細胞傳代實驗——細胞培養技術
細胞傳代實驗可用于:(1)醫學研究;(2)提供細胞種。(3)進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、試劑盒D-Hanks液小牛血清RPMI1640雙抗胰蛋白酶EDTANHClNaHCO3儀器、耗材凈化工作臺離心機恒溫水浴箱冰箱倒置相差顯微鏡培養箱吸管玻璃瓶培養瓶廢液缸吸頭槍頭膠塞離心管量加樣槍紅血球計數板實驗步驟1. 貼壁細胞的消化法傳代:(1)吸除或倒掉瓶內舊培養液。(2)D-Hanks液洗2~3次。 (3)向瓶內加入適量消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使消化液流遍所有細胞表面。(4)然后吸掉或倒掉消化液后再加適量新的消化液,輕輕搖動再倒掉大部分消化液,僅留少許進行消化(也可不采用上述步驟......閱讀全文
細胞傳代實驗——細胞培養技術
細胞傳代實驗可用于:(1)醫學研究;(2)提供細胞種。(3)進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理 當初代培養成功,細胞生長增殖形成單層細胞后,進而擴展匯合,占滿一切空間,此時需要進行分離培養。這一操作稱傳代或再培養。如拖延傳代,細胞會因增殖過度,培養基營養枯竭和代謝產物積累而發生中毒。80%匯合或剛匯合細胞是理想傳代階段。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 Hanks胰蛋白酶EDTA培養液
傳代細胞培養實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒,如果不及時的減少細胞密度,細胞將逐漸衰老死亡
傳代細胞培養實驗
實驗方法原理當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一方面細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面培養基內的營養物不足和代謝物積累不利于細胞生長甚至發生中毒,如果不及時的減少細胞密度,細胞將逐漸衰老死亡。因此需要將培養物按照比例重新接種到新的培養器皿(瓶)內進行
細胞技術專題:細胞傳代實驗
根據細胞生長的恃點,傳代方法有3種:懸浮生長細胞傳代、半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)、貼壁生長細胞傳代。實驗方法細胞培養技術 消化法 實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代
細胞培養傳代培養的實驗原理
傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶,細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行,每一步都需要認真仔細的無菌操作。
細胞培養傳代培養的實驗步驟
實驗步驟1.入無菌室之前用肥皂洗手,用75%酒精擦拭消毒雙手。2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態,確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3.超凈臺臺面應整潔,用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4.打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右,關閉超凈臺的紫外燈,打開抽風機清潔空氣,除去
病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法
實驗方法原理從人及動物某些組織,特別是腫瘤組織,經多次傳代可建立傳代細胞系,這種細胞能無限地傳代,某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣,可用作病毒的分離鑒定,如HeLa 細胞,Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞,HeLa 細胞來自子宮頸癌,Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上
傳代細胞培養與觀察
實驗概要了解傳代細胞的傳代方法及操作過程,學習觀察體外培養細胞的形態及生長狀況。實驗原理傳代培養是指細胞從一個培養瓶以1:2或1:2以上的比例轉移,接種到另一培養瓶的培養。這種培養,第一步也是制備細胞懸液,當細胞長成致密單層時,它很容易被蛋白水解酶和EDTA)所破壞。所以—般采用胰蛋白酶和EDTA(
關于細胞培養的細胞傳代介紹
細胞密度達到80%~90%時.去培養基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入細胞培養箱3min。加人1ml DMEM完全培養基終止胰酶消化,轉移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養盤,轉移至15ml離心管,2000rpmX2min,棄上清液。再加
細胞培養傳代培養的實驗方法
一、原理細胞在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。為了保持細胞正常的二倍體核型,傳代培養一般
細胞傳代實驗
細胞培養技術 消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長
細胞傳代實驗
細胞培養技術 消化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長
細胞傳代實驗
實驗方法原理 培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代;懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打傳代。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 D-Hanks液小牛血清RPMI1640雙抗胰蛋白酶EDTANHCl
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
原代細胞傳代技術
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時,棄去消化液,加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打
原代細胞和傳代細胞培養有哪些區別
區別一:定義不同原代細胞培養:原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。傳代細胞培養:傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。區別二:特點不同原代細胞培養:與體內原組織
原代細胞和傳代細胞培養有哪些區別
區別一:定義不同 原代細胞培養:原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。 傳代細胞培養:傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。 區別二:特點不同 原代細
原代細胞和傳代細胞培養有哪些區別
區別一:定義不同原代細胞培養:原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。傳代細胞培養:傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。區別二:特點不同原代細胞培養:與體內原組織
原代細胞和傳代細胞培養有哪些區別
區別一:定義不同原代細胞培養:原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。傳代細胞培養:傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。區別二:特點不同原代細胞培養:與體內原組織
原代細胞和傳代細胞培養有哪些區別
原代細胞和傳代細胞培養有含義、培養過程、培養結果和應用四個方面區別:1、含義不同原代培養是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養,也稱初代培養。原代培養是將培養物放置在體外生長環境中持續培養,中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義:原代培養中的代并非細胞的代數,因為培養過程中細胞經多次分裂已經
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織,所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法,用單一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的,它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
細胞培養傳代培養的方法
1.懸浮生長細胞傳代多采用離心法傳代。1000轉/分,20-30秒后去上清。沉淀細胞加新培養液后再混勻傳代。亦有直接傳代法,即懸浮細胞沉淀在瓶壁時,將上清培養液去除1/2-1/3,然后用吸管直接吹打形成細胞懸液再傳代.2.半懸浮生長細胞傳代(Hela細胞)此類細胞部分呈現貼壁生長現象,但貼壁不牢,可
細胞培養傳代培養的定義
傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。傳代培養中的細胞傳代培養(subculture),當原代培養成功以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速
實驗技術:細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程: 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70%酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用
實驗技術:細胞培養基本技術
一、操作規程:1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70%酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用70%酒精擦拭無菌操作臺面,再
細胞傳代實驗_消化法
實驗方法原理用胰蛋白酶消化細胞,用于貼壁細胞傳代培養。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰蛋白酶酒精PBS儀器、耗材超凈工作臺酒精燈酒精棉球培養箱顯微鏡吸管離心管離心機實驗步驟一、傳代前準備?1. ?預熱培養用液:把已經配制好的裝有培養液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。?2. ?用75%酒精
原代細胞和傳代細胞培養有什么區別
一、定義不同:1、原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。2、傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。二、特點不同:1、原代細胞培養與體內原組織在形態結構和功能活動上
原代細胞和傳代細胞培養有什么區別
一、定義不同:1、原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。2、傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。二、特點不同:1、原代細胞培養與體內原組織在形態結構和功能活動上