細胞遺傳學——原位引物啟動技術(PRINS)
· Hiro Hirai's Primed in Situ Synthesis (Schistosoma Genome Network)The PRINS (Primed in situ) technique uses a specific primer, dNTPs with Dig-11-dUTP and DNA polymerase to perform a primer extension reaction on a chromosome preparation. To date it has been used to localize the telomeric repeat element and the Sm alpha repeat element on S. mansoni chromos......閱讀全文
細胞遺傳學——原位引物啟動技術(PRINS)
·?????????Hiro Hirai's Primed in Situ Synthesis?(Schistosoma Genome Network)The PRINS (Primed in situ) technique uses a specific primer, dNTPs wit
熒光原位雜交(FISH)和用引物介導的原位標記(PRINS)...
熒光原位雜交(FISH)和用引物介導的原位標記(PRINS)操作規程設備??? 1、 醫用微波爐;???? 2、 水浴鍋;???? 3、 OLYMPUS BX51熒光顯微鏡;???? 4、 OLYMPUS DP11數字顯微照相機。FISH試劑??? (1)1×PBS:由10×PBS溶液稀釋而成,儲存
熒光原位雜交和用引物介導的原位標記(PRINS)操作規程
儀器設備????1、?醫用微波爐;?????2、?水浴鍋;?????3、?OLYMPUS BX51熒光顯微鏡;?????4、?OLYMPUS DP11數字顯微照相機。FISH試劑????(1)1×PBS:由10×PBS溶液稀釋而成,儲存于4℃;?????(2)20×SSC(pH7.0);?????(
熒光原位雜交和用引物介導的原位標記(PRINS)操作規程
儀器設備 ????1、?醫用微波爐; ?????2、?水浴鍋; ?????3、?OLYMPUS BX51熒光顯微鏡; ?????4、?OLYMPUS DP11數字顯微照相機。 FISH試劑 ????(1)1×PBS:由10×PBS溶液稀釋而成,儲存于4℃; ?????(2)20×SSC(pH7.0
FISH和PRINS技術
一、熒光原位雜交(FISH) 是一種簡單、敏感、而容易操作的方法,結果迅速,并能在同一標本上檢測多個不同的基因,可應用于細胞培養、染色體分裂像、冰凍切片和石蠟切片。 FISH技術是利用特異的DNA探針,標記了生物素,地高辛、或熒光素,對檢測細胞進行DNA-DNA原位雜交,并用熒光法顯示。 FISH
細胞遺傳學——原位雜交(ISH)
In Situ Hybridization· ????????In Situ Hybridization?(jsmith1@po-box.mcgill.ca)In situ?hybridization, as the name suggests, is a method of localizing,
FISH和PRINS技術比較
一、熒光原位雜交(FISH)是一種簡單、敏感、而容易操作的方法,結果迅速,并能在同一標本上檢測多個不同的基因,可應用于細胞培養、染色體分裂像、冰凍切片和石蠟切片。FISH技術是利用特異的DNA探針,標記了生物素,地高辛、或熒光素,對檢測細胞進行DNA-DNA原位雜交,并用熒光法顯示。FISH實驗步驟
引物介導的原位標記技術實驗
實驗材料 中期染色體分裂相抗地高辛抗體試劑、試劑盒 三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X SSCTween-20乙醇脫脂奶粉(粉末)10 X dNTP反應終止液洗脫液封閉液儀器、耗材 蓋玻片染色缸恒溫裝置實驗步驟 一、標準一步反應PRINS 技術的操作規程有兩套,一套
引物介導的原位標記技術實驗
引物介導的原位標記技術(primed in situ labeling,PRINS) 是一種對細胞及組織的特異 DNA 序列染色的雜交技術,它能夠得到和 FISH 技術相同類型的結果。實驗材料中期染色體分裂相抗地高辛抗體試劑、試劑盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X
引物介導的原位標記技術實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 中期染色體分裂相 抗地高辛抗體 試劑、試劑盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚
熒光原位雜交染色體分析技術
FISH是上世紀80年代中期發展起來并直到現在仍在不斷改進、完善的技術。其基本過程是:首先制成染色體標本,和與所感興趣的目的基因(或染色體片段)互補的探針,并在探針上標記熒光色素,當探針與染色體標本上的靶序列雜交后,利用熒光顯微鏡觀察熒光信號從而獲得染色體核型的信息。此技術具有靈敏度強、背景低、
熒光原位雜交染色體分析技術
FISH是上世紀80年代中期發展起來并直到現在仍在不斷改進、完善的技術。其基本過程是:首先制成染色體標本,和與所感興趣的目的基因(或染色體片段)互補的探針,并在探針上標記熒光色素,當探針與染色體標本上的靶序列雜交后,利用熒光顯微鏡觀察熒光信號從而獲得染色體核型的信息。此技術具有靈敏度強、背景低、
分子遺傳學詞匯引物
中文名稱:引物外文名稱:primer類????型:RNA引物、DNA引物定義:引物,是指在核苷酸聚合作用起始時,刺激合成的,一種具有特定核苷酸序列的大分子,與反應物以氫鍵形式連接,這樣的分子稱為引物。引物通常是人工合成的兩段寡核苷酸序列,一個引物與靶區域一端的一條DNA模板鏈互補,另一個引物與靶區域
PRINS步驟
?? 1、常規脫蠟浸入0.01mol/LPBS;????2、用0.2mol/L鹽酸處理5min;????3、蛋白酶K(25μg/m1)消化37℃ 15min;????4、分別用80%,95%和100%酒精脫水,室溫干片;????5、加PCR混合液25μL(10mmol/L Tris-HCl,50mm
分子遺傳學詞匯引物RNA
中文名稱:引物RNA外文名稱:primer定義:引物RNA是一小段單鏈DNA或RNA,作為DNA復制的起始點,存在于自然中生物的DNA復制。
分子遺傳學詞匯隨機引物
中文名稱:隨機引物外文名稱:random primer定義:隨機引物是指當特定mRNA由于含有使逆轉錄酶終止的序列而難于拷貝其全長序列時,可采用隨機六聚體這一非特異的引物來拷貝全長mRNA。
分子遺傳學詞匯引物步查
中文名稱:引物步查英文名稱:primer walking定 義:一種DNA連續測序法。將待測DNA片段克隆進測序載體,進行測序電泳。當完成第一輪測定時,將引物與剛完成測序的DNA序列末端結合,進行第二輪測序電泳,如此重復直至完成。應用學科:遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
常用的分子生物學基本技術(二)
PCR-SSCP法 PCR-SSCP法是在非這性聚丙烯酰胺凝膠上,短的單鏈DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同構象,一個堿基的改變將影響其構象而導致其在凝膠上的移動速度改變。其基本原理為單鏈DNA在中性條件下會形成二級結構,這種二級結構依賴于其堿基組成,即使一個堿基的不同,也會形成不同的二
原位雜交組織化學實驗技術6
二、快速原位雜交細胞化學技術 原位雜交免疫細胞化學技術存在的難點之一是實驗手續繁瑣,實驗周期長。國外Liesi等(1986)和國內學者何彬等應用光敏生物素-鏈親合素(Biotin-streptavidin)膠體金系統進行原位雜交,得到了快速滿意的結果,全部實驗可在數小時內完成。 作用把含某種多肽
常用的分子生物學基本技術(四)
轉基因動物的建立和應用轉基因動物是以實驗方法交源基因導入宿主受精卵或早期胚胎細胞染色體基因組內,使其穩定整合和遺傳給后代動物。它主要采用顯微注射法、逆轉錄病毒載體感染法、精子載體法、電轉移法與胚胎干細胞法。轉基因動物模型的建立,推動了腫瘤在分子水平上的研究,它使人們認識到激活的原癌基因的異常表達及功
PCR技術要素引物
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
原位分離技術
近幾年來,原位分離技術(in situ product removal,簡稱ISPR)在乳酸發酵中的應用引起了世界范圍內的廣泛關注,溶劑萃取發酵法(油酸、叔胺等為萃取劑)、吸附法(離子交換樹脂、活性炭、高分子樹脂等)、膜法發酵(滲析、電滲析、中空纖維超濾膜、反滲透膜等)等,這些方法的使用都是基于在發
原位PCR技術
除了經典的原位雜交外。原位雜交可與其他組織化學技術相結合,或與其他分子生物學技術相結合,使其應用范圍擴大,成為更有應用價值的技術。PCR技術是根據生物體內DNA復制的特點而建立的在體外經酶促反應將特定DNA序列進行高效和快速擴增的技術,它可將單一拷貝或低拷貝的待測核酸以指數形式擴增而達到用常規方法可
多彩色熒光原位雜交技術介紹
多彩色熒光原位雜交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FIS
多彩色熒光原位雜交技術的特點、分類和應用
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
多彩色熒光原位雜交技術介紹
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
多彩色熒光原位雜交的技術特點
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
多彩色熒光原位雜交技術的原理與應用
mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發
分子遺傳學詞匯啟動子
中文名稱:啟動子外文名稱:Promoter定義:啟動子是RNA 聚合酶識別、結合和開始轉錄的一段DNA 序列,它含有RNA 聚合酶特異性結合和轉錄起始所需的保守序列,多數位于結構基因轉錄起始點的上游,啟動子本身不被轉錄。但有一些啟動子(如tRNA啟動子)位于轉錄起始點的下游,這些DNA序列可以被轉錄
原位雜交技術
導語我們常說,科學家也是藝術家,在明確真理探索科學的道路上,往往會創造出很多極具美感的藝術作品。所以今天小編為大家介紹的就是能做出美美圖的新技能。先欣賞一下美美的實驗結果圖~---Olson, B. D. and Downes, G. B.?---in situ Hybridization of w