培養細胞染色體顯示法實驗
實驗方法原理 培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材 酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟 1. 培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；2. 加秋水仙素使用最終濃度為0.02～0.8 μg/ml營養液；溫箱繼續培養6～10 小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4 ℃條件下6～12 小時后，再于37 ℃溫箱中繼續培養6～10 小時處理（加秋水仙素）；3. 采集分裂細胞可利用分裂中期細胞體變圓與底物附著不牢特點，此時手持培養瓶，左右反復橫向水平搖動，令培養液在培養細胞表面反復沖涮；應用此法可使90 %的中期分裂細胞從瓶壁脫落；注意勿用力過猛，以防多量非分裂細胞脫落影響觀察；4. 離心收集培養液，1000 轉/分鐘，離心5～10......閱讀全文
培養細胞染色體顯示法實驗
實驗方法原理 培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料 細胞試劑、試劑盒 HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材 酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟 1. ?培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；
培養細胞染色體顯示法實驗——傳代培養細胞染色體顯示法
實驗方法原理培養細胞有來源易得、細胞分裂率高和制出標本清晰度高等優點，是制備染色體極好的對象。實驗材料細胞試劑、試劑盒HanksNaHCO3培養基血清秋水仙素儀器、耗材酒精燈鑷子培養瓶吸管離心管實驗步驟1. ?培養細胞取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80 %～90 %匯合單層培養細胞；2. ?加
細胞培養染色體顯示法
?1）? 傳代培養細胞染色體顯示法??? 1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。??? 2．加秋水仙素：使用終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱繼續培養6
傳代培養細胞染色體顯示法
實驗概要? ? ? ? ?傳代培養細胞染色體顯示法實驗步驟1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。2．加秋水仙素：使用最終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱
傳代培養細胞染色體顯示法
1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。2．加秋水仙素：使用zui終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱繼續培養6～10小時處理（加秋水仙素）。3．采集分裂細
傳代培養細胞染色體顯示法步驟
1.培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80%~90%匯合單層培養細胞。 2.加秋水仙素：使用最終濃度為0.02~0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6~10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6~12 小時后，再于37℃溫箱繼續培養6~10小時處理（加秋水仙素）。 3.
細胞培養染色體顯示
1）??傳代培養細胞染色體顯示法1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。2．加秋水仙素：使用最終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱繼續培養6～10小時處理（
細胞培養染色體顯示
實驗概要掌握細胞培養染色體顯示實驗方法。實驗步驟1. 傳代培養細胞染色體顯示法?? 1) 培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。?? 2) 加秋水仙素：使用最終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃
人末梢血微量全血培養染色體顯示法
實驗概要? ? ? ? 人末梢血微量全血培養染色體顯示法實驗步驟1．培養液準備：取15ml培養瓶數個，每瓶內分別充入5ml培養液（pH 7.2），內含：1640培養液（含10％～15％小牛血清），PHA 0.1ml，青霉素100單位和鏈霉素100微克/毫升?培養液2．抽血針管準備：取2～5ml針管一
特殊細胞培養實驗_懸浮培養法
實驗方法原理懸浮培養是使貼附性細胞呈懸浮狀態生長。如所培養的細胞本身屬懸浮生長類型，則無須做任何處理，在傳代時先做離心處理去除舊培養液，添加新培養液即可。但在培養貼附型細胞時，因其有貼附性，必須進行干擾使細胞不能貼附，才能形成懸浮狀態生長的細胞。實驗材料細胞儀器、耗材培養瓶攪拌器實驗步驟1. ?用大
特殊細胞培養實驗_單細胞分離培養法
實驗方法原理從理論上說各種培養細胞都可用以進行克隆培養。但實際上，初代培養細胞和有限細胞系（二倍體細胞）比較困難。無限細胞系、轉化細胞系和腫瘤細胞等則比較容易。其原因是，當體內任何細胞被置于體外培養后，對培養環境都有一個適應過程。期間細胞對營養液具有同化作用，即從培養液中攝取營養的同時，也向培養液排
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料細胞實驗步驟1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，離心
體外培養細胞的染色體標本制備實驗
實驗材料?細胞實驗步驟?1． 體外培養的細胞，在倒置鏡下觀察到有較多的分裂細胞（傳代后24h，圓形發亮的細胞）時，加入秋水仙素溶液，終濃度為0.3μg/ml培養液；?2． 繼續培養3h；?3． 胰酶消化收集細胞至離心管；?4． 離心1000轉/min，離心10min，去上清；?5． Hanks液洗，
初代細胞培養實驗——消化培養法
初代培養或原代培養，可以用于：（1）從供體獲取組織后的首次培養；（2）組織和細胞剛剛離體，生物性狀尚未發生很大的變化，具有二倍體遺傳性狀，在供體來源充分、生物條件穩定的情況下（年齡、性別），在一定程度上能反映體內狀態。實驗方法原理合成培養基胰蛋白酶消化培養法，能把組織塊分散成細胞團或單個細胞，便于細
腫瘤細胞原代培養實驗——脫落細胞法
實驗方法原理脫落細胞法是指采集人體各部位，特別是管腔器官表面的脫落細胞進行培養。實驗材料腫瘤組織試劑、試劑盒完全培養基洗滌液儀器、耗材刀片培養箱培養皿實驗步驟一、將新鮮的腫瘤組織去除脂肪和結締組織。二、洗液洗2次后，用刀片將腫瘤組織切成細薄片。三、在切割的同時有許多上皮細胞脫落下來，脫落細胞經洗滌后
特殊細胞培養實驗_微載體細胞培養法
實驗方法原理微載體細胞培養開始于60年代末期，最早使用離子交換凝膠作為載體，輕微攪動即可懸液在培養基中，因而可增加細胞附著的面積，達到大量培養細胞的目的。后來，根據細胞附著生長的特點，對微載體進行了改良，使其帶有電荷或其它介質，更利于細胞附著和生長。這一方法亦可用于常規量的培養，也可用于大規模的培養
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒 完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）培養基100 X 植物血凝素氨甲蝶呤 脫氧胸嘧啶核苷秋水仙素氯化鉀固定劑儀器、耗材 無菌錐形聚丙烯
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
盡管從其他細胞也可以制備染色體，但人類外周血白細胞是最容易同步化的，從而可以對其染色體進行高分辨分析。實驗材料用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ml) 的注射 器獲取肝素化的全血試劑、試劑盒完全的 RPMI 10% FBS (胎牛血清）
經培養外周血細胞的染色體制備實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 用 Vacutainer (BectonDickinson) 或加有不含防腐劑的肝素納.（25U ?ml) 的注射 器 獲取肝素化的全血 試
細胞原代培養實驗——組織塊直接培養法
實驗材料孕鼠新生小鼠試劑、試劑盒RPMI1640培養基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素鏈霉素儀器、耗材培養瓶青霉素瓶廢液缸血球計數板蠟盤手術器械大頭針離心管小玻璃漏斗三角燒瓶平皿吸管試管移液管無菌紗布無菌眼科剪實驗步驟?一、將孕鼠或新生小鼠拉頸椎致死，置75%酒精泡2-3秒鐘（時間不能過長、以免
病毒的培養方法實驗——傳代細胞培養法
實驗方法原理從人及動物某些組織，特別是腫瘤組織，經多次傳代可建立傳代細胞系，這種細胞能無限地傳代，某些傳代細胞對病毒敏感范圍較廣，可用作病毒的分離鑒定，如HeLa 細胞，Hep-2 細胞及KB 細胞。三種細胞均來自人腫瘤組織細胞，HeLa 細胞來自子宮頸癌，Hep-2 細胞來自喉癌而KB 細胞來自上
初代細胞培養實驗——組織塊培養法
實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊（1cm3）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止；2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養
氮艙減壓法裂解培養細胞實驗
實驗方法原理 通過來自增壓艙中的氮氣減壓膨脹來破碎細胞是一種快速、有效的細胞和組織的勻漿方法，能釋放完整的細胞器和制備細胞膜。該方法的原理很簡單：細胞放在一個壓力艙中，在高壓下（約5500kPa，相當于800psi)氮氣首先被溶解在細胞中，當壓力突然消失時，氮從溶液中迅速氣化，并引起細胞膜的拉伸和擴
氮艙減壓法裂解培養細胞實驗
實驗方法原理通過來自增壓艙中的氮氣減壓膨脹來破碎細胞是一種快速、有效的細胞和組織的勻漿方法，能釋放完整的細胞器和制備細胞膜。該方法的原理很簡單：細胞放在一個壓力艙中，在高壓下（約5500kPa，相當于800psi)氮氣首先被溶解在細胞中，當壓力突然消失時，氮從溶液中迅速氣化，并引起細胞膜的拉伸和擴展
氮艙減壓法裂解培養細胞實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過來自增壓艙中的氮氣減壓膨脹來破碎細胞是一種快速、有效的細胞和組織的勻漿方法，能釋放完整的細胞器和制備細胞膜。該方法的原理很簡單：細
特殊細胞培養實驗_加支持物培養法
實驗方法原理加支持物培養法是預先向培養容器中加入各種可使細胞貼附的支持物，進行培養的方法。待細胞貼附于支持物生長增殖后，可進行各種實驗和觀察。觀察時可把支持物從瓶中抽出，能做各種技術處理，是研究工作中常用的方法之一。各種對細胞無毒性的如玻璃、塑料、雞卵殼膜、膠原、硅橡膠、袋泡茶包裝紙等，均可做支持物
病毒的培養方法實驗—組織培養法原代細胞單層培養
實驗方法原理組織培養是目前培養病毒應用最廣的一種培養方法，其優點是①經濟適用，結果正確且敏感；②較實驗動物易于控制。原代細胞單層培養法，是指動物（包括脊椎動物和無脊椎動物）的組織自機體取出后，經胰酶或其他細胞分散劑消化處理，得到單個細胞懸液。以一定量接種到特定容器中，加入細胞生長所必需的營養液，置合
培養細胞染色體顯色法
培養細胞染色體顯示法1）??傳代培養細胞染色體顯示法1．培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80％～90％匯合單層培養細胞。2．加秋水仙素：使用最終濃度為0.02～0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6～10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6～12小時后，再于37℃溫箱繼續培
特殊細胞培養實驗_多孔塑料培養板單細胞克隆法
實驗方法原理多孔塑料培養板克隆細胞的主要過程是1. ?制備出1~2 細胞/毫升低密度的細胞懸懸液；2. ?向多孔塑料培養板各孔中分別接種細胞懸液0.5~1 ml，則每孔平均含1 個細胞。3. ?鏡下檢測每孔所含細胞數，標記下含單細胞的孔，置溫箱培養，數日后凡在已標記的孔中有生長增殖的細胞群即為克隆細
家兔椎間盤細胞培養實驗——貼塊法
家兔椎間盤細胞培養可以：（1）獲得家兔椎間盤細胞；（2）用于椎間盤相關課題研究；（3）用于家兔模型研究。實驗方法原理首先建立家兔椎間盤細胞的體外培養系統，其中，第一組給予純氧，另外3組給予不同濃度的臭氧：30 ug/ml，60 ug/ml和80 ug/ml，然后于15 min及30 min后，采用臺