人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺激轉化成淋巴母細胞,隨后進入分裂期。這樣,經過短期培養后,用秋水仙素處理,就可獲得大量有絲分裂中期細胞,以用于制備染色體標本。實驗材料人外周血淋巴細胞試劑、試劑盒RPMI“1640” 培養基小牛血清肝素生理鹽水溶液(500單位 ml)5%NaHCO3秋水仙素(4μg ml)PHA雙抗(青霉素1萬單位 ml、鏈霉素1萬單位 ml)儀器、耗材超凈工作臺恒溫培養箱恒溫水浴鍋離心機20ml培養瓶注射器及針頭剪刀及鑷子燒杯及量筒實驗步驟1.培養基的分裝:在超凈工作臺內,用量筒取“1640”培養液40ml、血清10ml,用1ml注射器取肝素0.3m......閱讀全文
人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺激
人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理 外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺
人體外周血淋巴細胞培養及染色體制片
實驗概要學習和掌握人體微量血液體外培養制備染色體標本的方法。實驗原理人體的1ml 外周血中一般含有約1-3×106個小淋巴細胞，通常它們都處于間期的GO和G1期。在培養條件下給予藥物刺激時，經過53-72小時可在培養物中獲得大量的有絲分裂細胞，供染色體標本制備和分析之用。這種外周血培養方法是在1
人外周血淋巴細胞培養
在正常情況下，人外周血中是沒有分裂相的，只有在異常情況下才能發現。植物血球凝集素（PHA）是人類淋巴細胞有絲分裂的刺激劑，在PHA作用下，原處于Go期的淋巴細胞轉化為淋巴母細胞，進而進行有絲分裂。利用PHA這一特性，淋巴細胞經過含有HPA培養液培養，在體外便可獲得豐富的含有絲分裂的生長活躍的細胞群體
人外周血淋巴細胞培養實驗材料和操作過程
在正常情況下，人外周血中是沒有分裂相的，只有在異常情況下才能發現。植物血球凝集素（PHA）是人類淋巴細胞有絲分裂的刺激劑，在PHA作用下，原處于Go期的淋巴細胞轉化為淋巴母細胞，進而進行有絲分裂。利用PHA這一特性，淋巴細胞經過含有HPA培養液培養，在體外便可獲得豐富的含有絲分裂的生長活躍的細胞群體
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
盡管從其他細胞也可以制備染色體，但人類外周血白細胞是最容易同步化的，從而可以對其染色體進行高分辨分析。實驗材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ?ml) 的注射 器 獲取肝素化的全血 試
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒 完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）培養基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤 脫氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化鉀固定劑儀器、耗材 無菌錐形聚丙烯
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備
實驗概要本文介紹了人外周血染色體制備和體外培養細胞染色體標本制備的原理、操作流程及注意事項。實驗原理人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進行培養，經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種
骨髓細胞染色體標本的制備
一、原理骨髓染色體標本制備通常用于白血病患者，特別是慢性或急性粒細胞性白血病，因為骨髓反映粒系統細胞增生情況，這些病人不宜用外周血。即使是淋巴細胞性白血病，也不主張用外周血，因為加PHA刺激外周血培養，只能獲得正常淋巴細胞分裂相，并不能反映那些病理淋巴細胞的染色體改變。骨髓細胞屬不斷增殖的細胞，培養
內蒙古人外周血淋巴細胞染色體畸變分析能力快速發展
根據《放射工作人員健康要求及監護規范》（GBZ 98—2020）所有放射工作人員在上崗前、離崗時、應急/事故照射時，都必須進行人外周血淋巴細胞染色體畸變分析；從2016年開始全區放射體檢機構陸續來內蒙疾控中心職業衛生科進修學習人外周血淋巴細胞染色體的培養、收獲、制片、畸變分析。2023年內蒙疾控中心
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法 一、采集血樣，室溫保存。使用一次性的抗凝的真空抽血管進行采血。一般使用EDTA或肝素抗凝均可；血量一般為1ml；一般地，1ml外周血中含有大約1-2*10^6個單個核細胞（PBMC，即淋巴細胞核單核細胞）。 二、提取淋巴細胞。取1.5ml 無菌無酶的
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法一、采集血樣，室溫保存。使用一次性的抗凝的真空抽血管進行采血。一般使用EDTA或肝素抗凝均可；血量一般為1ml；一般地，1ml外周血中含有大約1-2*10^6個單個核細胞（PBMC，即淋巴細胞核單核細胞）。二、提取淋巴細胞。取1.5ml?無菌無酶的離心管，為管1，先加
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法 一、采集血樣，室溫保存。使用一次性的抗凝的真空抽血管進行采血。一般使用EDTA或肝素抗凝均可；血量一般為1ml；一般地，1ml外周血中含有大約1-2*10^6個單個核細胞（PBMC，即淋巴細胞核單核細胞）。 二、提取淋巴細胞。取1.5ml 無菌無酶的
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法一、采集血樣，室溫保存。使用一次性的抗凝的真空抽血管進行采血。一般使用EDTA或肝素抗凝均可；血量一般為1ml；一般地，1ml外周血中含有大約1-2*10^6個單個核細胞（PBMC，即淋巴細胞核單核細胞）。二、提取淋巴細胞。取1.5ml?無菌無酶的離心管，為管1，先加
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法
人外周血淋巴細胞RNA的提取方法 一、采集血樣，室溫保存。使用一次性的抗凝的真空抽血管進行采血。一般使用EDTA或肝素抗凝均可；血量一般為1ml；一般地，1ml外周血中含有大約1-2*10^6個單個核細胞（PBMC，即淋巴細胞核單核細胞）。 二、提取淋巴細胞。取1.5ml 無菌無酶的
果蠅唾腺染色體制片實驗
實驗方法原理 果蠅唾腺染色體是處于體細胞同源染色體的配對狀態，由于多次復制而不分開，因而形成具有1 000-4 000根染色體絲的巨大染色體,又稱為多線染色體.，本實驗利用剖離果蠅三齡幼蟲的唾腺,，壓制染色體玻片標本的方法，觀察多線染色體的特征。實驗材料 果蠅試劑、試劑盒 水醋酸洋紅儀器、耗材 解剖
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備1
一、 人外周血染色體制備實驗原理 人的外周血淋巴細胞培養方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進行培養，經72 h就可獲得大量的有絲分裂細胞。這種取材簡易、用血量少的培養方法已被廣泛采用。在培養液中加入植
人外周血染色體制備和體外培養細胞的染色體標本制備2
⑦ 再固定：加固定液8ml，混勻，固定10min。⑧ 離心：同上，吸去上清液。⑨ 制細胞懸液：根據細胞量多少，加入適量固定液，充分混勻，制成細胞懸液。⑩ 滴片：取出預先經冰水浸泡的載玻片，用吸管吸取混勻的細胞懸液在離冰片約30cm距離進行滴片，每片約滴2～3滴細胞懸液，使細胞較好分散。一般每一培養瓶
人外周血淋巴細胞分離液怎么用
分離方法說明：取新鮮抗凝血1ml，與生理鹽水1:1 混勻后，小心加于2ml細胞分離液之液面上；以400g（約1500轉/分，半徑15cm水平轉子）離心20分鐘，此時離心管中由上至下細胞分四層。第一層：為血漿層。第二層：為環狀乳白色淋巴細胞層。第三層：為透明分離液層。第四層：為紅細胞層。收集第二層細胞
人外周血B、T淋巴細胞的分離方法
目前常用Ficoll密度梯度離心法直接分離和純化外周血單個核細胞。方法: 1. 在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。 2. 取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPMI1640充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持清楚的界面。水平離心2000rpm×20分鐘。 3. 離心
染色體制片
實驗概要掌握染色體制片的基本程序。實驗步驟1. 取對數生長期細胞一個。2. 將培養基換成10mL DMEM(H) 10%FBS 0.1μg/mL秋水仙素的培養基，處理1~2小時。3. 將細胞培養液倒掉，馬上加入3~4mL 0.1%胰蛋白酶，并立即搖晃0.5~1min。當在顯微鏡下看到分裂相細胞脫壁后
人淋巴細胞的培養
人淋巴細胞的培養1.實驗目的（1）能獨立地進行用于細胞培養的個中器皿的清洗與消毒，掌握干熱滅菌法、濕熱滅菌法和濾過除菌法的操作，了解化學消毒法的使用方法。（2）熟練掌握RPMI?1640培養基的配制方法。（3）熟練掌握細胞傳代培養的操作方法。（4）觀察外培細胞在不同時期的形態變化及生長狀況。（5）掌
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
正常細胞常規核型的標本制備實驗
微量全血培養 人淋巴細胞染色體標本制備 腫瘤細胞的染色體標本制備 人體染色體常規核型的分析 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用微量全血培養人體外
染色體核型分析為什么用外周血淋巴細胞
血液中，只有白細胞（其中包括淋巴細胞）才有細胞核，紅細胞沒有細胞核，只能用白細胞而不是紅細胞。
染色體制片步驟
1、取對數生長期細胞一個T75或T25瓶。2、將培養基換成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培養基，處理1~2小時。3、將細胞培養液倒掉，馬上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶，并立即搖晃0.5~1min。當在顯微鏡下看到分裂相細胞脫壁后，馬上加入終止液終止消化，并將分
植物染色體制片
實驗概要掌握染色體制片方法，并自選材料進行染色體制片；學會染色體核型分析。主要試劑酒精、冰醋酸、甲醇、鹽酸、鐵礬、蘇木精（或洋紅、石炭酸品紅）、秋水仙堿（或對二氯苯飽和水溶液、8-羥基奎啉、富民隆乳劑）、二甲苯、中性樹膠、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要設備顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、吸水紙、紗布塊、
果蠅唾腺染色體制片實驗_觀察法
實驗方法原理果蠅唾腺染色體是處于體細胞同源染色體的配對狀態，由于多次復制而不分開，因而形成具有1 000-4 000根染色體絲的巨大染色體,又稱為多線染色體.，本實驗利用剖離果蠅三齡幼蟲的唾腺,，壓制染色體玻片標本的方法，觀察多線染色體的特征。實驗材料果蠅試劑、試劑盒水醋酸洋紅儀器、耗材解剖針雙筒解
人淋巴細胞染色體標本制作
實驗概要動物細胞染色體標本的制作方法，認識染色體形態實驗原理染色體是細胞遺傳的研究對象，分析認識眼行為對于認識遺傳物質的傳遞、復制、畸變等都有重要的意義。?獲得染色體的方法很多，目前對于哺乳動物比較常用的方法是外周血細胞培養法，就是將外周血接種在適當的培養基中進行培育，人類外周血細胞是終未分化細胞，