條件培養基的制備
實驗方法原理收集對數生長晚期的同源或異源細胞系的培養基,過濾,根據需要用新鮮培養基稀釋。實驗材料條件細胞儀器、耗材克隆用培養基除菌濾器實驗步驟1. 條件細胞(條件細胞:同一種細胞、其他細胞系(如,3T 3 細胞),或小鼠胚胎成纖維細胞)生長至 50 % 匯合。2. 更換培養基,繼續培養 48 h 。3. 收集培養基。4. 離心,1000 g,10 min。5. 0.45 μm 無菌過濾器(除菌濾器:0.45 μm 或0.22 μm ,過濾瓶)過濾(培養基可以先經過 5 μm 和 1.2 μm 過濾器預先過濾)。6. 將條件培養基(克隆用培養基:Ham’s F12,加 10 % FBS 或適合待克隆細胞的培養基) -20°C 保存。7. 用前解凍,按照如下比例加在克隆培養用培養基中:1 份條件培養基加 2 份克隆培養用培養基。展開 其他離心、凍存、解凍、過濾,這些步驟都有助于避免從原培養瓶中攜帶細胞。如果克隆培養的細胞與......閱讀全文
條件培養基的制備
實驗方法原理收集對數生長晚期的同源或異源細胞系的培養基,過濾,根據需要用新鮮培養基稀釋。實驗材料條件細胞儀器、耗材克隆用培養基除菌濾器實驗步驟1. 條件細胞(條件細胞:同一種細胞、其他細胞系(如,3T 3 細胞),或小鼠胚胎成纖維細胞)生長至 50 % 匯合。2. 更換培養基,繼續培養 48 h 。
條件培養基的制備
實驗方法原理收集對數生長晚期的同源或異源細胞系的培養基,過濾,根據需要用新鮮培養基稀釋。實驗材料條件細胞 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?儀器、耗材克隆用培養基 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
條件培養基的制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 收集對數生長晚期的同源或異源細胞系的培養基,過濾,根據需要用新鮮培養基稀釋。 實驗材料 條件細胞
使用適應性培養基或條件培養基制備
(1)培養同源細胞(未克隆前時的同一細胞)至半匯合狀態時,更換一次培養液,再繼續培養24~48小時后,吸出所有培養液。(2)離心:3000~4000/分離心10分鐘,吸取上清液。(3)濾過:再經直徑0.22μm濾孔的濾膜過濾,低溫凍存貯備用;用時取1分適應培養基+2分培養基混合使用。
中和或滅活用培養基制備與培養條件
按上述硫乙醇酸鹽流體培養基或胰酪大豆胨液體培養基的處方及制法,在培養基滅菌或使用前加入適宜的中和劑、滅活劑或表面活性劑,其用量同驗證試驗。
硫乙醇酸鹽流體培養基制備與培養條件
酪胨(胰酶水解) 15.0g?酵母浸出粉?5.0g無水葡萄糖 5.0g 氯化鈉 2.5gL-胱氨酸?0.5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0 ml硫乙醇酸鈉?0.5g?瓊脂?0.75g(或硫乙醇酸) (0.3ml) 水 1000 ml除葡萄糖和刃天青溶液外,取上述成分混合,微溫溶解,調節pH 為
0.5%葡萄糖肉湯培養基制備與培養條件
胨 10.0g 氯化鈉 5.0g葡萄糖 5.0g 水 1000 ml牛肉浸出粉 3.0g除葡萄糖外取上述成分混合,微溫溶解,調節pH為弱堿性,煮沸,加入葡萄糖溶解后,搖勻,濾清,調節pH值使滅菌后在25℃為7.2±0.2,分裝,滅菌。
胰酪大豆胨瓊脂培養基制備與培養條件
胰酪胨 15.0g 大豆木瓜蛋白酶水解物 5.0g氧化鈉 3.0g 瓊脂 15.0g水 1000 ml除瓊脂外,取上述成分混合,微溫溶解,調節pH值使滅菌后在25℃為7.3±0.2,加入瓊脂,加熱溶化后,搖勻,分裝,滅菌。
胰酪大豆胨液體培養基制備與培養條件
胰酪胨 17.0g 大豆木瓜蛋白酶水解物 3.0g葡萄糖/無水葡萄糖2.5g/2.3g 氧化鈉 5.0g磷酸氫二鉀 2.5g 水 1000 ml除葡萄糖外,取上述成分混合,微溫溶解,濾過,調節pH值使滅菌后為7.3±0.2,加入葡萄糖分裝,滅菌。胰酪大豆胨液體培養基置20℃~25℃培養。
沙氏葡萄糖液體培養基制備與培養條件
動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 10.0g葡萄糖 20.0g 水 1000ml除葡萄糖外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH值使滅菌后在25℃為5.6±0.2,加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅菌。
沙氏葡萄糖瓊脂培養基制備與培養條件
動物組織胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物 10.0g葡萄糖 40.0g 瓊脂 15.0g 水 1000ml除葡萄糖、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節pH值使滅菌后在25℃為5.6±0.2,加入瓊脂,加熱溶解,再加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅菌。
培養基的制備
目的要求 ?1.掌握一般培養基制備的原則和要求。 ?2.熟悉一般培養基制備的過程。 ?操作步驟 ?一、培養基的制備原則和要求 ?培養基是根據各類微生物生長繁殖的需要,用人工方法把多種物質混合而成的營養物。一般用來分離、培養菌類。常用的培養基有基礎培養基、增菌培養基、選擇
釀酒酵母培養基的制備實驗——YPAD培養基的制備
試劑、試劑盒酵母提取物蛋白胨葡萄糖偏硫酸腺嘌呤瓊脂水儀器、耗材錐形瓶實驗步驟1. 在 1 L 的帶螺旋蓋的瓶中或錐形瓶中將下面的成分溶于 500 ml 水中,置于振蕩器上。酵母提取物 6.0 g,蛋白胨 12.0 g,葡萄糖 12.0 g,偏硫酸腺嘌呤 60.0 mg,瓊脂 10.0 g,加水到 6
液體培養基的控制培養基的條件介紹
(1) 控制培養基的pH 配制培養基必須根據微生物的特點調節pH。各大類微生物要求的適宜生長pH范圍不同。如霉菌與酵母菌一般為5.0-6.0, 細菌為6.5-7.5.放線菌為7.5-8.5.培養基的pH與其C/N有極大關系。C/N高的培養基,例如培養各種真菌的培養基,經培養后其pH明顯下降;相反
明膠培養基的制備
成分: 蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 明膠 120g 蒸餾水 1000mL 制法: 將上述成分混合,置流動蒸氣滅菌器內,加熱溶解,校正pH至7.0~7.2,用絨布過濾
MFC培養基的制備
成分:胰胨 5g 酵母浸膏 3g 氯化鈉 5g 乳糖 12.5g 膽鹽3號(bile salt No.3) 1.5g 或混合膽鹽 瓊脂15g 苯胺藍(aniline blue)
培養基制備技術
一、玻璃器皿的清洗 在制備培養基的過程中,首先要使用一些玻璃器皿,如試管、三角瓶、培養皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據不同的情況,經過一定的處理,洗刷干凈。有的還要進行包裝,經過滅菌等準備就緒后,才能使用。1、新購的玻璃器皿 除去包裝沾染的污垢后,先用熱肥皂水刷洗,流水沖凈,再浸泡于1
肉湯培養基制備
貴陽中醫學院基礎醫學實驗教學中心網站肉湯培養基制備實驗儀器、耗材 鮮牛肉末蛋白胨氯化鈉蒸餾水實驗步驟 去脂、去筋鮮牛肉末50g,加水100ml,攪勻,放冰箱過夜,取出煮沸30分鐘,用紗布過濾,補足水量為100ml,即為牛肉浸液。加入蛋白胨1g,氯化鈉0.5g,加熱溶解。調整PH值為7.6,煮沸10分
羅文斯坦培養基的制備
成份:磷酸二氫鉀 2.4克 硫酸鎂 0.24克 枸椽酸鈉 0.6克 天門冬素 3.6克 純甘油(丙三醇) 12毫升 水 600毫升 馬鈴薯粉 30克 雞蛋 1000毫升(約3公斤) 2%孔雀綠水溶液 20毫升 制法: 1.除雞蛋外(還有孔雀綠)。可將其它物品稱好,放入大三角瓶包扎好,
羅文斯坦培養基的制備
成份:磷酸二氫鉀 2.4克 硫酸鎂 0.24克 枸椽酸鈉 0.6克 天門冬素 3.6克 純甘油(丙三醇) 12毫升 水 600毫升 馬鈴薯粉 30克 雞蛋 1000毫升(約3公斤)?? 2%孔雀綠水溶液 20毫升?? 制法: 1.除雞蛋外(還有孔雀綠)。可將其它物品稱好,放入大三角瓶包扎
大米粉培養基的制備
制法: 將不含熒光物質的秈米挑去雜質和變質米粒,磨成粗粉,分裝后121℃高壓滅菌20min。 用途: 霉菌產毒用。
卵黃瓊脂培養基的制備
成分1 基礎培養基肉浸液 1000mL蛋白胨 15g 氯化鈉 5g 瓊脂 25~30g pH7.5 2 50%葡萄糖水溶液 3 50%卵黃鹽水懸液 制法 制備基礎培養基,分裝每瓶100mL。121℃高壓滅菌1
察氏培養基的制備
成分: 硝酸鈉 3g 磷酸氫二鉀 1g 硫酸鎂(MgSO4·7H2O) 0.5g 氯化鉀 0.5g 硫酸亞鐵 0.01g 蔗糖 3
培養基的制備技巧分享
目的請求 1.控制普通培育基制備的準繩和請求。 2.熟習普通培育基制備的過程。 操作步驟 一、培育基的制備準繩和請求 培育基是依據各類微生物生長繁衍的需求,用人工辦法把多種物質混合而成的營養物。普通用來別離、培育菌類。常用的培育基有根底培育基、增菌培育基、
培養基的制備及儲存
1、常用玻璃儀器的準備 制備培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷后用清水沖洗干凈,晾干后備用。 (1)試管管口用棉花塞或硅氟塑料試管塞塞好,再用布或報紙包扎好,121℃高壓蒸汽滅菌20℃后烘干,備用。(2)吸管及滴管先用少許棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽內的
光合細菌培養基的制備
滅菌和消毒 菌種培養用的培養基應連同培養容器用高壓蒸氣滅菌鍋滅菌。小型生產性培養可把配好的培養液用普通鋁鍋或大型三角燒瓶煮沸消毒。大型生產性培養則把經沉淀砂濾后的水用漂白粉(或漂白液)消毒后使用 接種 培養基配好后,應立即進行接種。光合細菌生產性培養的接種量比較高,一般為20—50%,即菌
馬丁氏培養基的制備
實驗方法原理 馬丁氏培養基是一種用來分離真菌的選擇性培養基。此培養基是由葡萄糖、蛋白胨、K2HPO4、MgS04·7H2O、孟加拉紅(玫瑰紅,Rose Bengal)和鏈霉素等組成,其中葡萄糖主要作為碳源,蛋白胨主要作為氮源,K2HPO4、MgS04·7H2O作為無機鹽,為微生物提供鉀、磷、
基礎培養基的制備
培養基是根據微生物 ?生長繁殖時對營養物質的需要而配制的營養制品,含有營養物質及適宜的酸堿度,經滅菌后使用。 常用的培養基按用途分為:基礎培養基、營養培養基、鑒別培養基、選擇培養基及厭氧培養基。按物理性狀分為固體、半固體和液體三種。 實驗目的: 了解常用的液體、固體、半固體培養基的成分、制備方法和用
培養基的制備和滅菌
一、實驗目的 了解并掌握培養基的配制、分裝方法;2掌握各種實驗室滅菌方法及技術。二、實驗原理?培養基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養料。由于微生物具有不同的營養類型,對營養物質的要求也各不相同,加之實驗和研究的目的不同,所以培養基的種類很多,使用的原料也各有差異,但從營養角度分析,培養基中一般含有
培養基的制備基本方法
培養基配方的選定 同一種培養基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此,除所用的是標準方法,應嚴格按其規定進行配制外.一般均應盡量收集有關資料.加以比較核對.再依據自己的使用目的加以選用,記錄其來源。 培養基的制備記錄 每次制備培養基均應有記錄,包括培養基名稱,配方及其來源.和各種成份的牌號