細菌中制備基因組DNA實驗——氯化銫法
實驗方法原理提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質,得到的DNA溶液經乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。實驗材料細菌試劑、試劑盒溴化乙錠氯化銫丁醇儀器、耗材離心機巴斯吸管搖床實驗步驟1. 培養100 ml 細菌培養物至飽和狀態,用JA-20轉子4 000 g 離心10 min。2. 用9.5 ml 的TE緩沖液重懸沉淀。3. 加0.5 ml 10%的SDS和50 ul 20 mg/ml 的蛋白酶K,混合,于37℃溫育1 h。4. 加1.8 ml 5 mol/l NaCl,充分混合,加入1. 5 ml CTAB/NaCl溶液,混合,于65℃溫育20 min。 5. 加等體積的氯仿/異戊醇抽提,室溫下6 000 g 離心10 min,用寬口吸管將上清液......閱讀全文
細菌中制備基因組DNA實驗——氯化銫法
實驗方法原理提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質,得到的DNA溶液經乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。實驗材料細菌試劑、試劑盒溴化乙錠氯化銫丁醇儀器、耗材離心機巴斯吸管搖床實驗步驟1. ?培養100 ml
植物組織制備基因組DNA實驗——氯化銫法
利用基因組DNA較長的特性,可以將其與細胞器或質粒等小分子DNA分離。在提取過程中,染色體會發生機械斷裂,產生大小不同的片段,因此分離基因組DNA時應盡量在溫和的條件下操作,如盡量減少酚/氯仿抽提、混勻過程要輕緩, 以保證得到較長的DNA。實驗方法原理加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA
連續梯度法 不連續梯度法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法,取決于與線狀 DNA 和閉環 DN
原子吸收測鈉時,為什么要加氯化銫
加入氯化銫是為了抑制電離效應!在溶液中檢測?那要原子化器干什么??加氯化銫是為了抑制鈉原子電離。
原子吸收測鈉時,為什么要加氯化銫
加入氯化銫是為了抑制電離效應!在溶液中檢測?那要原子化器干什么??加氯化銫是為了抑制鈉原子電離。
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗
實驗方法原理 用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法,取決于與線狀 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。實驗材料 粗制質粒試劑、試劑盒 CsCl CsCl 再分帶溶液乙醇溴化乙錠 石蠟油儀器、耗材 皮下注射針頭折光儀一次性注射器實驗步驟 一、材料1.
原子吸收測鈉時,為什么要加氯化銫
加入氯化銫是為了抑制電離效應! 在溶液中檢測?那要原子化器干什么?? 加氯化銫是為了抑制鈉原子電離。
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗(一)
用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法,取決于與線狀 DNA 和閉環 DNA 結合的溴化乙錠的量的差異。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。連續梯度法實驗方法原理用含氯化銫和溴化乙錠的懸浮密度梯度離心法分離質粒和染色體 DNA 的方法,取決于與線狀 DN
氯化銫溴化乙錠梯度平衡離心法純化閉環DNA實驗(二)
實驗方法原理通過不連續或預先形成的氯化銫(CsCl)梯度離心,可在離心管中獲得含有不同濃度 CsCl 的溶液分層,樣品位于中層(三級梯度法)或底層(兩級梯度法)。實驗材料粗制質粒試劑、試劑盒CsCl溴化乙錠TE儀器、耗材皮下注射針頭折光儀一次性注射器實驗步驟一、材料1. 緩沖液和溶液CsCl ( 固
異硫氰酸胍/氯化銫超速離心法制備-RNA-實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞和組織 試劑、試劑盒 氯仿 氯化銫溶液 二硫蘇糖醇 EDTA
異硫氰酸胍/氯化銫超速離心法制備-RNA-實驗
這種方法源自于對 Chirgwin 等(1979) 所擬方案的修改。對 Chirgwin 等所規定的試劑,許多試劑盒中常用,且用于分離和純化 RNA 的試劑也是常見的。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。實驗材料細胞和組織試劑、試劑盒氯仿氯化銫溶液二硫蘇糖醇EDTA乙醇異硫
異硫氰酸胍/氯化銫超速離心法制備-RNA-實驗
實驗材料 細胞和組織試劑、試劑盒 氯仿氯化銫溶液二硫蘇糖醇EDTA乙醇異硫氰酸胍裂解緩沖液異丙醇N-月桂酰肌氨酸氯化鋰液氮β-巰基乙醇苯酚儀器、耗材 離心機和轉子研缽和杵超速離心管實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑氯仿氯化銫溶液,5.7mol/L(5.7mol/L 氯化銫,25 mmol/L
甘油磷酸鈉的含量測定方法
鈉精密量取本品2ml,置200ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取10ml,置50ml量瓶中,用水稀釋至刻度,搖勻,精密量取2ml,置100ml量瓶中,加氯化銫溶液(取氯化銫63.34g,加水溶解,并稀釋至1000ml)4.0ml,用水稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液;另精密稱取在130℃干燥
用離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠實驗
經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。實驗材料DNA 樣品試劑、試劑盒
植物組織制備基因組DNA實驗
氯化銫法 CTAB法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 加入一定量的異丙醇或乙醇,基因組的大分子DNA即沉淀形成纖維狀絮團飄浮其中, 可用玻棒將其取出,而小分子DNA則
用離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。 實驗材料 DNA 樣品
用離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠實驗
實驗方法原理 經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇HClNaCl酚氯仿TETEN 緩沖液儀器、耗材 Dowex AG50W-X8實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,HCl (1 mol/
密度梯度離心法概述
〔1〕亦稱平衡密度梯度離心法。用超離心機對小分子物質溶液,長時間加一個離心力場達到沉降平衡,在沉降池內從液面到底部出現一定的密度梯度。若在該溶液里加入少量大分子溶液,則溶液內比溶劑密度大的部分就產生大分子沉降,比溶劑密度小的部分就會上浮,最后在離心力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子帶狀物。利用這
質粒DNA的大量制備實驗
堿裂解法 氯化銫/溴化乙錠平衡離心法 層析法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 大量堿裂解方法不僅相當快捷可靠,而且可獲得相當純凈的粗制DNA。煮沸法的大量制
工業循環冷卻水中鉀含量的測定
工業循環冷卻水中鉀含量的測定GB/T 14640-93Industrial circulating cooling water-Determination ofpotassium-Atomic absorption spectrometric method?原子吸收光譜法?1?主題內容與適用范圍本標
工業循環冷卻水中鉀含量的測定
工業循環冷卻水中鉀含量的測定 GB/T 14640-93 Industrial circulating cooling water-Determination of potassium-Atomic absorption spectrometric method 原
細菌中制備基因組DNA實驗
小量制備 氯化銫法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿
復方氨基酸注射液(18AAⅠ)的含量測定方法
氨基酸取本品,用適宜的氨基酸分析儀或高效液相色譜儀進行分離測定;另取相應的氨基酸對照品,制成相應濃度的對照品溶液,同法測定。按外標法以峰面積計算各氨基酸的含量如不能同時測定色氨酸含量時,按以下方法測定。色氨酸照紫外-可見分光光度法(通則0401)測定供試品溶液精密量取本品2ml,置100ml量瓶中,
關于隨體DNA的基本信息介紹
隨體DNA更廣泛地是指染色體DNA和獨立存在的小型DNA。 若將DNA放在氯化銫中,用平衡密度梯度離心,則按GC含量,在特定的密度部位形成帶。采用該法將從細胞抽提的DNA分離,除主要的DNA帶外,有時可出現小的帶,后者就叫做隨體DNA。有的隨體DNA像細胞內的質環DNA那樣是獨立的分子,但也有
原子吸收分光光度法測定鉀、鈉離子的方法原理
火焰原子吸收分光光度法是根據某元素的基態原子對該元素的特征波長輻射產生選擇性吸收來進行測定的分析方法。將降水試樣噴入空氣-乙炔火焰中,分別在波長766.4nm和589.0nm處測定鉀、鈉離子的吸光度,繪制標準曲線。由于鉀、納離子易電離,有干擾。因此在試樣中加入消電離劑(氯化銫或硝酸銫)即可消除。木方
離心機的離心方法實際操作有幾種形式
實際操作有幾種形式:差速離心這種方法是選擇不同轉速的離心,分別分離各個不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,在高速離心上清沉降中等顆粒,最后超速離心上清沉降小顆粒。采用逐級提高離心力分離上情液的方法,把不同大小的顆粒分開。這種方法比較簡單,方便。分離的組份沉到管底,因此可以迅速濃縮所要的組份,減
細胞化學基礎衛星DNA
衛星DNA(satelliteDNA)是一類高度重復序列DNA。在介質氯化銫中作密度梯度離心(離心速度可以高達每分鐘幾萬轉)時,DNA分子將按其大小分布在離心管內不同密度的氯化銫介質中,小的分子處于上層,大的分子處于下層。從離心管外看,不同層面的DNA形成了不同的條帶。根據熒光強度的分析,可以看到在
細胞化學詞匯衛星DNA
衛星DNA(satelliteDNA)是一類高度重復序列DNA。在介質氯化銫中作密度梯度離心(離心速度可以高達每分鐘幾萬轉)時,DNA分子將按其大小分布在離心管內不同密度的氯化銫介質中,小的分子處于上層,大的分子處于下層。從離心管外看,不同層面的DNA形成了不同的條帶。根據熒光強度的分析,可以看到在
落地式高速冷凍離心機分離生物大分子時梯度介質的選擇
? ? ? ??落地式高速冷凍離心機分離生物大分子時,等密度梯度介質的選擇范圍很廣,其中以堿金屬鹽和碘化梯度介質為主。??????? 堿金屬鹽中用的zui多的是氯化銫和硫酸銫。氯化銫用于DNA等密度分離,有時用于密度屏障快速沉淀DNA。RNA幾乎都用硫酸銫等密度分離。??????? 碘化梯度介質有M
落地式高速冷凍離心機分離生物大分子時梯度介質的選擇
落地式高速冷凍離心機分離生物大分子時,等密度梯度介質的選擇范圍很廣,其中以堿金屬鹽和碘化梯度介質為主。堿金屬鹽中用的zui多的是氯化銫和硫酸銫。氯化銫用于DNA等密度分離,有時用于密度屏障快速沉淀DNA。RNA幾乎都用硫酸銫等密度分離。碘化梯度介質有Metrizamide、Ny-codenz和Iod