半干轉印系統操作使用說明
一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上，其運用了電泳檢測的方法，使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上，由于硝酸纖維素膜的可支撐性，使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做雜交等后續檢測的實驗，是一種普通，簡單，快速的轉印方法。該系統無需緩沖液池或凝膠盒，可達到快速、有效、經濟的轉印目的。平板電極提供一致可靠的轉移，可轉移多塊凝膠，安裝快速方便。二.用途：主要應用于分子生物學實驗，定量和定性分析基因表達，和特定蛋白質表達，用于相關的Northern雜交、Southern雜交和Western雜交分析方法，可在10-35分鐘內完成。半干轉印槽和 PowerPac通用電泳儀三.使用：準備緩沖液、凝膠1．根據凝膠平衡、三明治裝置、電泳過程等所需要的緩沖液用量準備足夠的緩沖液。 2．使用去離子水浸潤凝膠......閱讀全文
半干轉印系統操作使用說明
一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上，其運用了電泳檢測的方法，使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上，由于硝酸纖維素膜的可支撐性，使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做
半干電轉印法
先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上（Kyhse-Andersen1984）。平板可以是石墨（這種平板較便宜，但使用100次后必須更換）制成的，也可以是鉑金的（這種子板價格較貴，但使用壽命較長）。通過電洗
半干電轉印法
實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜，然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間，采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜，但使用100次后必須更換)制成的，也可以是鉑金的(這種子板價格較貴，但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至
半干轉印與濕式轉印的區別－|－WEALTEC－威泰克
剛接觸 Western Blot 不久的用戶，在選購 WB 設備時，經常會遇到儀器選型的問題：為什么常見的蛋白質電泳的轉膜有兩種方式可以選擇，干式和濕式，那么哪種方法更適合我們呢？這里我們結合美國 WEALTEC 公司的 E-Blotter 濕轉槽和 YRDIMES 快速半干轉印槽舉例說明。
免疫印跡與免疫檢測實驗——半干轉移系統轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材半干燥轉移裝置濾紙實驗步驟1. ?制備樣品，并在小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠上分離蛋白質。?2. ?準備轉印膜3. ?拆卸凝膠夾層，除去積層膠。4. ?組裝轉印夾層：Mylar聚酯薄膜屏蔽物3張以轉移緩沖液飽和的濾紙已平衡的轉印膜凝膠3張以轉移緩沖液飽
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀，半干轉（半干轉印電泳槽）一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳Mini P-4小型垂直電泳槽?
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀，半干轉（半干轉印電泳槽） 一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳 Mini P-4小型垂直電泳槽
半干轉是否要去膜？
半干轉是否要去膜、濾紙、膠同樣大小，因為膠大小不一定規則，膜和濾紙會大一點，那樣會不會短路？可以相等，但是如果紙、膜比凝膠大就比較容易形成短路了，上下兩層濾紙也不能因過大而相互接觸，這樣會短路，電流不會通過膠和濾紙。轉移前和轉移過程中看看電壓就行，正常的半干轉是慢慢變高的，最后結束時一般是開始的1.
半干轉膜儀如何使用
以WEALTEC的YRDIMES半干轉膜儀為例，首先確認是轉蛋白質還是核酸。蛋白質可參考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn緩沖液系統配置緩沖液，電泳后將凝膠浸入緩沖液平衡5分鐘，將轉印膜和濾紙裁切并浸入緩沖液，合上上蓋，按說明書墊上BP-C紙，普通轉印1或
做western轉膜，用濕轉電泳，還是半干轉電泳好
半干轉要用專門的半干轉膜儀，而濕轉用電泳儀配附件即可；半干轉所需時間較短，但控制不好，中間發熱比較大容易把膜和膠烘壞；而濕轉耗時較長，尤其對大分子量的蛋白轉膜效果較好。相對來講，還是濕法轉膜的實驗室多一些。
western－blot－半干轉時濾紙上出現藍色
western blot 半干轉時濾紙上出現藍色marker一般是代表轉過了western blot 半干轉一般是電壓10V轉膜30分鐘就可以了，時間長了就轉到濾紙上去了所以western blot 半干轉時濾紙上出現藍色marker一般是代表轉過了
Southern－轉印分析
在膠體中的DNA 可利用毛細現象的作用將DNA 牽引轉印至覆蓋在膠片上的濾膜，經烘烤或UV 照射后，可使DNA 固定在膜上，以進行探針的雜合（hybridization） 反應。儀器用具：玻璃缸；玻璃板或吸水海綿；Crosslinker （Stratalinker 1800, Stratagene）
浸入式電轉印
實驗概要采用浸入法將蛋白質從凝膠轉移至硝酸纖維素膜是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維素膜，然后再將這種夾層組合浸入盛有大量緩沖液的轉印槽內，使電流從轉印槽的一側通向另一側。通過電洗脫的方法可將蛋白質從凝膠中轉印至濾膜上，如同在凝膠中遷移，只不過移動方向與膠平面垂直。若操作仔細，這是一種可將許多蛋白質轉印至
Southern－轉印分析方法步驟
在膠體中的DNA 可利用毛細現象的作用將DNA 牽引轉印至覆蓋在膠片上的濾膜，經烘烤或UV 照射后，可使DNA 固定在膜上，以進行探針的雜合（hybridization） 反應。儀器用具：玻璃缸；玻璃板或吸水海綿；Crosslinker （Stratalinker 1800, Stratagene）
Western－blot轉印的優化
從SDS凝膠中進行Western蛋白轉印的優化需要對一系列參數進行考慮。目的是轉印所有凝膠上的蛋白并將其定量地轉移到轉印膜上。進行高效轉印需要一定程度的優化，尤其是對于大分子量和小分子量蛋白。轉印后，凝膠上應不殘留或殘留很少的蛋白。可以在轉印后進行染色進行檢測。轉移出凝膠的蛋白應該僅在接觸凝膠的膜的
蛋白質轉印法
蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose） 上，先經尿素洗去SDS，并使蛋白質回復原態抗原性，可使用抗體進行免疫染色 （Towbin et al, 1979）。儀器用具：電泳轉印槽 （Hoefer Transphor TE 52）：轉印
Southern－印跡實驗——電轉印法
實驗方法原理因為聚丙烯酰胺凝膠的扎徑太小，DNA不能在其橫截面上有效地擴散，毛細管轉移法不適用DNA從聚丙烯酰胺凝膠的轉移。因此，聚丙烯酰胺凝晈必須在低離子強度的緩沖液中用電轉移法進行印跡。實驗材料DNA試劑、試劑盒TBE儀器、耗材Scotch-Brite墊Whatman濾紙實驗步驟1. ?在非變性
濕式轉印槽使用教程
濕式轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為電泳系統的一個組件，小型轉印槽能容納2個凝膠三明治轉印夾， 用于在電泳槽內電轉印兩塊小凝膠。
轉印槽使用方法步驟
伯樂bio-rad轉印槽可快速、高質量地轉印小型凝膠。作為Mini-PROTEAN 3 電泳系統的一個組件，伯樂bio-rad轉印槽能容納2 個凝膠支架轉印夾，用于在Mini-PROTEAN 3 電泳槽內電轉印兩種小凝膠（Mini-PROTEAN 3 凝膠和ReadyGel 預制膠）。伯樂b
濕轉和干轉，哪個方法更好？
對于一個完美的westernblot實驗，蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離，蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上，然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。對于轉印來說，使用濕轉的方法是比較好的，因為凝膠和膜都能夠完全浸沒在轉印buffer中，在半干轉的條件下，轉印是在兩個電極板之間發生，這種類型
濕轉和干轉，哪個方法更好
對于一個完美的westernblot實驗，蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離，蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上，然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。 對于轉印來說，使用濕轉的方法是比較好的，因為凝膠和膜都能夠完全浸沒在轉印buffer中，在半干轉的條件下，轉印是在兩個電極板之間發
電泳和Western轉印的常見問題
表1?Common problems for electrophoresis and western bloting問 題可能原因建議解決方法推薦電壓條件下電泳時間過長。電泳緩沖液過稀。配制新鮮緩沖液，使用1X稀釋液。推薦電壓條件下電流過高，熱量過大。電泳緩沖液過稀。配制新鮮緩沖液，使用1X稀釋液。
一文讀懂蛋白質轉印原理－大分子量蛋白轉印有哪些技巧
通過凝膠電泳分離蛋白后，蛋白質被轉移到固體膜載體上進行后續步驟。有效的轉印依賴于膜的選擇、所使用的轉印設備的類型以及轉印緩沖液的組成。 轉印條件 蛋白的有效轉印依賴于蛋白質從凝膠中遷移出來，也依賴于蛋白在膜上的滯留。像凝膠電泳一樣，轉印步驟將帶負電荷的蛋白轉印到帶正電荷的電極上。轉印效率受所
Western－轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好
關鍵看效果怎么細分，干轉，速度快，效率稍低，濕轉，速度比較慢，轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主，干轉就挺好的，效率非常高，幾分鐘就做完了。分子量特別大，又沒有其他人的方案做參考，可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話，真是等到花兒也謝了。至于說效果，不是
Western－轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好？
關鍵看效果怎么細分，干轉，速度快，效率稍低，濕轉，速度比較慢，轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主，干轉就挺好的，效率非常高，幾分鐘就做完了。分子量特別大，又沒有其他人的方案做參考，可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話，真是等到花兒也謝了。至于說效果，不是
新技術助蛋白質轉印法提速
在發明蛋白質印跡法（Western Blot）出現了30多年之后，這項技術仍然是獲取特定蛋白可靠鑒定的關鍵。許多近期涌現的產品利用各種方法來提高蛋白質印跡實驗的可重復性、敏感性、定量性以及速度。 有三個人都被認為發展了蛋白質的免疫印跡方法，但其中只有一人才算得上是“Western B
蛋白質轉印法檢定蛋白質
蛋白質轉印法檢定蛋白質?????蛋白質經SDS-PAGE后，膠片浸入轉印緩沖液，蛋白質可被轉印到硝化纖維紙（nitrocellulose）?上，先經?素洗去SDS，并使蛋白質回?原態抗原性，可使用抗體進?免疫染色?（Towbin?et?al,?1979）。儀器用具：電泳轉印槽?（Hoefer?Tra
四步輕松解決轉印帶來的麻煩
在之前的一篇文章中，我談到了彎曲條帶，這是一個常見由于凝膠鑄造和跑膠所引起的問題。 然而，雖然轉印似乎是一個更簡單的過程，但也很容易出錯。 下面我將介紹幾個有用的建議，讓您無時無刻地檢測到您的蛋白。沒有條帶，意味著什么？不幸的是，第一次你可能會認為你的轉印沒有起作用，當你在在暗室里成像時，沒有條帶（
western－blot轉膜是怎么做的
蛋白免疫印跡( Western Blot) 是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是電轉印法，分為濕式轉印與半干轉印。濕式轉印是將膠塊垂直方向夾在濕式轉印槽內進行電轉印。以E-Blotter濕轉槽為例，一般使用垂直電泳槽的緩沖液槽體，將內部垂直電
Northern－Blotting轉印實驗（毛細管轉移法）
要進行Northern雜合反應前，必須先將RNA自洋菜膠體轉移至硝化纖維紙（nitrocellulose membrane） 或尼龍膜 （nylon membrane） 上，這一個過程稱為轉印 （blotting）。 一般常用的方法包括毛細管轉移法 （capillary transfer）、