力巨大

      轉移性乳腺癌的治療需要監測腫瘤負荷以明確治療應答,并且還需要改善生物標志物,如癌抗原15-3(CA 15-3)和循環腫瘤細胞。這類生物標志物已得到廣泛研究。然而,對于乳腺癌,攜帶有腫瘤特異性變異的循環游離細胞DNA(循環腫瘤DNA)尚未得到充分的研究,或尚未與其他循環生物標志物進行比較。英國

    DNA片段的回收實驗——常規方法

    實驗材料NA片段試劑、試劑盒純化試劑盒異丙醇儀器、耗材離心機電泳儀電泳槽取液器微量真空裝置抽濾裝置實驗步驟1. ?PAGE電泳,如EB染色的則在紫外燈下切下目的片斷,如齦染或其他非放染色的則在關下切下目的片斷。2. ?用少量脫緩沖液I將目的片斷膠條洗至一Eppendorf管中,用玻棒將凝膠搗碎,用1

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