蛋白質定量檢測方法——BCA法
BCA(Bicinchoninc acid procedure,4,4’-二羧-2,2’-二喹啉)法與Lowry法相似,主要差別在堿性溶液中,蛋白質使Cu2+轉變Cu+后,進一步以BCA 取代Folin試劑與Cu+結合產生深紫色,在波長562 nm有強的吸收。 它的優點在于堿性溶液中BCA 比Folin試劑穩定,因此BCA與堿性銅離子溶液結合的呈色反應只需一步驟即完成。靈敏度Lowry法相似。 本方法對于陰離子、非離子性及二性離子的清潔劑和尿素較具容忍度,較不受干擾,但會受還原糖 及EDTA的干擾。......閱讀全文
蛋白質定量檢測方法——BCA法
BCA(Bicinchoninc acid procedure,4,4’-二羧-2,2’-二喹啉)法與Lowry法相似,主要差別在堿性溶液中,蛋白質使Cu2+轉變Cu+后,進一步以BCA 取代Folin試劑與Cu+結合產生深紫色,在波長562 nm有強的吸收。 它的優點在于堿性溶液中B
BCA蛋白定量法的原理
原理簡介 BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測方法之一BCA法基礎上改進而成。眾所周知,二價銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質還原成一價銅離子(biuret reaction),一價
BCA蛋白定量法的原理
Bicinchoninic acid (BCA )世界用蛋白濃度檢驗BCA基礎改進其原理與Lowery蛋白定量相似即堿性環境蛋白質與Cu 2+ 絡合并Cu 2+ 原Cu + 兩BCA與Cu + 螯合形穩定紫藍色復合物
【實驗技巧】BCA-法蛋白定量
BCA 蛋白定量法是實驗室常用的蛋白質定量方法。Invent 所有蛋白提取試劑盒提取的蛋白均可使用 BCA 法進行定量!那么今天小編就手把手的教大家該如何用 BCA 來定量!BCA 法原理堿性條件下,蛋白將 Cu2+還原為 Cu+,Cu+與 BCA 試劑相互作用形成紫色的絡合物,該水溶性的復合物在
原位微量BCA蛋白定量法
簡述:傳統標準的BCA蛋白定量分析方法常規均使用試管或者微孔板進行檢測,通過對傳統方法進行改進,可使用BioTek公司的Take3TM 超微量多體積檢測板進行原位微量BCA法蛋白定量分析。待測蛋白樣品和BCA工作緩沖液按照順序直接加在Take3TM板的微量定量孔處、溫浴,使用EpochTM
蛋白定量BCA法-VS-Bradford法實驗分析
精-確的蛋白質定量是蛋白質相關實驗所必需的,這些實驗涉及分子生物學,細胞生物學,生物化學,發育生物學和神經科學的研究課題。依托不同的科學原理,目前已經發展出多種不同的蛋白測定方法,科研工作者廣泛使用的方法比如紫外吸收法(UV),雙縮脲法,考馬斯亮藍法(Bradford)、Folin-酚試劑法(Low
BCA蛋白定量法的原理是什么
Bicinchoninic acid (BCA )世界用蛋白濃度檢驗BCA基礎改進其原理與Lowery蛋白定量相似即堿性環境蛋白質與Cu 2+ 絡合并Cu 2+ 原Cu + 兩BCA與Cu + 螯合形穩定紫藍色復合物
bca蛋白定量標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z=(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。
bca蛋白定量標準曲線怎么畫
首先將數據整理好,輸入excel,并選舉完成的數據區,并點擊圖表向導:點擊圖表向導后會運行圖表向導,現在圖表類型中選xy散點圖,冰選了圖表類型的“散點圖”;點擊確定。完成了散點圖,現在需要根據數據進行回歸分析,計算回歸方程,繪制出標準曲線。其實這很簡單,先點擊圖上的標準值點,然后按右鍵,點擊添加趨勢
bca蛋白定量標準曲線怎么畫
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如何用酶標儀進行bca蛋白定量
BCA蛋白定量和 Bradford法蛋白定量的區別:1、Bradford法測得的主要是堿性氨基酸和芳香族氨基酸,BCA則沒有選擇性2、BCA法蛋白濃度定量是二價銅離子在堿性的條件下,可以被蛋白質還原成一價銅離子(biuret reaction),一價銅離子和獨特的BCA Solution A(含有B
bca蛋白定量標準曲線怎么畫
首先將數據整理好,輸入excel,并選舉完成的數據區,并點擊圖表向導:點擊圖表向導后會運行圖表向導,現在圖表類型中選xy散點圖,冰選了圖表類型的“散點圖”;點擊確定。完成了散點圖,現在需要根據數據進行回歸分析,計算回歸方程,繪制出標準曲線。其實這很簡單,先點擊圖上的標準值點,然后按右鍵,點擊添加趨勢
bca法標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線 然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。實驗試劑① 試劑A,1
bca法標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線 然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。實驗試劑① 試劑A,1
bca法標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線 然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。實驗試劑① 試劑A,1
bca法標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線 然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。實驗試劑① 試劑A,1
BCA法測定蛋白質濃度
【目的】掌握BCA法測定蛋白質濃度的原理。【原理】BCA(bicinchonininc acid)與二價銅離子的硫酸銅等其他 試劑組成的 試劑 ,混合一起即成為蘋果綠,即BCA工作試劑。在堿性條件下,BCA與蛋白質結合時,蛋白質將Cu2+ 還原為Cu+ ,一個Cu+ 螯合二個BCA分子,工作試劑由原
蛋白質的直接定量(UV法)
蛋白質的直接定量(UV法)??? 分光光度計原理說明的這種方法是在280nm波長,直接測試蛋白。選擇Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除
蛋白質定量實驗_胺衍生法
試劑、試劑盒OPA 儲存液實驗步驟1.于分析前至少 30 min 將 15uL 2-巰基乙醇加人到 5 mL OPA 儲存液中, 這一試劑可穩定維持一天。所有熒光樣品和相關反應在所有時間內都需要避光。2.蛋白質標準品 (0.2~10 ug/mL) 和未知濃度的待測樣品在分析前需要調節 pH 至 8.
BCA法測定蛋白質濃度原理
BCA法測定蛋白質濃度原理:BCA與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的試劑混合一起即成為蘋果綠,即 BCA 工作試劑。在堿性條件下,BCA 與蛋白質結合時,蛋白質將 Cu2+ 還原為 Cu+,工作試劑由原來的蘋果綠色變為紫色復合物。562 nm 下其光吸收強度與蛋白質濃度成正比。BCA 蛋白濃度測定
蛋白質定量/蛋白質含量的測定(LOWRY法)
實驗概要運用LOWRY法測定蛋白質的含量。實驗原理Lowry法是雙縮脲法和福林酚法的結合與發展,其原理是:蛋白質溶液用堿性銅溶液處理,形成銅-蛋白質的絡合鹽,再加入酚試劑后,除使肽鏈中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等顯色外,還使雙縮脲法中肽鍵、堿性銅的顯色效果更強烈。因此,Lowry法的顯色效果比單獨使用
蛋白質定量檢測方法——酚試劑法
取6支試管分別標號,前5支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,不加標準蛋白溶液,在室溫下放置30分鐘,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,于650nm波長處測定各管中溶液的吸光度值。優點:靈敏度高,對水溶性蛋白質含量的測定很有效。缺點:①費時,要精確控制操作時間;
蛋白質定量檢測方法——紫外吸收法
大多數蛋白質在280nm波長處有特征的最大吸收,這是由于蛋白質中有酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸存在,可用于測定0.1~0.5mg/mL含量的蛋白質溶液。取9支試管分別標號,前8支試管分別加入不同濃度的標準蛋白溶液,1號試管不加標準蛋白溶液,最后一支試管加待測蛋白質溶液,而不加標準蛋白溶液,每支試管液體總
蛋白質的直接定量(UV法)簡述
這種方法是在280 nm波長,直接測試蛋白。選擇 Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除 320 nm的“背景”信息,設定此功能“開”。與
bca法測蛋白濃度稀釋倍數
1、根據樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫24小時內穩定。2、完全溶解蛋白標準品,取10微升稀釋至100微升 ,使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用0.9%
bca法測蛋白濃度稀釋倍數
1、根據樣品數量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B(50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻。BCA工作液室溫24小時內穩定。2、完全溶解蛋白標準品,取10微升稀釋至100微升 ,使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用0.9%
蛋白質濃度分析實驗——BCA分析(PIERCE)
實驗材料標準品儀器、耗材試管實驗步驟1. 按標準 Bradford 法制備標準品。2. 取 50 份試劑 A 與 1 份試劑 B 混勻(在室溫下至少穩定一天)。3. 分別吸取 100 μl 樣品和標準品置各自試管。每個試管加 2 ml 試劑,混勻,在 37℃ 保溫 30 分鐘。4. 樣品冷至室溫,在
蛋白質定量檢測方法——雙縮脲法
雙縮脲法是一個用于鑒定蛋白質的分析方法。雙縮脲試劑是一個堿性的含銅試液,呈藍色,由1%氫氧化鉀、幾滴1%硫酸銅和酒石酸鉀鈉配制。當底物中含有肽鍵時(多肽),試液中的銅與多肽配位,配合物呈紫色。可通過比色法分析濃度,在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/ml。鑒定反應蛋
UV法蛋白質定量分析簡述
這種方法是在280 nm波長,直接測試蛋白。選擇 Warburg公式,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法,將吸光值轉換為樣品濃度。 蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存在一些雜質,一般要消除 320 nm的“背景”信息,設定此功能“開”
蛋白質的定量測定——福林酚法(Folin—酚試劑法)
實驗原理 Folin—酚試劑法最早是由Lowry確定的測定蛋白質濃度的基本方法。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這個方法的優點是靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多,缺點是費時較