半干轉是否要去膜?
半干轉是否要去膜、濾紙、膠同樣大小,因為膠大小不一定規則,膜和濾紙會大一點,那樣會不會短路?可以相等,但是如果紙、膜比凝膠大就比較容易形成短路了,上下兩層濾紙也不能因過大而相互接觸,這樣會短路,電流不會通過膠和濾紙。轉移前和轉移過程中看看電壓就行,正常的半干轉是慢慢變高的,最后結束時一般是開始的1.5-3倍都是正常的。......閱讀全文
半干轉是否要去膜?
半干轉是否要去膜、濾紙、膠同樣大小,因為膠大小不一定規則,膜和濾紙會大一點,那樣會不會短路?可以相等,但是如果紙、膜比凝膠大就比較容易形成短路了,上下兩層濾紙也不能因過大而相互接觸,這樣會短路,電流不會通過膠和濾紙。轉移前和轉移過程中看看電壓就行,正常的半干轉是慢慢變高的,最后結束時一般是開始的1.
半干電轉印法
先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜,然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間,采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上(Kyhse-Andersen1984)。平板可以是石墨(這種平板較便宜,但使用100次后必須更換)制成的,也可以是鉑金的(這種子板價格較貴,但使用壽命較長)。通過電洗
半干電轉印法
實驗概要本方法是先將凝膠緊貼于一塊硝酸纖維濾膜,然后再將這種夾層組合直接置于兩個乎板電極之間,采用這種半干方法可將蛋白質從凝膠中轉印至硝酸纖維素膜上。平板可以是石墨(這種平板較便宜,但使用100次后必須更換)制成的,也可以是鉑金的(這種子板價格較貴,但使用壽命較長)。通過電洗脫將蛋白質從凝膠中轉印至
半干轉膜儀如何使用
以WEALTEC的YRDIMES半干轉膜儀為例,首先確認是轉蛋白質還是核酸。蛋白質可參考Bjerrum and Schafer-Nielsen或Towbin或Dunn緩沖液系統配置緩沖液,電泳后將凝膠浸入緩沖液平衡5分鐘,將轉印膜和濾紙裁切并浸入緩沖液,合上上蓋,按說明書墊上BP-C紙,普通轉印1或
做western轉膜,用濕轉電泳,還是半干轉電泳好
半干轉要用專門的半干轉膜儀,而濕轉用電泳儀配附件即可;半干轉所需時間較短,但控制不好,中間發熱比較大容易把膜和膠烘壞;而濕轉耗時較長,尤其對大分子量的蛋白轉膜效果較好。相對來講,還是濕法轉膜的實驗室多一些。
半干轉印系統操作使用說明
一.簡介美國Bio-Rad公司的Trans-Blot SD型半干轉印系統是在電場的作用下把聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠上的蛋白或核酸條帶轉移到硝酸纖維素膜上,其運用了電泳檢測的方法,使得蛋白或核酸從凝膠中進行分離轉移到硝酸纖維素膜上,由于硝酸纖維素膜的可支撐性,使得蛋白或核酸條帶能夠在電泳后繼續做
western-blot-半干轉時濾紙上出現藍色
western blot 半干轉時濾紙上出現藍色marker一般是代表轉過了western blot 半干轉一般是電壓10V轉膜30分鐘就可以了,時間長了就轉到濾紙上去了所以western blot 半干轉時濾紙上出現藍色marker一般是代表轉過了
半干轉印與濕式轉印的區別-|-WEALTEC-威泰克
剛接觸 Western Blot 不久的用戶,在選購 WB 設備時,經常會遇到儀器選型的問題:為什么常見的蛋白質電泳的轉膜有兩種方式可以選擇,干式和濕式,那么哪種方法更適合我們呢?這里我們結合美國 WEALTEC 公司的 E-Blotter 濕轉槽和 YRDIMES 快速半干轉印槽舉例說明。
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀,半干轉(半干轉印電泳槽) 一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳 Mini P-4小型垂直電泳槽
電泳儀電泳槽半干轉印電泳槽
電泳儀,半干轉(半干轉印電泳槽)一、兩塊膠電泳和四塊膠電泳Mini P-4小型垂直電泳槽?
濕轉和干轉,哪個方法更好
對于一個完美的westernblot實驗,蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離,蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上,然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。 對于轉印來說,使用濕轉的方法是比較好的,因為凝膠和膜都能夠完全浸沒在轉印buffer中,在半干轉的條件下,轉印是在兩個電極板之間發
濕轉和干轉,哪個方法更好?
對于一個完美的westernblot實驗,蛋白在聚丙烯凝膠中根據天然分子量進行分離,蛋白被很好的從凝膠上轉移到固相支持物上,然后通過特異性的抗體進行免疫檢測。對于轉印來說,使用濕轉的方法是比較好的,因為凝膠和膜都能夠完全浸沒在轉印buffer中,在半干轉的條件下,轉印是在兩個電極板之間發生,這種類型
免疫印跡與免疫檢測實驗——半干轉移系統轉印蛋白質
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒轉移緩沖液儀器、耗材半干燥轉移裝置濾紙實驗步驟1. ?制備樣品,并在小型或標準尺寸的單向或雙向凝膠上分離蛋白質。?2. ?準備轉印膜3. ?拆卸凝膠夾層,除去積層膠。4. ?組裝轉印夾層:Mylar聚酯薄膜屏蔽物3張以轉移緩沖液飽和的濾紙已平衡的轉印膜凝膠3張以轉移緩沖液飽
Western-轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好?
關鍵看效果怎么細分,干轉,速度快,效率稍低,濕轉,速度比較慢,轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主,干轉就挺好的,效率非常高,幾分鐘就做完了。分子量特別大,又沒有其他人的方案做參考,可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話,真是等到花兒也謝了。至于說效果,不是
Western-轉膜時用干轉還是濕轉效果比較好
關鍵看效果怎么細分,干轉,速度快,效率稍低,濕轉,速度比較慢,轉移效率高。但是最主要看蛋白的分子量大小。如果普通分子量為主,干轉就挺好的,效率非常高,幾分鐘就做完了。分子量特別大,又沒有其他人的方案做參考,可以先試試濕轉。就是幾個小時等得比較痛苦。好幾個人做的話,真是等到花兒也謝了。至于說效果,不是
飼料風干樣本與半干樣品制作方法
應將兩樣品全部制成風干品,再取樣粉碎,篩上網物應返回到樣品中。原因是:兩中樣品基本水份不一樣粉碎時損耗不一樣,主要是水份。所以制成同樣的風干品;另外篩上物含有的成份密度不一樣,應返還樣品中混勻秤取,要不然檢測結果相對偏差不合格。
進口葡萄酒背標或將不強制標明干型或半干型
日前,有酒商表示葡萄酒進口報檢時,將不對產品類型(干紅、半干紅、干白、半干白等)做強制性檢測,也不強制標注在背標上。 事實是否如此?這個新規對進口葡萄酒有何好處? 廣州:不強制標注產品類型 昨日,WBO看見廣州傳世夏渡貿易有限公司總經理張強在朋友圈發布了一條消息:8月起,葡萄酒中文標簽可
江蘇5年立法112件-推動轉方式和生態建設逾半
記者24日從省委立法工作會上獲悉,省人大常委會2013-2017年立法規劃已獲省委批轉。本屆人大五年共安排立法項目112件,其中安排正式項目59件,力爭在本屆人大任期內完成;安排調研項目53件,作為本屆及下屆人大立法儲備項目。 在全部112件項目中,新制定項目72件,修改
企業為何“不想轉”“不敢轉”“不會轉”?
企業“不想轉”“不敢轉”“不會轉”,資源要素支撐相對不足,高端化、智能化、綠色化、融合化水平參差不齊,轉型升級環境尚待優化……7月4日,在“粵商·省長面對面協商座談會”上,關于傳統產業轉型升級的討論熱火朝天。 習近平總書記在二十屆中央財經委員會第一次會議上強調,“堅持推動傳統產業轉型升級,不能
半干轉轉膜電源正負極插反會對儀器有損傷嗎
會,正負極插反可能會造成IC燒掉。
BioRad(伯樂)Western-Blot半干法轉膜的十大注意事項
首先講轉膜儀的清洗:Do not immerse the unit in liquid. Use special care when cleaning the anode plate to avoid scratching or marring the platinum. Do not use
質檢總局停發美玉米干酒糟許可證:含MIR162轉基因
從玉米延伸到玉米干酒糟,從個別口岸擴展到整個東部漫長的海岸線,含有MIR162轉基因成分的“船貨退運事件”再度升級。 “退運船貨也被要求撤離保稅倉庫。”6月9日,來自青島港的一位貿易商對《華夏時報》記者說:“質檢總局已經停止核發美國玉米干酒糟(DDGS)的進口許可,并要求將之前含有MIR162
轉管培養法與轉瓶培養
轉管培養法(roller tube culture)是Gey 提出的,實驗室常用,為了擴大細胞產量,將試管改用轉瓶,故稱轉瓶培養,其培養方法是一樣的,試管或轉瓶固定在支加上,傾斜度為5°~10°左右,或將轉瓶放在一排排轉軸之間,使轉瓶隨著轉軸以每小時6~12 轉緩慢轉動。細胞貼附于玻璃壁
什么叫做半定性,什么叫做半定量
半定量是RT-PCR做基因表達分析的一種方法,其操作的方法是在野生型和突變體中用一個看家基因(通常是actin)做參照標準來觀察目標基因在各自的表達情況(上調還是下調),所謂半定量的“半”是通俗的說法,即在看電泳圖估計參照亮度一致(可看作是表達的細胞數一致)情況下,確定目標基因的表達;這是與更加
干熱(干烤箱)滅菌實驗
實驗方法原理干烤箱是由雙層鐵板制成的方形金屬箱,夾層中充滿石棉以隔熱,箱底放置熱源(電爐),并附有鼓風裝置、溫度調節器、溫度計等。主要用于耐高溫的玻璃器皿、油劑(如凡士林、液體石蠟等)、粉劑等物品的滅菌。實驗步驟將待滅菌物品清洗、晾干后放置干烤箱內(不宜過擠,不得讓物品與內層底版直接接觸),關閉箱門
干熱(干烤箱)滅菌實驗
實驗方法原理干烤箱是由雙層鐵板制成的方形金屬箱,夾層中充滿石棉以隔熱,箱底放置熱源(電爐),并附有鼓風裝置、溫度調節器、溫度計等。主要用于耐高溫的玻璃器皿、油劑(如凡士林、液體石蠟等)、粉劑等物品的滅菌。實驗步驟將待滅菌物品清洗、晾干后放置干烤箱內(不宜過擠,不得讓物品與內層底版直接接觸),關閉箱門
全球首塊半人半機械組織誕生
《終結者》里施瓦辛格扮演的T800終結者讓全世界第一次直觀感受到了機械與人體組織結合的成果,而就在不久前,哈佛大學的研究者們才初步實現人體細胞與機械的融合,制造出了世界上首塊半人半機械組織。 據報道,哈佛大學的生物工程學家們近日打破了生物和機械之間的隔閡,制造出了全球首塊半機械版人體組織。這些
western-blot轉膜是怎么做的
蛋白免疫印跡( Western Blot) 是將電泳分離后的細胞或組織總蛋白質從凝膠轉移到固相支持物NC膜或PVDF 膜上。目前主流方法是電轉印法,分為濕式轉印與半干轉印。濕式轉印是將膠塊垂直方向夾在濕式轉印槽內進行電轉印。以E-Blotter濕轉槽為例,一般使用垂直電泳槽的緩沖液槽體,將內部垂直電
把揮發性有機物“吹”干“轉”凈-分子篩轉輪法成VOCs治理新寵
隨著我國大氣污染加劇,VOCs治理迫在眉睫。而國家“大氣十條”和新大氣法的貫徹實施,VOCs治理與監測行業將進入發展的快車道。 在霧霾成為中國人民的“老朋友”之前,揮發性有機污染物——VOCs只是專業人士才懂的冷僻詞。而現在,空氣污染、家庭裝修、車間生產……幾乎人人都在關注VOCs的危害。
電泳、轉膜
轉膜是把DNA從瓊脂糖凝膠中轉移到固相支持物(一般是尼龍膜)上固定,是進行各種后續研究(如RFLP分析,陽性克隆的篩選驗證等所有涉及分子雜交的研究)的前提。實驗目的:掌握Southern blotting的原理及操作步驟。實驗原理:1. 轉膜的方式: 向上的毛細管轉移 向下的毛細管轉移 同時向