用比較基因組雜交描述染色體結構異常實驗（二）
二、正常男性中期染色體標本的制備1.準備一個封閉環境，其相對濕度約55%(可在50%?60%變化），溫度24?26.5℃。2.將巴斯德吸管置于玻璃載片上方2?4in處，讓一滴細胞懸液滴在玻片的左側。然后迅速將第二滴細胞懸液滴在玻片右側（見注釋7)3.在固定液全部蒸發前，將玻片浸入盛有新鮮固定液的染色缸1?3s，將玻片自染色缸中取出，在如步驟1所述的封閉的濕度/溫度環境中晾干片子。4.在光學顯微鏡T檢查染色體標本的質量。5.染色體標本在室溫下過夜，然后浸入1%福爾馬林中4℃固定5?10min。6.染色體標本系列乙醇脫水，70%、85%和100%乙醇中各2min。7.標本在室溫下晾干，或在實驗室抽風櫥中微風吹過標本使標本快速干燥。8.在室溫儲存標本2?4周。9.用正常參考與正常人樣品或已知不平衡性染色體異常樣品，對其中一張染色體標本片進行CGH分析。三、患者和正常人樣品高分子質量DNA的提取按照生產商提供的說明書進行DNA提取。也可......閱讀全文
用比較基因組雜交描述染色體結構異常實驗（二）
二、正常男性中期染色體標本的制備1.準備一個封閉環境，其相對濕度約55%(可在50%?60%變化），溫度24?26.5℃。2.將巴斯德吸管置于玻璃載片上方2?4in處，讓一滴細胞懸液滴在玻片的左側。然后迅速將第二滴細胞懸液滴在玻片右側（見注釋7)3.在固定液全部蒸發前，將玻片浸入盛有新鮮固定液的染色
用比較基因組雜交描述染色體結構異常實驗
實驗方法原理比較基因組雜交（CGH)是一種能夠在一步全基因組篩查程序，描述G帶不能發現的細胞遺傳物質增加或減少的分子細胞遺傳學技術。CGH優于進行全染色體涂染（wcp)的常規熒光原位雜交（FISH)和多色FISH之處，是它不僅能夠識別增加的未知片段的染色體來源，而且還可將該片段定位于特定的染色體區帶
用比較基因組雜交描述染色體結構異常實驗（三）
六、中期染色體標本的變性1.在染色缸中加入大約50mL變性液，將染色缸放于75?76℃水浴中。預熱變性液使其溫度達到（73±2)℃。2.從-20℃冰箱中取出實驗所需的標本，室溫下系列乙醇脫水，各2min。3.室溫干燥片子（5min)，或在實驗室抽風櫥中微風吹過標本使標本干燥。4.在37?40℃電熱板
用比較基因組雜交描述染色體結構異常實驗（一）
實驗方法原理 比較基因組雜交（CGH)是一種能夠在一步全基因組篩查程序，描述G帶不能發現的細胞遺傳物質增加或減少的分子細胞遺傳學技術。CGH優于進行全染色體涂染（wcp)的常規熒光原位雜交（FISH)和多色FISH之處，是它不僅能夠識別增加的未知片段的染色體來源，而且還可將該片段定位于特定的染色體區
微陣列—比較基因組雜交技術檢測染色體異常
【摘要】近年微陣列一比較基因組雜交(microarraycomparativegenomichybirdization，microarray．CGH)技術被應用到臨床細胞遺傳學領域。該技術是選擇DNA特殊片段作為靶，固化在載體上，形成密集、有序的分子微陣列。然后，從測試標本中提取DNA，將測試DNA
微陣列中期分裂相染色體的比較基因組雜交（CGH）－實驗
染色體 CGH 的獨特優點在于它的全基因篩查功能，與檢測單一靶 DNA 劑量改變的低通量方法，如 Southern 分析、PCR 和熒光原位雜交（FISH) 相比，速度顯著提高且省力。目前染色體 CGH 是一種比較完善的分子細胞遺傳學方法，但是它的兩個缺陷限制其作為一種綜合性篩查工具的應用。來源：《
微陣列中期分裂相染色體的比較基因組雜交（CGH）－實驗
實驗方法原理 實驗材料 高分子質量基因組DNA EcoR I 或 Dpn II試劑、試劑盒 SSCcDNA陣列dNTP 混合液 dCTP 酵母 tRNADNA 聚合酶 I儀器、耗材 Qiaquick PCR 純化試劑盒 BioPrime 標記試劑盒Micrcon 30 濾器雜交爐Maxiprep D
比較基因組雜交方法介紹
比較基因組雜交是將消減雜交、熒光原位雜交相結合，用于檢測DNA序列的拷貝數變異并將其定位在染色體上的方法。CGH?只能檢測不平衡的染色體改變。結構染色體變異，例如：平衡的相互易位或倒位不能被檢測出來，因為拷貝數沒有變化。CGH最初設計是用來檢測單一副本缺失的，所以它的的區帶長度至少5～10Mbarr
比較基因組雜交芯片介紹
比較基因組雜交芯片（Comparative Genomic Hybridization Array）、基于芯片的比較基因組雜交（Microarray-based comparative genomic hybridization）或者陣列比較基因組雜交技術（array comparative g
比較基因組雜交芯片介紹
比較基因組雜交芯片（Comparative Genomic Hybridization Array）、基于芯片的比較基因組雜交（Microarray-based comparative genomic hybridization）或者陣列比較基因組雜交技術（array comparative gen
比較分子生理基因組學－—cDNA陣列的異種雜交實驗（二）
二、方法在開始任何微陣列實驗之前，必須要選定合適的對照和時間點，這樣獲得的數據才有生物學意義。關于如何選擇合適的對照，參見注釋 1 和 2。1 總 R N A 的提取2 R N A 變性凝膠電泳（1）制備一塊 1 % 的瓊脂糖甲醛變性膠，浸沒在 IXM OPS 緩沖液中，膠上的孔應被溶液完全沒過。將
比較基因組雜交技術在腫瘤研究中的應用實驗
比較基因組雜交技術在腫瘤研究中的應用 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 Ham F10 培養基 胎牛血清
比較基因組雜交技術在腫瘤研究中的應用實驗
比較基因組雜交（CGH) 可以提供腫瘤細胞全基因組染色體拷貝數改變的信息 [1]。與常規細胞遺傳學分析不同，CGH 無需細胞培養，因此只要是可以獲得 DNA 的臨床標本，包括存檔的石蠟包埋組織，都可以進行該實驗 ra。CGH 可以在正常染色體上定位擴增或缺失的 DNA 序列，從而顯示出重要基因的位點
全基因組的比較基因組雜交技術介紹
Whole-Genome and Custom Fine-Tiling Array CGHComparative Genomic Hybridization (CGH) measures DNA copy number differences between a reference genome a
關于熒光原位雜交用于染色體數目與結構異常的介紹
在細胞遺傳學檢在中，重復序列的探針應用最多，包括a衛星DNA探針、β衛星DNA探針和經典衛星DNA （elassic -stllite DNA ）探針。a衛星DNA探針主要檢測人染色體的著絲粒。β衛星DNA探針位于頂端著絲粒染色體及染色體的異染色質周圍。經典衛星DNA探針有AATCG短片段重復，
腫瘤的染色體異常（二）
? （1)Ph染色體（費城1號染色體)：Nowell及Hungerford于1960年發現慢性粒細胞性白血病（CML)血中有一個小于G組的染色體，由于首先在美國費城（Philadelphia)發現，故命名為Ph染色體。最初認為是22號染色體的長臂缺失所致，后經顯帶證明是9號和22號染色體長臂易位的結
細胞遺傳學——比較基因組雜交(CGH)
·?????????Comparative Genomic Hybridization (CGH) CGH is a molecular Cytogenetic method of screening a tumor for genetic changes. The alterations are
用母體血進行染色體異常的產前診斷實驗
實驗材料Ficoll 淋巴細胞分離液CD3、CD13 抗體均用生物素標記試劑、試劑盒PBS 溶液臺盼藍溶液. 量化鏈霉親和素磁化稀土FBS溶液FITC 標記的 CD71 膜抗體多聚甲醛carnoy 固定液乙醇溶液儀器、耗材氬離子激光流式細胞儀直標探針實驗步驟展
比較分子生理基因組學－—cDNA陣列的異種雜交實驗
實驗步驟 一、材料 這里用到的所有化學試劑都為分子生物學等級，或者用它們最高純度的等效物。所有的塑料和玻璃制品，包括瓶子和移液器吸頭都要高壓滅菌，在核酸實驗操作過程中必須始終戴手套。 cDNA A T L A S陣列從Clo
比較分子生理基因組學－—cDNA陣列的異種雜交實驗
近幾年來， DNA 微陣列已經被公認是分子生物學研究的一種標準方法。特別是在生物醫學研究方面，常用物種的微陣列一面世就得到廣泛應用。但是對于非模式生物來說 ，微陣列的應用尚未得到充分開展，而這些物種往往表現出一些很有趣的生理表型。對大多數比較生物學的研究者來說，制備一個新物種的 D N A 陣列或微
植物整體結構的研究和異常結構的觀察實驗（二）
(2)根－莖連接取大豆、黃瓜和曼陀羅等任一種植物的幼苗，先區分幼苗的子葉、真葉、下胚軸、上胚軸和根，然后自根部開始，向上胚軸方向做徒手橫切片，每隔 1-2mm取一切片，按順序將切片逐一放于載玻片上（材料可擺放 2-3 排，容納不下時可放在另一張載玻片上）。然后加上鹽酸和間苯三酚溶液，待木
比較分子生理基因組學－—cDNA陣列的異種雜交實驗（一）
實驗步驟 一、材料這里用到的所有化學試劑都為分子生物學等級，或者用它們最高純度的等效物。所有的塑料和玻璃制品，包括瓶子和移液器吸頭都要高壓滅菌，在核酸實驗操作過程中必須始終戴手套。 cDNA A T L A S陣列從Clontech購得。人 19K cDNA 陣列從Ontario 癌癥研究所購得
常染色體結構異常的主要類型
（1）5P-綜合癥：因患兒哭聲似貓叫故亦稱“貓叫綜合征”，在其5號染色體上短臂部分缺失。有頭小、眼距寬、眼裂外側下傾、耳位低，通貫手等多種畸形，約一半患者有先天性心臟病，智力低下，生活能力差，常早亡。 （2）4P-綜合征：類似5P-綜合癥，但常更為加重，還可呈尿道下裂，腭裂、嚴重的精神及運動障
概述X染色體的結構異常的內容
常見的X染色體結構異常有各種缺失、易位和等臂染色體。它們的臨床表現多樣，主要取決于涉及X染色體上的哪些區段異常，因為不同的區段載有的基因不同，缺失導致的癥狀也不同。Wyss等曾作一Turner綜合征的核型與癥狀關系圖。有助于了解X染色體結構異常的表現。 （1）X短臂缺失（XXp-）：Xp遠端缺
原位雜交儀—原位雜交實驗（二）
原位雜交第二天 1. 1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復使用十次左右）。 2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。 3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。 4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。
染色體異常的實驗室檢查
⒈Down綜合征血清學檢查可見血清素降低、白細胞中堿性、磷酸酶增高、紅細胞二磷酸葡萄糖增高、過氧化物歧化酶增高50%、但與患者發育異常及智力低下無關。 ⒉約1/3的Down綜合征患兒母親在妊娠4～6個月時血清甲胎蛋白含量增高，血清絨毛膜促性腺激素含量增高、雌三醇含量降低，可提示胎兒Down綜合
基本方案1－應用直接標記－DNA－比較基因組雜交
實驗方法原理實驗材料熒光素標記的待測探針 DNA德克薩斯紅標記的參照 DNA試劑、試劑盒乙酸鈉乙醇主要的雜交溶液正常人染色體鋪片變性液蛋白酶 K 溶液雜交片洗液2 X SSCPN 緩沖液DAPI 的抗淬滅溶液儀器、耗材玻璃刀水浴箱玻片加熱器橡皮膠帶濕盒實驗步驟展開
染色體結構變異實驗
實驗方法原理：染色體結構變異主要有缺失、重復、倒位、易位四種。其發生過程是由于同源染色體或非同源染色體之間發生斷裂，然后發生錯誤重接的結果。各種結構變異的雜合體，在細胞分裂過程中常常表現不正常的細胞學行為，可以進行細胞學鑒定。在減數分裂過程粗線期，可以觀察到缺失雜合體的“缺失環”，重復雜合體的染色體
染色體結構變異實驗
實驗方法原理染色體結構變異主要有缺失、重復、倒位、易位四種。其發生過程是由于同源染色體或非同源染色體之間發生斷裂，然后發生錯誤重接的結果。各種結構變異的雜合體，在細胞分裂過程中常常表現不正常的細胞學行為，可以進行細胞學鑒定。在減數分裂過程粗線期，可以觀察到缺失雜合體的“缺失環”，重復雜合體的染色體突
染色體結構變異實驗
實驗方法原理?染色體結構變異主要有缺失、重復、倒位、易位四種。其發生過程是由于同源染色體或非同源染色體之間發生斷裂，然后發生錯誤重接的結果。各種結構變異的雜合體，在細胞分裂過程中常常表現不正常的細胞學行為，可以進行細胞學鑒定。在減數分裂過程粗線期，可以觀察到缺失雜合體的“缺失環”，重復雜合體的染色體