用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇水飽和的異戊醇或 n-丁醇酚TE儀器、耗材 透析管和夾離心機和轉頭實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,水飽和的異戊醇或 n-丁醇(從離心制備的 DNA 中去除溴化乙錠要上述兩種有機溶劑之一。),酚,酚:氯仿(1:1, V/V),TE ( pH 8.0)。2. 核酸和寡核苷酸通過 CsCl 梯度離心純化的 DNA 樣品3. 離心機和轉頭帶有 HL-4 的轉頭和 50 ml 離心管的 Sorvall RT-6000 離心機(或與其相當的設備)Sorvall SS-34 轉頭(或與其相當的轉頭)4. 專用設備透析管和夾或用于旋轉透析的微量濃縮器(Amicon) 。二、方法1. 提取 DNA 溶液、去除溴化乙錠(1) 將 DNA 溶液加到玻璃管或塑料管中,加......閱讀全文
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsC
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇水飽和的異戊醇或 n-丁醇酚TE儀器、耗材 透析管和夾離心機和轉頭實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,水飽和的異戊醇或
用有機溶劑抽提法從DNA中除去溴化乙錠實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 欲從經 CsCl 梯度純化的 DNA 中去除溴化乙錠,常用有機溶劑反復抽提的方法。隨后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 實驗材料 DNA
從總-RNA-中除去基因組-DNA-實驗
從總 RNA 中除去基因組 DNA 實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 變性(甲醛)瓊脂糖凝膠 瓊脂糖 蒸餾
從總-RNA-中除去基因組-DNA-實驗
試劑、試劑盒?變性(甲醛)瓊脂糖凝膠瓊脂糖蒸餾水甲醛蒸餾水乙醇 甲醛MOPS 緩沖液乙二胺四乙酸MOPS乙酸鈉酚 氯仿(3:1) 溶液氯仿液體酚Tris-HCl電泳緩沖液儀器、耗材?離心機和轉頭離心管配膠板微波爐實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑變性(甲醛)瓊脂糖凝膠(配制過程見第 18步)
從總-RNA-中除去基因組-DNA-實驗
為了進行 FDD 基因表達的分析,以及使用任何其他基于 RNA 的基因表達技術,在反轉錄合成單鏈 cDNA 和后續的 PCR 操作之前,必須除掉污染的基因組 DNA。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒變性(甲醛)瓊脂糖凝膠瓊脂糖蒸餾水甲醛蒸餾水乙醇甲醛MOPS
用離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠實驗
實驗方法原理 經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。實驗材料 DNA 樣品試劑、試劑盒 乙醇HClNaCl酚氯仿TETEN 緩沖液儀器、耗材 Dowex AG50W-X8實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液乙醇,HCl (1 mol/
用離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠實驗
經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。實驗材料DNA 樣品試劑、試劑盒
用離子交換層析法從DNA中去除溴化乙錠實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 經過氯化銫梯度離心所純化的 DNA 中的溴化乙錠可以通過離子交換層析法去除,隨后則用乙醇沉淀去除氯化銫。 實驗材料 DNA 樣品
有機溶劑抽提法提取葉黃素的方法介紹
有機溶劑抽提法是應用最多的提取葉黃素方法。存在于萬壽菊中的葉黃素在乙醇中溶解度很高,在中性條件下則難溶于水,在堿性條件下葉黃素的溶解度比在酸性及中性條件下的溶解度高 。
線形質粒DNA-5粘性末端去磷酸實驗——抽提法
實驗材料質粒試劑、試劑盒CIAPEDTABUFFER酚-氯仿乙醇TE儀器、耗材水浴鍋抽干機實驗步驟1、質粒DNA和CIAP以及BUFFER 37 ℃水浴30min?2、補充CIAP 再37 ℃水浴30min?3、加入50 mM EDTA至終濃度5 mM 75 ℃加熱10min 失活CIAP?4、冷卻
食品中脂肪的測定——索氏抽提法
原理脂肪易溶于有機溶劑。試樣直接用無水乙醚或石油醚等溶劑抽提后,蒸發除去溶劑,干燥,得到游離態脂肪的含量。試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規定的三級水。試劑無水乙醚(C4H10O)。石油醚(CnH2n+2):石油醚沸程為30℃~60℃。材料石英砂。脫脂棉。儀器和
動物肝DNA提取實驗中除去RNA的試劑
對于動物DNA/RNA提取實驗有一些經驗,希望我的回答可以幫到你。在動物肝DNA提取實驗中,通常采用的試劑是三氯醋酸(Trizol)試劑。這個試劑是一種廣泛應用于RNA和DNA提取的試劑,可以有效地提取RNA和DNA,且不會相互干擾。在使用Trizol試劑進行DNA提取時,可以通過調整實驗步驟和加入
低熔點瓊脂糖凝膠中DNA的回收(有機溶劑抽提)
實驗方法原理 羥乙基修飾的瓊脂糖可降低鏈間的氫鍵數目,并可在比標準瓊脂糖更低的溫度下熔化和凝固。多糖鏈上這種替換發生的程度決定了瓊脂糖熔化與凝結的確切溫度。這 一特性構成了從凝膠中回收及操作 DNA 的基礎(Wielander 1979; Parker and Seed, 1980)。實驗材料
低熔點瓊脂糖凝膠中DNA的回收(有機溶劑抽提)
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 羥乙基修飾的瓊脂糖可降低鏈間的氫鍵數目,并可在比標準瓊脂糖更低的溫度下熔化和凝固。多糖鏈上這種替換發生的程度決定了瓊脂糖熔化與凝結的確切溫度。這 一特性構成了從凝膠中回收及操作 DNA 的基礎(Wielander 1979;
低熔點瓊脂糖凝膠中DNA的回收(有機溶劑抽提)
羥乙基修飾的瓊脂糖可降低鏈間的氫鍵數目,并可在比標準瓊脂糖更低的溫度下熔化和凝固。多糖鏈上這種替換發生的程度決定了瓊脂糖熔化與凝結的確切溫度。這一特性構成了從凝膠中回收及操作 DNA 的基礎(Wielander 1979; Parker and Seed, 1980)。 本實驗來源「分子克隆實驗指南
索氏抽提法操作步驟
操作步驟:1.把濾紙做成與提取器大小相應的濾紙筒,然后把需要提取的樣品放入濾紙筒內,裝入提取器。注意濾紙筒既要緊貼器壁,又要方便取放。(濾紙筒上可以套一圈棉線,方便提取完成后取出濾紙筒。)被提取物高度不能超過虹吸管,否則被提取物不能被溶劑充分浸泡,影響提取效果。被提取物亦不能漏出濾紙筒,以免堵塞虹吸
酵母菌RNA制備實驗—熱酸性酚抽提法
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒TES酸性酚氯仿乙酸鈉乙醇儀器、耗材離心管離心機搖床實驗步驟1. ?酵母細胞在10 ml 培養基中生長至指數中期(OD600=1.0)。?2. ?將培養液轉移到50 ml,離心管,于4℃,1 500 g 離心3 min。?3. ?棄上清,菌體沉淀用1 ml 冰冷的水重懸,轉
粗脂肪的定量測定——抽提法
一、目的與要求:1、熟悉掌握粗脂肪的測定方法。2、熟悉與掌握重量分析的基本操作,包括樣品處理,烘干,恒重等。二、原理:本法為重量法,用脂肪溶劑將脂肪提出后進行稱量,該法適用于固體和液體樣品。通常將樣品浸于脂肪溶劑,為乙醚或沸點30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器進行循環抽提。用本法提取的脂肪性物
索氏抽提法步驟是什么
1.把濾紙做成與提取器大小相應的濾紙筒,然后把需要提取的樣品放入濾紙筒內,裝入提取器。注意濾紙筒既要緊貼器壁,又要方便取放。(濾紙筒上可以套一圈棉線,方便提取完成后取出濾紙筒。)被提取物高度不能超過虹吸管,否則被提取物不能被溶劑充分浸泡,影響提取效果。被提取物亦不能漏出濾紙筒,以免堵塞虹吸管。如
粗脂肪的定量測定:抽提法
一、目的與要求:1、熟悉掌握粗脂肪的測定方法。2、熟悉與掌握重量分析的基本操作,包括樣品處理,烘干,恒重等。二、原理:本法為重量法,用脂肪溶劑將脂肪提出后進行稱量,該法適用于固體和液體樣品。通常將樣品浸于脂肪溶劑,為乙醚或沸點30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器進行循環抽提。用本法提取的脂肪性物
用索氏抽提法提取粗脂肪適用于什么樣品
索氏抽提法提取粗脂肪適用于脂類含量較高,結合態的脂類含量較少,能烘干磨細,不易吸濕結塊的樣品。原理:利用溶劑回流和虹吸原理,使固體物質每一次都能為純的溶劑所萃取,所以萃取效率較高。萃取前應先將固體物質研磨細,以增加液體浸溶的面積。然后將固體物質放在濾紙套內,放置于萃取室中。如圖安裝儀器。當溶劑加熱沸
脂肪的測定方法索氏抽提法
1 原理樣品用無水乙醚或石油醚等溶劑抽提后,蒸去溶劑所得的物質,在食品分析上稱為脂肪或粗脂肪。因為除脂肪外,還含色素及揮發油、蠟、樹脂等物。抽提法所測得的脂肪為游離脂肪。2 試劑2.1 無水乙醚或石油醚。2.2 海砂:食品中水分的測定3 儀器索氏提取器。4 操作方法4.1 樣品處理4.1.1 固體樣
索氏抽提法測定脂肪原理
??? 脂肪是食品的主要成分之一,大多數動物性食品和一些植物性食品,尤其是植物的種子、果實或果仁,都含有脂肪或脂類化合物。在實用油脂中主要存在甘油三酸酯以及一些脂肪酸、磷酸、糖酯、脂溶性維生素等類酯化合物。脂肪有兩種存在形式,即游離脂肪和結合脂肪,測定食品中脂肪含量的方法有很多,但大多數采用低沸點溶
用酸水解法怎么測定脂肪
一、目的脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公認的經典方法,也是我國糧油
用酸水解法怎么測定脂肪
一、目的脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公認的經典方法,也是我國糧油
用酸水解法怎么測定脂肪
一、目的脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。脂肪含量的測定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測和核磁共振法等。目前國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公認的經典方法,也是我國糧油
用于PCR的模板DNA制備實驗——直接法(DNA-免提法)
實驗步驟1. 標本太少時,可將一張石蠟切片經脫蠟,水化,蒸餾水清洗,無菌蒸餾水浸泡,取出晾至半干。2. 加入 20~80 μl 直接裂解液中,加 20 mg/ml 蛋白酶 K 0.2~1 μl,放置 55℃ 裂解 3 h 以上;100℃10 min 滅活蛋白酶 K;10000 r/min 離心 10
索氏提取器法操作要點
索氏提取法,又名連續提取法、索氏抽提法,是從固體物質中萃取化合物的一種方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的測定。脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實中,測定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質優劣的一個指標。目前國內外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公認的經
謝瓦格抽提法的方法原理介紹
中文名稱謝瓦格抽提法英文名稱Sevag method定 義一種從核酸中去除蛋白質雜質的方法。系用加有少量異戊醇或辛醇的氯仿溶液對核酸-蛋白質混合物反復振蕩,使蛋白質變性沉淀而被除去。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)