細胞凋亡實驗操作細則
一、實驗目的： 1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合，是細胞遵循一定規律自己結束生命的自主控制過程。細胞凋亡具有可鑒別的形態學和生物化學特征。 在形態上可見凋亡細胞與周圍細胞脫離接觸，細胞變園，細胞膜向內皺縮、胞漿濃縮、內質網擴張、細胞核固縮破裂呈團塊狀或新月狀分布、內質網和細胞膜進一步融合將細胞分成多個完整包裹的凋亡小體，凋亡小體最后被吞噬細胞吞噬消化。在凋亡過程中細胞內容物并不釋放到細胞外，不會影響其它細胞，因而不引起炎癥反應。 在生物化學上，多數細胞凋亡的過程中，內源性核酸內切酶活化，活性增加。核DNA隨機地在核小體的連接部位被酶切斷，降解為180-200bp或它的整倍數......閱讀全文
細胞凋亡實驗操作細則
一、實驗目的： 1、掌屋凋亡細胞的形態特征 2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事
細胞凋亡實驗
細胞凋亡(Apoptosis) 又稱程序性細胞死亡(Programmed Cell Death，PCD)是指細胞基因調控的一種自主性的自殺現象。即是在一定的生理或病理條件下，遵循自身的程序，自主結束生命的死亡方式。凋亡一詞最早是由年澳大利亞組織病理學家John Kerr通過研究大鼠肝左葉細胞死亡時，
細胞凋亡檢測實驗
熒光探針雙標記法 形態學檢測法 DNA ladder法 Annexin V/PI雙染色法 磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性檢測法
細胞凋亡檢測實驗
實驗方法原理?細胞凋亡或稱程序性細胞死亡（Programmed Cell Death ,PCD）是細胞的生命現象之一，它在機體的胚胎發育、組織修復及自身反應性T淋巴細胞的清除等方面起著十分重要的作用。細胞凋亡調節的失控可導致臨床各種疾病的發生。如老年性癡呆與神經細胞凋亡過度有關，自身免疫性疾病和
細胞凋亡檢測實驗
熒光探針雙標記法 形態學檢測法 DNA ladder法 Annexin V/PI雙染色法 磷脂酰絲氨酸外翻分析（Annexin V法） TUNEL法 Caspase-3活性檢測法
細胞凋亡檢測實驗——細胞凋亡的形態學檢測
實驗方法原理根據凋亡細胞固有的形態特征，人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。儀器、耗材光學顯微鏡倒置顯微鏡熒光顯微鏡共聚焦激光掃描顯微鏡透射電子顯微鏡實驗步驟一、光學顯微鏡和倒置顯微鏡1. ?未染色細胞凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞
細胞凋亡檢測操作流程2——BrdU檢測凋亡細胞DNA斷裂片段
凋亡檢測操作流程二、?BrdU檢測凋亡細胞DNA斷裂片段相關試劑及組分：一步法: APO-DIRECT試劑盒（貨號：556381）： PartA（4°C保存）PartB（-20°C保存）PI/RNase A SolutionFITC-dUTPReaction BufferTdT EnzymeRins
COD檢測操作細則
方法于原理在強酸性溶液中，用一定量的K2CrO7氧化水中還原性物質，過量的K2CrO7以試亞鐵靈作指示劑，用(NH4)2Fe(SO4)2溶液回滴。根據(NH4)2Fe(SO4)2的用量算出水樣中還原性物質消耗氧的量儀器回流裝置：帶250ml錐形瓶的全玻璃回流裝置加熱裝置：編阻電爐。50ml酸式滴定管
細胞凋亡檢測實驗原理分析
本實驗用1μg/ml 三尖杉酯堿HT在體外誘導培養的HL-60細胞發生凋亡，同時也有少數細胞發生壞死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）對細胞進行雙重染色，可以區別凋亡、壞死及正常細胞。三尖杉酯堿（HT）是我國自行研制的一種對急性粒細胞白血病，急性單核白血
細胞凋亡檢測實驗——TUNEL法
實驗方法原理脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[（digoxigenin）-11-dUTP]在TdT酶的作用下，可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端，與dATP形成異多聚體，并可與連接了報告酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）的抗地高辛抗體結合。在適合底物存在下，過氧化物酶可產生很強的顏色反應，特異準確
細胞凋亡實驗注意事項
?誘導培養HL-60細胞時間要準確；?2. ?熒光顯微鏡下觀察細胞時，由于熒光易碎滅，觀察時要盡量快。細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的組合，是細胞遵循一定規律自己
細胞凋亡檢測操作流程三JC1檢測凋亡細胞線粒體膜電...
細胞凋亡檢測操作流程三--JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變凋亡檢測操作流程??三、JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變BD? MitoScreen (JC-1)線粒體膜電位檢測試劑盒（551302）：組分描述JC-1(染料)4瓶，每瓶用于25個樣本。凍干粉，使用前稀釋至儲存液（Stock Sol
細胞凋亡檢測操作步驟之ELISA法
細胞凋亡發生時，內源性核酸內切酶將分解核小體區間的雙鏈DNA，但核小體本身由于由組蛋白緊密結合而免受切割，單克隆抗體可以與核小體形成夾心結構，可通過檢測核小體判斷細胞是否經歷凋亡事件。(一) 原理細胞凋亡的發生，是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp～200bp或其倍數的核小
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡，乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此，有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡，乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此，有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
實驗時間_流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
流式細胞儀檢測細胞凋亡可以：鑒定細胞凋亡形態；可以準確的進行凋亡細胞的計數；可以進行特異的定性分析和定量分析。實驗原理細胞凋亡時，在細胞、亞細胞和分子水平上會發生的特征性改變，這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性。通過流式細胞儀檢測這
細胞凋亡檢測實驗——DNA－ladder法
實驗方法原理發生細胞凋亡時，內源性核酸酶被激活，染色體DNA鏈在核小體之間被切割，形成180～200個堿基或其整數倍的DNA片段，將這些DNA片段抽提出來進行電泳，可得到DNA梯狀條帶（DNA ladder）。?實驗材料凋亡細胞試劑、試劑盒蛋白酶K醋酸鉀白細胞裂解液Tris-HClNaClEDTAS
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
實驗方法原理 實驗材料 要分析的細胞在FACS緩沖液中試劑、試劑盒 FACS緩沖液冰冷的100%乙醇（如果細胞是抗體標記的則用70%乙醇）1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙錠（PI)的PBS儀器、耗材 流式細胞儀實驗步驟 1)凋亡刺激后，從培養液中沉淀所要分析的細胞，同樣沉淀一
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
PI單染色法 Heochst 33342/PI雙染色法 Annexin V/PI雙染色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主要根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
流式細胞儀檢測細胞凋亡可以： 鑒定細胞凋亡形態； 可以準確的進行凋亡細胞的計數； 可以進行特異的定性分析和定量分析。 實驗原理 細胞凋亡時，在細胞、亞細胞和分子水平上會發生的特征性改變，這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征
細胞凋亡：流式細胞儀檢測實驗
用次GoZG1 DNA峰值計算細胞凋亡 用TUNEL流式細胞定量凋亡細胞 通過TUNEL組織切面中的凋亡細胞的原位雜交 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變最具特征性，主要包括以下幾個方面：?1. ?細胞核的改變?由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗
實驗方法原理 其原理主要是根據細胞凋亡時在細胞、亞細胞和分子水平上所發生的特征性改變。這些改變包括細胞核的改變、細胞器的改變、細胞膜成分的改變和細胞形態的改變等，其中細胞核的改變zui具特征性，主要包括以下幾個方面：1. 細胞核的改變由于凋亡細胞核的改變，造成各種染色體熒光染料對凋亡細胞DNA可染性
細胞凋亡，細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察：細胞凋亡后呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后（細胞凋亡,細胞凋亡通路，細胞凋亡檢測）核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側
微波消解儀的操作細則
元圭微波消解儀技術是利用微波的穿透性和激活反應能力加熱密閉容器內的試劑盒樣品，可使制樣容器內壓力增加，反應溫度提高，從而大大提高了反應速率，縮短樣品制備的時間，重要的儀器在使用中肯定有很多地方需要注意啦試驗前準備：檢查儀器運行正常。檢查轉子是否干凈，容器是否已經清洗。2.稱樣：用萬分之一天平準確稱取
流式細胞儀檢測細胞凋亡實驗protocol
40年來，流式細胞術一直由多色流式主導。 盡管Fulwyler發明的初代儀器基于庫爾特體積，但熒光在短短幾年內成為流式細胞儀主導技術。 從20世紀80年代初到現在，技術開發人員一直致力于構建能夠測量更多熒光參數（我們通常將其稱為“顏色”）的儀器。 最開始，G?hde在1968年首次發表關于熒光
檢測細胞凋亡的實驗方法比較
◆ TUNEL 與 ELISA 檢測凋亡的方法比較TUNEL法? 細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端
細胞凋亡實驗步驟及注意事項
一、實驗目的1、掌屋凋亡細胞的形態特征?2、學會用熒光探針對細胞進行雙標記來檢測正常活細胞、凋亡細胞和壞死細胞的方法二、實驗原理 細胞死亡根據其性質、起源及生物學意義區分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界，在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發生事件的
細胞凋亡的形態：生化性質實驗
使用活體熒光染料的顯微鏡定量凋亡指數和細胞活力（臺盼藍染色） 吖啶橙染色 吖啶橙或溴化乙錠染色 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理