人NKT細胞的分離和擴增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選）流 式 細 胞 緩 沖 液（flow cytometry buffer， FCbuffer) : 含 1 % (v/V ) 人 血 清 、1 % (V / V ) FBS 和 0. 1 % (m /V ) 疊氮鈉的 PBS熒光素標記的抗 V a 24 單 抗（cloneC15B 2 ， P E 或 FITC 標 記 ， Coulter-Immunotech)熒光素標記的抗 V p i l 單 抗（clone C 21D 2, P E 或 F I T C 標 記 ， Coulter)突光素標記的同型對照抗體（BDPharmingen)突光素標記的抗 6B 1 1 單 抗（B D Pharmingen; 可選）Cy5 標記的抗......閱讀全文
人－NK－T－細－胞－的－分－離－和－擴－增
實驗步驟基本方案 1 NK T 細胞的鑒定材 料外周肝素抗凝血P B SR P M I -1640 培養基，含 1 0 % (V /V ) 人血清或 F C S 以 及 10U /m l I L -2 (可選）流 式 細 胞 緩 沖 液（flow cytometry buffer， FCbuffer
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－分－離
實驗步驟基 本 方 案 1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離材料小鼠，潔 凈 環 境 中 飼 養（最好置層流柜中飼養）7 3 % (m /V ) 豚 蛋 白 胨 或 者 3 % (W V r) Brewer 硫 基 乙 酸 鹽 肉 湯（Brewerthioglycollate medium，分離炎性腹腔巨嗤細
磁－珠－法－分－離T－細－胞－和－B－細胞
實驗步驟基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4?+細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2
293T－細－胞－包－裝－和－擴－增－反－轉－錄－病－毒
實驗步驟基 本 方 案 1 磷酸鑰/DNA 沉 淀瞬時轉染 Phoenix 反轉錄包裝細胞展
ELISPOT方－法－檢－測－分－泌－細－胞－因－子－的－細－胞
實驗步驟基本方案材 料包被緩沖液洗液：含 0.25% (v/v) Tween 20 的 PBS 溶液阻斷緩沖液：含 5 % (m/V) BSA 或 FCS 的 PBS 溶液VRPMMO 完全培養基（或其他適宜培養基）分泌細胞因子的細胞（小鼠或人的）絲裂原，抗原或其他促細胞因子分泌的刺激物帶有標記物的
NK/L－A－K－細－胞－殺－傷－活－性－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案?51C r 釋 放 法檢 測 NK/LA K 細胞殺傷活性材 料展
流－式－細－胞－儀－檢－測－全－血－的－人－淋－巴－細－胞
實驗步驟基本方案材 料（打 V 項 目 見 附 錄 1)全血，通 常 用 E D T A 抗凝P B S ，有 或 無 0.1% (m /V ) 疊氮鈉，過濾除菌單 克 隆 抗 體（標記的，未標記的或生物素化的），通過滴定確定最佳工作濃度間 標 二 抗（僅用于未標記的一抗）F T T C 標記的鏈霉
B－細－胞－分－泌－抗－體－的－檢－測
實驗步驟基 本 方案材 料外周 血 單 個 核 細 胞（P B M C ; 單 元 8.1)RPMI- 5 和 RPMI-IO 完全培養基P W M 溶液9 6 孔 平 底 培 養 板（Costar)1 . 計 數 PBMC (附錄 3A ) ， 用 RPMI-5 完全培養基調整濃度至 4 X 10
B－細－胞－功－能－的－增－殖－檢－測－方－法
實驗步驟基 本 方 案 抗 I g M 與 L P S 刺激的 B 細胞增殖材 料（帶 V 項 目 見 附 錄 1)純化的靜息 B 細 胞（單 元 2. 5)，采 用 Percoll 梯度離心制備V D M E M -10 完全培養基山羊抗 IgM (JacksonImmunoresearch) 或
人胚胎干細胞系:衍生與培養實驗——細－胞－培－養－基－成－分
實驗步驟2.2.5 BRL-條件培養基B R L 細胞在大鼠肝細胞培養基（BRL-CM) 中生長至匯合，用新鮮培養基更換一次 ， 3 天后收集這些培養基。所有培養基用無菌的、孔 徑 0.2um 的 P E S 濾膜過濾，特別是來自其他細胞類型的條件培養基。應該注意的是：在細胞分化研究中可能被用到的生
細－胞－毒－性－T－淋－巴－細－胞－的－誘－導－及－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 1 從 C TL 前體中誘導細胞毒性注意：反應細胞應根據抗原的種類選擇是否需要進行體內致敏。材 料反應細胞來源：未致敏的或者體內致敏的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 1 和 2致敏培養基刺激細胞來源：未修飾或半抗原修飾的小鼠脾臟細胞（見輔助方案 3)R P M I -1 0 完全培
BrdU－檢－測－丁－細－胞－和－B－細胞增殖
實驗步驟基本方案材 料實驗動物0.8m g / m l B r d U (Sigma) 水 溶 液（口 服用）或 4m g / m l B r d U P B S 溶 液（注射用)P B S ， p H 7. 40.15mo l / L 冰冷的 NaCl冰 冷 的 9 5 % 乙醇多聚甲醛固定液D
干細胞的鑒定實驗——流－式－細－胞－儀－檢－測－分－析－技－術
實驗步驟流 式 細 胞 儀 檢 測 分 析 技 術實 驗 材 料(1) 不同來源的干細胞，細胞數不少于 5xl0?5?個/管。(2) 熒光標記的抗體或抗體及熒光二抗。(3)PBS。實 驗 步 驟(1) 將 細 胞 用 PBS 充分洗滌后重懸于 5000 PBS 中，如果細胞收集和鑒定不能同天完成，可
T－細－胞－克－隆－的－建－立
實驗步驟基本方案 1 產生和維持同種反應性 T h 和 CTL 克隆盡管同種反應性 T 細胞可以從未刺激的脾細胞或淋巴結細胞中產生，但如果細胞在初次混合淋巴細胞（M L C ) 中第一次被同種抗原刺激，反應細胞的得率會更高。見以下介紹。材 料同種反應性小鼠脾臟 T 細胞V H B S S (可選使用
P－C－R－檢－測－人－T－細－胞－受－體－基－因－的－表－達
實驗步驟?基 本 方 案 PCR檢 測 人 T 細胞受體基因的表達展
英國增擴國家復合材料中心
近日，英國商業大臣凱布爾在布里斯托出席“打造復合材料的未來”活動時為英國國家復合材料中心增擴設施揭幕。 成立于2011年的英國國家復合材料中心是英國高值彈射中心的七項研究與技術設施之一，旨在為英國航空和汽車等產業開發復合高級材料。歷經三年發展，英國商業、創新與技能部通過英國創新署和高值彈射
淋－巴－細－胞－活－化－過－程－中－肌－醇－磷－脂－周－轉－的－分－析
實驗步驟基 本 方 案 1 通 過 道 威 克 斯（DOWEX) 離 子 交 換 層 析 分 析 [3H] 肌醇磷酸材料備 選 方 案 通 過 HPLC 方 法 分 析 [3H] 肌醇磷酸附加材料[3?H ] InsP 樣 本（見基本方案，步 驟 6) 和標準品除 氣 的 H PLC 級水2mol/
智能機器人離人還有多遠
一年一度的世界機器人大會又臨近了。2015年，被譽為機器人發展的元年。三年多來，世界各國的機器人產業飛速發展，尤其是與人工智能聯系密切的機器智能的發展，讓機器人產業離“人”越來越近。這讓人不禁遐想：當機器人遇上人工智能，將會迸發出什么樣的創新火花？機器智能，是指機器所具有的一種能力，它使機器能夠執行
分廣離廣峰太弱問題
a.離于源的溫度、電流過高(超過裂解溫度和電離電流)；排除方法：調整離子源溫度、電流。b. 化學電離氣壓過高或過低(對于化學電離源)；排除方法：調整化學電離氣壓。
巨－噬－細－胞－一－氧－化－氮－的－檢－測
實驗步驟基本方案材料展開
小－鼠－巨－噬－細－胞－的－表－型－檢－測
實驗步驟基 本 方 案 直 標 法 檢 測 小 鼠 巨 噬 細 胞 的 表 型材料Sorvall RT 6000B 離心機I . 準 備 4 只 12m m X 75m m 試管，將試管編號為 1?4。每 管 中 加 入 2 X IO7個細胞/ml細胞懸液 50ul。2.每管加入 3 mg/ml 阻
巨－噬－細－胞－吞－噬－功－能－和－殺－傷－功－能－的－檢－測
實驗步驟基本方案1 巨噬細胞吞噬功能的檢測材 料單核/巨噬細胞：如巨噬細胞株、小鼠腹腔巨噬細胞[單元6.1，需 用 1 0 %豚蛋白胨或4 % (m /V ) 硫基乙酸鹽肉湯]，或 人 P B M C (單 元 8.1)平衡鹽溶液（balanced salt solution， BSS)細菌（如單核
NK細胞的抑制和激活
NK細胞沒有主開關，它們的激活是激活性和抑制性受體相互作用以及免疫檢查點的結果(圖2)。因此，激活受體直接與轉化細胞上過表達的配體相互作用，使NK細胞具有識別和殺傷腫瘤細胞的能力，而不考慮其HLA-I的表達。為了防止NK細胞介導的攻擊，健康的宿主細胞表達高水平的MHC-1。事實上，在成熟的NK細胞中
農產品質量安全監測擴范圍增頻次
我國農產品質量安全監測合格率持續上升，并保持在一個較高的水平。今年上半年，全國259個大中城市蔬菜水果、畜產品和水產品的例行監測合格率分別達到96.2%、99.6%和96.0%，生鮮乳三聚氰胺抽檢繼續保持100%的合格率。農業部相關負責人日前接受記者采訪時表示，總體上看，我國農產品的質量是安全的
PCR－檢－測－細－胞－因－子－m－R－N－A－的表達
實驗步驟基 本 方 案 定 量 IL -2 mRNA表達水平材 料內參照：轉 錄 質 粒 載 體（含有臨床生物檢測標本相關的c D N A )胍鹽溶液50 U/ul RNasin5 X 反轉錄酶緩沖液0.5m g / m l olig (d T )16l m g /m l 乙酰化的B S A4d N
外－源－性－抗－原－向－T－細－胞－的－呈－遞
實驗步驟基本方案 一 種 抗 原 加 工 處 理 和 呈 遞 的 檢 測 體 系材 料具有增殖能力的（如轉化的 B 細胞）或非增殖的且與 T 雜交瘤細胞 M H C 匹配的抗原呈遞細胞（單 元 7.1)D M E M -1 0 完全培養基， 37°C對數生長期的 T 雜交瘤細胞抗原：溶解于水的蛋白質
巨－噬－細－胞－抗－腫－瘤－活－性－的－檢－測
實驗步驟基本方案 [111In] 釋放法檢測巨噬細胞對腫瘤細胞的殺傷作用材 料輔助方案 [111In ] 標記腫瘤靶細胞材 料展開
T和NK淋巴瘤免疫分型常用抗體及其意義解讀
下面兩張表綜合了20多個抗體及其臨床意義解讀，由流式中文網譯自Fiona E. Craig, Kenneth A. Foon 2008年發表于Blood的《Flow cytometric immunophenotyping for hematologic neoplasms》，并做了少許內容增補?。
疫－磁－珠－法－分－離－B－細胞亞群
實驗步驟基本方案材 料抗 凝 血（附 錄 3 G) ， 或 者 從 全 外 周 血 中（單 元 8 . 1 ) 或 組 織 中（單 元 7. 8 ) 分離的新 鮮 PBM C 或冷藏保存的 PBMC (附錄 3B)1 % FBS (熱滅活）溶于冷的 PBS (附 錄 1 ，無鈣離子）中免疫磁珠偶聯的
淺談生料細度和水泥細度的合理指標
從、高產、低耗的全面要求來看，在保證質量與經濟合理的前提下，一般生料細度和水泥細度都要有一個合理的控制指標。細度細的水泥加水后，水化反應快，凝結硬化快，早期強度高；但磨的過細時，水泥球磨機的產量驟減，粉磨電耗急增，研磨體和襯板消耗也顯著上升，同時對水泥 性能也產生不利影響。控制出磨水泥的細度，一是為