細胞技術專題：細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。 實驗材料細胞 試劑、試劑盒D-Hanks液 小牛血清 RPMI1640 雙抗 胰蛋白酶 EDTA NHCl NaHCO3 儀器、耗材凈化工作臺 離心機 恒溫水浴箱 冰箱 倒置相差顯微鏡 培養箱 吸管 玻璃瓶 培養瓶 廢液缸 吸頭 槍頭 膠塞 離心管 量加樣槍 紅血球計數板 實驗步驟1. 貼壁細胞的消化法傳代：（1）吸除或倒掉瓶內舊培養液。（2）D-Hanks液洗2～3次。 （3）向瓶內加入適量消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使消化液流遍所有細胞表面。（......閱讀全文
細胞技術專題：細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點，傳代方法有3種：懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代
細胞傳代實驗——細胞培養技術
細胞傳代實驗可用于：（1）醫學研究；（2）提供細胞種。（3）進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、
細胞技術專題：細胞生長曲線實驗
細胞生長曲線是測定細胞絕對生長數的常用方法，是判定細胞活力的重要指標。一般細胞傳代之后，經過短暫的懸浮然后貼壁，隨后度過長短不同的潛伏期，即進入大量分裂的指數生長期。為了準確描述整個過程中細胞數目的動態變化，典型的生長曲線可分為生長緩慢的潛伏期，斜率較大的指數生長期，呈平臺狀的平頂期及退化衰亡4個部
細胞傳代實驗
細胞培養技術 消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長
細胞傳代實驗
細胞培養技術 消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長
細胞傳代實驗
實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640雙抗胰蛋白酶EDTANHCl
細胞技術專題：腫瘤細胞原代培養實驗
腫瘤細胞原代培養可以：（1）研究癌變機理；（2）研究抗癌藥檢測；（3）研究癌分子生物學；（4）用于闡明和解決癌癥。詳細 實驗方法實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基，10%血清濃度即可，在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物，或原患者血清
原代細胞傳代技術
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液（胰蛋白酶或與EDTA混合液）輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打
細胞轉染實驗的實驗步驟細胞傳代
(1)試驗準備：200ul/1mlTip頭各一盒（以上物品均需高壓滅菌），酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養皿，離心管。(2)棄掉培養皿中的培養基，用1ml的PBS溶液洗滌兩次。(3)用Tip頭加入1mlTrypsin液，消化1分鐘（37。C，5%CO2)。用手輕拍培養瓶壁，觀察到細
細胞技術專題：大鼠肝星狀細胞培養實驗
實驗方法細胞培養技術 實驗方法原理選用Wistar大鼠經消化酶灌注肝臟后,用分離液分離HSC，通過觀察其自發熒光及其顯著特征性結構的脂肪染色、細胞免疫化學染色等方法鑒定。 實驗材料雄性 SD 大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
細胞技術專題：小鼠腹腔巨噬細胞培養實驗
小鼠腹腔巨噬細胞培可以：（1）吞噬與清除異物；（2）分泌生物活性物質；（3）對仿生全降解材料，降解后的無機產物與生命過程中有機物的合成作用。實驗方法細胞培養技術實驗方法原理取小鼠腹腔巨噬細胞與乳膠顆粒在不同培養條件下混合后定量加入24孔板，37 ℃，5% CO2?培養箱中孵育后，熒光顯微鏡下計數吞噬
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理 當初代培養成功，細胞生長增殖形成單層細胞后，進而擴展匯合，占滿一切空間，此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代，細胞會因增殖過度，培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液
細胞傳代實驗_消化法
實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞，用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精
傳代細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理當原代培養成功以后，隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂，一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒，如果不及時的減少細胞密度，細胞將逐漸衰老死亡。因此需要將培養物按照比例重新接種到新的培養器皿（瓶）內進行
原代細胞傳代基本技術
1. 選用原代細胞生長狀態好（90－95％），生長數量大于5×10?進行傳代。2. 吸除原代細胞培養液。用含雙抗的1×PBS（pH7.4）清洗細胞培養瓶2次。3. 3ml細胞消化液加入細胞培養瓶，輕輕搖動，使細胞消化液覆細胞培養瓶底。（建議使用賽奧斯的原代細胞消化液。）4. 細胞培養瓶置于5%CO2
細胞技術專題：大鼠星型膠質細胞培養實驗
大鼠星型膠質細胞培養可以：（1）用于神經系統發育、分化及再生等基礎研究；（2）腦缺血預處理上調神經保護蛋白的機制研究；（3）腦損傷和腦疼痛的研究；（4）新蛋白的功能研究。 ?實驗方法酶消化法 胰酶消化法 胰蛋白酶消化法 實驗材料大鼠胚胎 試劑、試劑盒L-15培養基 膠原酶 Dnase D-MEM-B
細胞技術專題：大鼠肝星狀細胞原代培養實驗
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法胰酶消化法 實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。 實驗材料SD大鼠 試劑、試劑盒戊巴比妥鈉
細胞傳代
實驗概要去除死細胞和生長狀況不佳的細胞，獲得下一代細胞實驗原理游離期：細胞接種后在培養液中呈懸浮狀態，細胞質回縮，胞體呈圓球形。貼壁期：細胞附著于底物上，游離期結束。血清中有促使細胞貼壁的冷析球蛋白和纖粘素、膠原等糖蛋白，這些帶正電荷的糖蛋白的促貼壁因子吸附于底物，懸浮細胞再與吸附因子附著。潛伏期：
細胞傳代培養實驗
?體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。二氧化碳培養箱是通過在培養箱箱體內模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內的生長環境，培養箱要求穩定的溫度（37°C）、穩定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）
細胞技術專題：動物細胞融合
細胞融合是指兩個或兩個以上的細胞合并成為一個細胞的過程。在自然情況下，體內和體外培養的細胞均能發生自發融合現象。人工方法誘導細胞融合開始于50 年，現在這項技術已成為研究細胞遺傳、細胞免疫，腫瘤及細胞工程的重要手段。在誘導物（如仙臺病毒，聚乙二醇）作用下，相互融合的細胞發生凝集，隨后在質膜接
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（一）
兔膀胱平滑肌細胞培養可以：（1）分離得到高純度兔膀胱平滑肌細胞；（2）進行細胞學鑒定研究；（3）用于細胞學其他研究。實驗方法酶分離法 實驗方法原理運用顯微手術器械在肉眼下仔細剔除膀胱黏膜層及漿膜層后，完整分離膀胱平滑肌層。然后以酶分離法獲取兔膀胱平滑肌細胞，體外原代和傳代培養分離細胞。在倒置顯微鏡下
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（三）
?收起? 注意事項1. 應嚴格無菌操作。2. 仔細徹底剝除膀胱黏膜、黏膜下及漿膜層，是確保獲的大量高質單個膀胱平滑肌細胞的基礎。3. 膀胱平滑肌組織應盡量減碎以確保充分消化。4. 嚴格控制膠原酶和胰蛋白酶的濃度和消化時間，見消化液混濁、組織塊呈絮狀，或在倒置顯微鏡下見消化液中有較多單個細胞或細胞小
細胞技術專題：兔膀胱平滑肌細胞培養實驗（二）
二、結果 兩只兔所有標本均獲成功。倒置顯微鏡觀察平滑肌細胞24 小時均可見膀胱平滑肌細胞貼壁生長，正常兔 7 天左右、而梗阻兔則需10~12 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。均傳代順利，傳代后約正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培養瓶約 80%匯合。本組中均傳至第8 代，經第8
細胞技術專題：人臍動脈平滑肌細胞培養實驗
人臍動脈平滑肌細胞培養可以：（1）獲得人臍動脈平滑肌細胞；（2）作為重大動脈疾病的研究底物；（3）研究血管模型；（4）對血管疾病的藥理學和治療繼續提供信息。實驗方法消化法 貼塊法 實驗方法原理運用消化法進行人臍動脈血管平滑肌細胞的培養，并用倒置顯微鏡進行形態學觀察和用免疫組化對培養細胞進行鑒定。 實
細胞的傳代培養實驗
細胞的傳代培養實驗可以用于：（1）擴增細胞數量；（2）擴大細胞培養。內容來源：中國醫科大學實驗指導手冊。實驗方法原理體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭
細胞的傳代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭，將培養的細胞分散，從容器中取出，以1:2
細胞的傳代培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭，將培養的細胞分散，從容器中取出，以1:2
懸浮細胞傳代
實驗方法原理從懸浮細胞培養物中吸取樣品，細胞計數，接種適量的懸浮細胞至新培養瓶的新鮮培養基中，使細胞濃度與開始培養時一致。實驗材料起始培養物儀器、耗材生長培養基吸管離心管培養瓶攪拌瓶移液器吸耳球吸水紙巾吸管桶抗乙醇記號筆血細胞計數板實驗步驟1. 準備好超凈臺，將試劑及材料放于超凈臺上準備開始實驗。2
懸浮細胞傳代
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 從懸浮細胞培養物中吸取樣品，細胞計數，接種適量的懸浮細胞至新培養瓶的新鮮培養基中，使細胞濃度與開始培養時一致。 實驗材料 起始培養物