實驗技術：細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程： 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用70％酒精擦拭無菌操作臺面,再讓無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可進行下一個實驗操作。 2.無菌操作工作區域應保持清潔與寬敞,必要物品,如試管架,移液器或吸管頭等可以暫時放置,其它實驗用品用完后應及時移出,以利氣體流通.實驗用品要用70％酒精擦拭后才能帶入無菌操作臺內。實驗操作應在操作臺中央無菌區域內進行,勿在邊緣非無菌區域操作。 3.小心取出無菌實驗用品,避免造成污染。切勿碰觸吸管與吸頭頭部或容器瓶口,不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后,用手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放在臺面上。......閱讀全文
實驗技術：細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程： 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用
實驗技術：細胞培養基本技術
一、操作規程：1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用70％酒精擦拭無菌操作臺面,再
細胞培養基本技術
實驗概要無菌操作基本技術?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失
細胞培養的基本技術
一、清洗新采用和重新使用的培養器皿，都要嚴格清洗，以防各種有害物質對培養細胞損害。培養用的塑料器皿目前主要依靠進口，均已無菌密封包裝，可直接使用。對于塑料瓶蓋或膠塞等，可水中浸泡后用2％NaOH煮沸10～20min，自來水中浸泡和蒸餾水漂洗2～3次，晾干備用。細胞培養中的絕大部分器皿系玻璃制品，清洗
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步，是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
基本實驗技術
I.?Safety ProceduresA. ChemicalsA number of chemicals used in this laboratory are hazardous. All manufacturers of hazardous materials are required by
細胞實驗技術及細胞培養基本知識3
三、神經膠質細胞培養神經細胞（神經元）不易培養，只有在適宜情況下，如接種在膠原底層上，或加入神經生長因子和膠質細胞因子時，可出現一定程度的分化，長出突起等現象，但很難使之增值。而神經膠質細胞是神經組織中比較容易培養的成分。人、鼠等腦組織即可用于神經膠質細胞培養，不僅能獲得生長的膠質細胞，也可形成能傳
代做實驗|細胞培養技術的基本原理
細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊（0.5~1立方毫米）或薄片（厚0.2毫米），而器官培
代做實驗|細胞培養技術的基本原理
細胞培養是用酶消化法將組織碎塊分離成單個細胞，用培養基制成細胞懸液，在體外適宜條件下，使細胞生長繁殖，并保留其一定的結構和功能特性。細胞培養與組織培養、器官培養主要不同點在于原始培養的對象不同。細胞培養使用的是單個細胞懸液，組織培養使用的是組織塊（0.5~1立方毫米）或薄片（厚0.2毫米），而
細胞實驗技術及細胞培養基本知識2
（二）人類淋巴母細胞建株方法1、4ml肝素抗凝血于離心管中，加入2ml RPMI 1640。 2、混勻后沿管壁緩慢加到預置有4ml淋巴細胞分離液的液面上靜置30min。 3、1500rpm，15min，吸取白細胞層（第二層）于另一離心管中。 4、加RPMI 1640 5ml洗滌白細胞兩次。
細胞實驗技術及細胞培養基本知識1
細胞培養技術細胞周期的測定一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。 單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法，但它不能代表細胞群體的周期，故現多采用其他方法測群體周期。 測定細胞周期的方法很多，有同位素標記法、細胞計數法
細胞傳代實驗——細胞培養技術
細胞傳代實驗可用于：（1）醫學研究；（2）提供細胞種。（3）進行細胞生物學研究。實驗方法原理培養細胞傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長的細胞用消化法傳代；部分貼壁生長的細胞用直接吹打可傳代；懸浮生長的細胞可以采用直接吹打或離心分離后傳代，或用自然沉降法吸除上清后，再吹打傳代。實驗材料細胞試劑、
豬甲狀腺細胞培養實驗_細胞培養技術
實驗方法原理由于甲狀腺富含纖維性組織，所以甲狀腺的消化分離一般采用膠原酶與胰蛋白酶聯合消化法，用單一的胰蛋白酶消化效果一般；促甲狀腺激素(TSH)是培養甲狀腺細胞必備的，它能夠起到促進甲狀腺細胞生長的作用。實驗材料豬甲狀腺試劑、試劑盒F-12培養基胎牛血清胰蛋白酶膠原酶Ⅳ牛 TSH儀器、耗材眼科剪滴
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以：（1）用于細胞保種；（2）用于分子生物學研究；（3）用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出，經胰酶、螯合劑（常用EDTA）處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
細胞培養基本技術概述（一）
無菌操作基本技術 ?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 %ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或
細胞培養基本技術概述（七）
冷凍細胞活化 1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。 2. 細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒溫水槽 3.2 新鮮培養基 3.3 無菌吸管/
細胞培養基本技術概述（三）
血清 ?1. 血清必須貯存于–20 ～ -70 oC，若存放于4 oC，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將40～45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中，由于血清結凍時體積會增加約10 %，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發生污染或容器凍裂之情形。 ?2. 一般廠商提供之血清為無菌，不需再
細胞培養基本技術概述（五）
實驗用品 1. 種類︰ 1.1. 細胞培養實驗用品均為無菌，除了玻璃容器與pasteur pipet 外，其它均為塑料無菌 制品。 1.2. TC 級培養盤表面均有coating 高分子物質以讓細胞吸附，培養容器種類有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等，依
細胞培養基本技術概述（二）
培養基 ?1. 液體培養基貯存于4 oC 冰箱，避免光照，實驗進行前放在37 oC 水槽中溫熱。 2. 液體培養基(加血清) 存放期為六個月，期間glutamine 可能會分解，若細胞生長不佳，可以再添加適量glutamine。 ?3. 粉末培養基配制(以1 升為例)： ?3.1. 細胞培
細胞培養基本技術概述（四）
細胞傳代培養 ?1. 細胞生長至高密度時，即須分殖至新的培養瓶中，一般稀釋比例為1:3 至1:6，依細胞種類而異。 ?2. 材料： ?2.1. 無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
細胞培養基本技術概述（六）
抗生素 1. 細胞庫之細胞培養基不加抗生素 1.1. 培養自ATCC 引進之細胞株，培養基中不加抗生素。 1.2. 培養自其它實驗室引進之細胞株，制作token freeze 前培養基須添加抗生素，待token freeze 通過污染測試后，大量培養時則不加抗生素。 2. 寄送活細胞時，須將培養液充
細胞培養實驗的無菌化技術
The use of aseptic technique is essential for avoiding the production of infection whilst undertaking tissue culture activities.Many activities take p
FISH－技術基本實驗
實驗方法原理 試劑、試劑盒 70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液（PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材 水浴鍋增濕器玻片實驗步驟 一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%，如果房間濕度計顯示低于45%，則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±
FISH－技術基本實驗
實驗方法原理試劑、試劑盒70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液（PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材水浴鍋增濕器玻片實驗步驟一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%，如果房間濕度計顯示低于45%，則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±2℃，在
FISH－技術基本實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 70%乙醇 SSC
細胞培養技術的技術分類
動物細胞培養高速冷凍離心機在所有的細胞離體培養中，最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清：動物細胞離體培養常常需要血清。最常用的是小牛血清。血清提供生長必需因子，如激素、微量元素、礦物質和脂肪。在這里，血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物：大多數動物細胞有貼壁生長的習慣
細胞培養技術
實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使期生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術，要求工作環境和條件必須保證無微生物污染
動物實驗基本技術2
第五節 實驗動物的采血法實驗研究中，經常要采集實驗動物的血液進行常規質量檢測、細胞學實驗或進行生物化學分析，故必須掌握正確的采集血液的技術。采血方法的選擇，主要決定于實驗的目的和所需血量以及動物種類。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血：需血量很少時常用本法，如作紅、白細胞計數、血紅蛋白測定、制作
動物實驗基本技術3
第七節 實驗動物的處死當實驗中途停止或結束時，實驗者應站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物，原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安樂死。安樂死是指實驗動物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實驗動物安樂死方法的選擇取決于動物的種類與研究的課題。一、蛙 類常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊髓的
動物實驗基本技術2
第三節 實驗動物的麻醉方法麻醉(anesthesia)的基本任務是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺，保障實驗動物的安全，使動物在實驗中服從操作，確保實驗順利進行。一、常用的麻醉藥(一)常用局部麻醉劑：普魯卡因，此藥毒性小，見效快，常用于局部浸潤麻醉，用時配成0.5％～1％；利多卡因，此藥見效快，組