衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒EcoRI 酶儀器、耗材SGII 培養基實驗步驟1. 500 ml 燒瓶中裝 250 ml SGII 培養基,在通氣和恒定光照條件下,培養細胞至 5X106 /ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切質粒。3. 去細胞壁,低速離心濃縮細胞,在 SGII-NO3 培養基重懸細胞為 109 個/ml。4. 將細胞放入滅菌燒瓶中,剛好蓋上瓶底,在亮光下輕搖 4 個小時。5. 轉化時,將細胞稀釋到 1.7X108 個/ml,取 0.3 ml 加入裝有 0.3 g 玻璃珠的 15 ml 帶塑料帽的圓錐形離心試管中。6. 加入滅菌 PEG 溶液,終濃度為 5%。7. 立即加入 1 μg 線性化的 pMN24 DNA,用旋轉混合儀最高速度旋轉混合 45 秒。8. 立即加入 10 ml SGII-NO3 培養基稀釋交配混合液,將細胞倒入一干凈的 15 ml 試管中,用桌面醫......閱讀全文
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒EcoRI 酶儀器、耗材SGII 培養基實驗步驟1. 500 ml 燒瓶中裝 250 ml SGII 培養基,在通氣和恒定光照條件下,培養細胞至 5X106?/ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切質粒。3. 去細胞壁,低速離心濃縮細胞,在 SGII-NO3?培養基重懸細胞為
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
實驗材料細胞試劑、試劑盒EcoRI 酶儀器、耗材SGII 培養基實驗步驟1. 500 ml 燒瓶中裝 250 ml SGII 培養基,在通氣和恒定光照條件下,培養細胞至 5X106?/ml 密度。2. 用 EcoRI 酶切質粒。3. 去細胞壁,低速離心濃縮細胞,在 SGII-NO3?培養基重懸細胞為
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
衣藻的遺傳技術(轉化) ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒
衣藻的遺傳技術(轉化)實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 EcoRI 酶 儀器、耗材
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗
配子發生 交配 合子成熟 合子萌發 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞苔層
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗
實驗材料 細胞苔層試劑、試劑盒 蒸餾水儀器、耗材 培養基實驗步驟 1. 在含 M 或 TAP 培養基的瓊脂平板上生長細胞苔層。配子最容易從成熟但不老的細胞苔層獲得。2 周以內的培養物最好,但較老的平板培養物常與一些細胞株一起使用。2. 用接種環取 1 環細胞,重懸在 1 ml 滅菌蒸餾水中。3. 光
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗
配子發生 交配 合子成熟 合子萌發 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞苔層
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗——交配
實驗材料mt+ 和 mt- 配子儀器、耗材96 孔皿相差顯微鏡或 DIC 顯微鏡實驗步驟1. 在 96 孔皿的 1 個孔中混合基本等量的 mt+ 和 mt- 配子。2. 光照 2 小時,用相差顯微鏡或 DIC 顯微鏡取 1 滴交配混合液分析交配效果。3. 將 1 滴交配混合液滴到瓊脂平板中心。4.
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗——合子成熟
實驗材料合子儀器、耗材平板鋁箔實驗步驟1. 光照 18~24 小時孵育合子。2. 再強力塑料包裝材料包裹平板,再用鋁箔封好,放黑暗中至少 5 天。平板可在黑暗中數月保持活力,也不會干燥。如果 5 天后所有合子萌發形成八細胞,將細胞在黑暗處放更長的時間。黑暗孵育更長時間通常會得到更高的四細胞萌發百分率
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗——配子發生
實驗材料細胞苔層試劑、試劑盒蒸餾水儀器、耗材培養基實驗步驟1. 在含 M 或 TAP 培養基的瓊脂平板上生長細胞苔層。配子最容易從成熟但不老的細胞苔層獲得。2 周以內的培養物最好,但較老的平板培養物常與一些細胞株一起使用。2. 用接種環取 1 環細胞,重懸在 1 ml 滅菌蒸餾水中。3. 光照下 3
衣藻的遺傳技術(四分體分析)-實驗——合子萌發
實驗材料合子儀器、耗材平板立體解剖顯微鏡實驗步驟1. 打開平板包裝,將表面用滅菌的單刃剃刀片刮幾次。2. 平板光照至少 18 小時。3. 用立體解剖顯微鏡將合子放到平板上,用纖維光源照亮平板。4. 用圓頭玻璃針,將萌發的四分體的 4 個細胞推壓分開大約 5 mm,形成一個圓圈。5. 平板光照 1 周
已經存在的微藻生物質轉化技術
已經存在的微藻生物質轉化技術可以大致分為以下三類:1)不通過提取工藝,直接將微藻轉化為可再生燃料。2)加工處理全部微藻生物質轉化為燃料。3)加工微藻提取物(如脂質、碳水化合物)生產燃料。
《科學》:衣藻基因組基本測定完成
?通過100余位科學家的努力,衣藻(一種單細胞土生藻類)的基因組已經基本測定完成。在10月12日的《科學》雜志上,研究人員發表了他們對萊氏衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)基因組的分析報告。研究人員在衣藻基因組中發現了動植物早期進化的線索,尤其是在光合作用和鞭毛進化方面。
李小波博士等發現光合作用所需的多個候選基因
萊茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是一種非常有價值的真核模式生物,被廣泛用于與光合作用、呼吸作用、脂類合成、細胞運動(生物鞭毛)、非生物脅迫等生物學過程相關的功能研究(圖1)【1】。長期以來,通過同源重組將外源基因插入是敲除萊茵衣藻基因的主要方式,與外源基因的隨機插入
關于萊茵衣藻等36種“三新食品”的公告
根據《中華人民共和國食品安全法》規定,審評機構組織專家對萊茵衣藻等3種新食品原料、喹啉黃鋁色淀等18種食品添加劑新品種、磷酸鋯(2:1)等15種食品相關產品新品種的安全性評估材料進行審查并通過。特此公告。附件:萊茵衣藻等36種“三新食品”的公告文本國家衛生健康委2022年5月5日
萊茵衣藻光保護蛋白PsbS快速瞬間積累和功能
FluorCam葉綠素熒光系統發表文獻選錄—萊茵衣藻光保護蛋白PsbS快速瞬間積累和功能?所有光合生物都必須要應對過量光照來避免光合氧化脅迫。對于植物和綠藻來說,高光的最快響應機制就是非光化學淬滅(NPQ)。這一過程允許將過量能量以熱量形式安全地耗散掉。PsbS蛋白是這一過程中的重要傳感器。為了確定
CMD1基因通過去甲基化調控萊茵衣藻對高光強的適應性
DNA甲基化是指DNA序列上特定的堿基通過共價鍵結合的方式獲得一個甲基基團的化學修飾過程,是一種普遍存在于生物體的DNA修飾方式。DNA甲基化能夠在不改變DNA序列的前提下改變遺傳表現,是表觀遺傳學的核心研究領域之一。目前的研究表明,DNA甲基化與基因組印記、X染色體失活、轉座因子抑制、衰老和癌
植物所揭示萊茵衣藻m6A表觀轉錄組圖譜
m6A是廣泛存在于真核生物mRNA中的表觀修飾,與RNA命運相關。近年來,m6A修飾在植物胚胎發育、莖尖分生組織的命運決定、表皮毛發生、根部發育、葉形態發生、開花轉變、脅迫響應、果實成熟及孢子發生等多個生物學過程中發揮重要功能。然而,m6A在藻類中的功能尚不清楚。藻類包含從單細胞到多細胞的多種細
微藻提取物的轉化化學催化介紹
酸和基礎的化學催化劑可以分為Bronsted 和Lewis 兩類,Lewis 酸性催化劑,如AlCl3 和ZnCl3,可高效將三酰甘油轉化為脂肪酸甲酯。其它有效的化學催化劑還有ATixMO,HTiNbO3,TiVO4 等。化學催化劑面臨的問題是尋找與現有催化劑催化活性一樣,但所需反應溫度低的催化劑。
新方法打破基因編輯技術對遺傳轉化依賴
近日,中國農業科學院油料作物研究所油料作物逆境生物學和抗性改良團隊聯合成都市農林科學院相關團隊,建立了一種新型的基因編輯方法。該方法打破了基因編輯技術對遺傳轉化的依賴,直接通過授粉的方式對油菜和甘藍的基因進行基因編輯,獲得了不含轉基因元件的突變材料。相關研究成果發表于《植物生物技術雜志》。 油菜
微藻脂質代謝機制有了新進展
近日,大連理工大學孔凡濤副教授受邀在《生物技術的當前觀點》發表綜述文章,介紹了微藻脂質代謝機制及其提高油脂含量的研究進展。 微藻的光合作用效率高、能合成富含能量的儲存脂質(即油脂)、具有大規模種植、不與農作物爭奪耕地和淡水等優勢,廣泛應用于食品及保健品、生物柴油等領域。同時,在全球碳循環中發揮
微藻提取物的轉化-酯交換反應簡介
酯交換反應用于將微藻中提取的甘油三酯轉化為FAMEs(fatty acid methyl esters),僅僅是將醇基由另一個醇基或者酯基取代的過程,可以使用/不使用催化劑,通過不同的加熱系統,促進反應。這一技術已經相對成熟,并且在將菜籽油轉化為生物柴油的過程中應用廣泛。酸催化的酯化反應是酯化反應的
微藻提取物的轉化-超臨界工藝介紹
超臨界工藝是最近發展起來的一項可以同時實現油脂提取和轉化的技術(Demirbas,2007)。使用超臨界工藝提取微藻油脂效率要遠遠高于傳統的溶解分離技術,同時也可以高效提取微藻中其他組分。由于超臨界液體是有針對性的,因此可實現提取物的高純度和高濃度。另外,在提取物和剩余物質中,沒有有機溶劑污染。提取
藻酸鹽包裹實驗
實驗材料 藻酸鹽試劑、試劑盒 生理鹽水無血清培養基CaCl2苯巴比妥鈉葡聚糖儀器、耗材 加樣槍磁力攪拌器注射器研缽熒光酶標儀實驗步驟 1. 將藻酸鈉溶于無菌生理鹽水,終濃度為1.5%;?2. 收集培養的腫瘤細胞,用無血清的培養基洗滌1 次,將細胞沉淀重懸于1.5%藻酸鈉溶液中;?3. 將上述腫瘤細胞
藻酸鹽包裹實驗
1.????? 將藻酸鈉溶于無菌生理鹽水,終濃度為1.5%;2.????? 收集培養的腫瘤細胞,用無血清的培養基洗滌1次,將細胞沉淀重懸于1.5%藻酸鈉溶液中;3.????? 將上述腫瘤細胞懸浮液用1 ml加樣槍緩慢滴入磁力攪拌的250 mM CaCl2溶液中,形成乳白色的藻酸鹽小珠。繼續靜置于25
藻酸鹽包裹實驗
實驗材料藻酸鹽試劑、試劑盒生理鹽水無血清培養基CaCl2苯巴比妥鈉葡聚糖儀器、耗材加樣槍磁力攪拌器注射器研缽熒光酶標儀實驗步驟1. 將藻酸鈉溶于無菌生理鹽水,終濃度為1.5%;?2. 收集培養的腫瘤細胞,用無血清的培養基洗滌1 次,將細胞沉淀重懸于1.5%藻酸鈉溶液中;?3. 將上述腫瘤細胞懸浮液用
農桿菌介導的植物遺傳轉化
農桿菌介導的植物遺傳轉化 【目的】:學習和掌握共培養過程關鍵技術環節及轉基因植株的篩選。 【要求】:以煙草葉片為材料,與對數生長期的帶有外源基因的農桿菌共培養,遺傳轉化煙草葉片,篩選抗性再生植株。 【內容】:1、煙草無菌苗的準備 2、帶有外源基因農桿菌的培養
農桿菌介導的植物遺傳轉化
實驗概要以煙草葉片為材料,與對數生長期的帶有外源基因的農桿菌共培養,遺傳轉化煙草葉片,篩選抗性再生植株。掌握共培養過程關鍵技術環節及轉基因植株的篩選。主要試劑70%乙醇0.1% HgCl2無菌水卡那霉素(kan)羧芐青霉素(Cb)培養基:LB培養基100ml;MS 鹽溶液(pH 7.0)100ml,
農桿菌介導的遺傳轉化程序
實驗概要農桿菌侵染實驗實驗步驟(1) 農桿菌菌液的制備??將農桿菌接種于附加50mg/L Km、50mg/L Sm、50mg/L Rif的YEB固體培養基上,28℃暗培養,至長出單菌落。用接菌環挑取單菌落,接種在5mL含相應抗生素的YEB液體培養基中,于28℃,200r/min 培養過夜。待
農桿菌介導的植物遺傳轉化
農桿菌介導的植物 ?遺傳轉化 【目的】:學習和掌握共培養過程關鍵技術環節及轉基因植株的篩選。 【要求】:以煙草葉片為材料,與對數生長期的帶有外源基因的農桿菌共培養,遺傳轉化煙草葉片,篩選抗性再生植株。 【內容】:1、煙草無菌苗的準備 2、帶有外源基因農桿菌的培養 3、煙草葉片與對