細胞凋亡綜述1
細胞程序性死亡是正常生理現象，多發生于胚胎發育和維持組織自身平衡。Kerr et al.最早發現有兩種細胞死亡：壞死（Necrosis）和凋亡（Apoptosis）。Apoptosis，希臘文意思是樹葉從樹上“凋落”，這里是指凋亡，是細胞主動參與自身死亡的過程。凋亡程序有一些特殊形態學特征，包括質膜的改變，如細胞膜不對稱性和細胞附著消失，胞漿和細胞核固縮，核內DNA裂解。到了晚期，凋亡細胞斷裂成“凋亡小體”，并很快被巨噬細胞清除，而不會引起周圍細胞的炎癥損傷。壞死，通常是由細胞損傷或細胞毒物作用引起，在形態學和細胞生物特性上，與凋亡有著本質的區別。壞死細胞的早期變化是細胞和線粒體腫脹，繼而細胞膜破壞。不同于凋亡的是，壞死的細胞胞質內容物（多為蛋白水解酶）釋放，會引起周圍組織的炎癥反應。病理情況會引起細胞異常凋亡，如Alzheimer氏綜合癥、Hodgkin氏綜合癥、移植物抗宿主性疾病、移植排斥、自身免疫性疾病、腫瘤、AIDS......閱讀全文
細胞凋亡綜述1
細胞程序性死亡是正常生理現象，多發生于胚胎發育和維持組織自身平衡。Kerr et al.最早發現有兩種細胞死亡：壞死（Necrosis）和凋亡（Apoptosis）。Apoptosis，希臘文意思是樹葉從樹上“凋落”，這里是指凋亡，是細胞主動參與自身死亡的過程。凋亡程序有一些特殊形態學特征，包括
細胞凋亡的檢測方法綜述1
一、形態學檢測（一）光學顯微鏡和倒置顯微鏡 1、未染色細胞凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。 2、染色細胞常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、染色質分割成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態。
綜述：細胞凋亡（一）
人體內的細胞注定是要死亡的，有些死亡是生理性的，有些死亡則是病理性的，有關細胞死亡過程的研究，近年來已成為生物學、醫學研究的一個熱點，到目前為此，人們已經知道細胞的死亡起碼有兩種方式，即細胞壞死與細胞凋亡。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式，而細胞凋亡則是近年逐漸被認識的一種細胞死亡方式，
綜述：細胞凋亡（三）
細胞凋亡與醫學 1．免疫學： 1）胸腺細胞成熟過程中的凋亡：胸腺細胞經過一系列的發育過程而成為各種類型的免疫活性細胞。在這一發展過程中，涉及了一系列的陽性細胞選擇和陰性細胞選擇過程。以形成CD4+的T淋巴細胞亞型及CD8+的T淋巴細胞亞型；同時，對識別自身抗原的T細胞克隆進行選擇性地消除，其細胞
細胞凋亡綜述4
2、所有Caspase先以無活性的酶原（procaspase）的形式合成，其激活過程包括：①二聚體化②caspase自身序列裂解成小亞其和大亞基③除去prodomain。3、最早發現的 caspase 為IL-1β轉化酶 (ICE=caspase-1) 它將 pro-IL-1 前體裂解成其活性形式。
綜述：細胞凋亡（二）
細胞凋亡的過程及機理 細胞凋亡的過程大致可分為以下幾個階段：接受凋亡信號→凋亡調控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→進入連續反應過程 1．凋亡的啟動階段細胞凋亡的啟動是細胞在感受到相應的信號刺激后胞內一系列控制開關的開啟或關閉，不同的外界因素啟動凋亡的方式不同，所引起的信號轉
綜述：細胞凋亡（四）
5 線粒體在細胞凋亡作用中的進一步證據 ?(1)若將純化的正常的線粒體與純化的細胞核在一起保溫，并不導致細胞核的變化。但若將誘導生成PT孔道的線粒體與純化的細胞核一同保溫，細胞核即開始凋亡變化。(2)細胞死亡調節蛋白不論是抑制死亡的bcl-2家族還是促進細胞死亡的Bax家族均以線粒體作為靶細胞器
細胞凋亡綜述3
二、凋亡的生理功能1、維持組織穩態平衡（homeostasis）,通過干細胞分裂產生新細胞的同時，選擇性地除去那些損傷的或老的或多余的細胞。2、清除不需要的免疫細胞。3、神經元發育4、個體發育三、凋亡細胞的形態學和生化特征1、細胞皺縮（shrinkage）2、質膜出泡（blebbing）3、染色質濃
細胞凋亡綜述2
在凋亡早期，活化的Caspase-3是主要的功能蛋白酶。凋亡細胞內，32kD的原酶裂解為17kD和12kD的亞單位，兩個亞單位組成二聚體，即活化的Caspase-3，活化的Caspase-3進一步水解活化其它Caspase酶及胞漿內目標（如D4-GDI）和核內目標（如PARP）。Bcl-2家族Bcl
細胞凋亡的檢測方法綜述5
4、檢測細胞膜成分變化的Annexin V 聯合PI法原理：磷脂酰絲氨酸（Phosphatidylserine， PS）正常位于細胞膜的內側，但在細胞凋亡的早期，PS可從細胞膜的內側翻轉到細胞膜的表面，暴露在細胞外環境中（圖3）。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂
細胞凋亡的檢測方法綜述4
DNA聚合酶或Klenow大片段介導的原位缺口平移（ISNT）切片常規脫蠟，梯度乙醇復水化。將切片組織浸入2×SSC液中，80℃，20min，然后蒸餾水沖盡。0.5%胃蛋白酶（pH2.0）37℃消化0～20min，PBS洗盡。用濾紙擦干組織塊周邊液體放入濕盒組織切片上滴加緩沖液A，5min。緩沖液A
細胞凋亡的檢測方法綜述3
4、DNA 5’末端32P標記（1）將脫磷酸樣品DNA置冰浴上，再加雙蒸水10μl，10×緩沖液2μl，T4多核苷酸激酶10U，32P-ATP 740kBq（20μCi），雙蒸水加至20μl。（2）混合后，37℃水浴60min。（3）加入1μl的0.5mol/L EDTA，90℃滅活5min。5、觀
細胞凋亡的檢測方法綜述2
方法三（1）收集細胞懸液（106細胞），低速離心（1000r/min，離心5min）。（2）去上清，沉淀加0.4ml低滲緩沖液作用1h。（3）13 000r/min，離心10min，將上清轉移至另一Eppendorf管中，加等量50％異丙醇和0.5mol/L NaCl混勻，置液氮5min。（4）12
細胞凋亡（apoptosis）的檢測1
細胞凋亡（apoptosis）是一種由基因控制的細胞自主性死亡方式。其發生誘因及形態學特征均有別于壞死，與人類免疫系統的發生發展、神經組織發育、器官的形成、腫瘤的發生發展等諸多生物學現象之間有著密切聯系，并且是免疫應答過程中免疫細胞的殺傷機制之一。細胞凋亡的檢測技術已成為免疫學檢測的一個重要內容。凋
細胞凋亡及其檢測技術1
細胞凋亡又稱程序性細胞死亡（PCD）,是細胞衰老自然死亡的主要方式之一，在機體中承擔著重要的調控作用。它不僅在維持細胞群體數量的穩定、胚胎發育和免疫系統的克隆選擇方面，而且在腫瘤發生、發展、抗腫瘤藥物的治療等方面具有十分重要的作用。細胞凋亡是由基因編程控制的細胞主動參與的自殺過程沒事一種生理性調節機
細胞凋亡檢測操作流程三JC1檢測凋亡細胞線粒體膜電...
細胞凋亡檢測操作流程三--JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變凋亡檢測操作流程??三、JC-1檢測凋亡細胞線粒體膜電位改變BD? MitoScreen (JC-1)線粒體膜電位檢測試劑盒（551302）：組分描述JC-1(染料)4瓶，每瓶用于25個樣本。凍干粉，使用前稀釋至儲存液（Stock Sol
細胞凋亡的免疫檢測技術1
一、概述 細胞凋亡（apoptosis,Apo）是細胞增殖的反面，探討的是細胞死亡的方式與機制。凋亡一詞來源于希臘語。原指花瓣、葉片的脫落。自1972年Kerr首次提出細胞凋亡的概念以來，隨著細胞生物學、免疫學和腫瘤學的研究發展，最近幾年人們對細胞凋亡的重大理論意義和實際意義有了更深的理解。細胞
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡，乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此，有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
細胞凋亡的細胞凋亡檢測
細胞凋亡在胚胎發育、造血、免疫系統的成熟以及維護正常組織和器官的細胞恒定與生長平衡，乃至機體衰老方面都起著重要作用。因此，有關凋亡的研究在臨床和基礎等各個領域已經廣泛開展,凋亡細胞的檢測方法顯得非常重要。流式細胞儀( Flow cytometry ,FCM) 將流體噴射技術、激光光學技術、電子技術和
細胞凋亡小體和梯狀DNA的觀察(1)
一、實驗目的 1 掌握誘導細胞凋亡和觀察細胞凋亡小體的方法 2 掌握DNA電泳檢測方法，證明凋亡細胞DNA Ladder的存在。 細胞死亡作為生物體的一種常見現象，一般可分為兩種類型：細胞壞死（necrosis）和細胞程序性死亡（programmed cell death，PCD）。后者也
細胞凋亡，細胞凋亡通路和細胞凋亡檢測的幾種檢測方法
一、形態學觀察方法 1、HE染色、光鏡觀察：細胞凋亡后呈圓形，胞核深染，胞質濃縮，染色質成團塊狀，細胞表面有“出芽”現象。 2、丫啶橙(AO)染色，熒光顯微鏡觀察：活細胞核呈黃綠色熒光，胞質呈紅色熒光。細胞凋亡|后（細胞凋亡,細胞凋亡通路，細胞凋亡檢測）核染色質呈黃綠色濃聚在核膜內側
細胞凋亡信號通路相關基因介紹AKT1
AKT1基因編碼的是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，可通過磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）依賴的機制被胞外信號激活，目前發現AKT家族有三個成員，分別為AKT1/PKBα、AKT2/PKBβ和AKT3/PKBγ。，AKT則是PI3K/AKT信號通路中核心因子，PI3Ks能特異性磷酸化磷脂酰肌醇（PI）的3位羥基
細胞凋亡信號通路相關基因介紹PRKAR1A
camp是一種重要的細胞功能信號分子。camp通過激活camp依賴性蛋白激酶發揮其作用，后者通過不同靶蛋白的磷酸化來傳遞信號。失活激酶全酶是由兩個調節亞基和兩個催化亞基組成的四聚體。camp導致失活的全酶分解成一個二聚體的調控亞基，與四個camp和兩個游離的單體催化亞基結合。四種不同的調節亞基和三種
細胞凋亡信號通路相關基因介紹PDK1
丙酮酸脫氫酶（pdh）是一種催化丙酮酸氧化脫羧的線粒體多酶復合物，是哺乳動物體內調節碳水化合物燃料穩態的主要酶之一。酶活性由磷酸化/去磷酸化循環調節。丙酮酸脫氫酶激酶（pdk）磷酸化pdh導致失活。已發現該基因的多個選擇性剪接轉錄變體。[由RefSeq提供，2013年6月]Pyruvate dehy
細胞凋亡信號通路相關基因介紹TOP1
這個基因編碼一種DNA拓撲異構酶，這種酶在轉錄過程中控制和改變DNA的拓撲狀態。這種酶催化單鏈DNA的瞬間斷裂和重新結合，使單鏈DNA彼此穿過，從而改變DNA的拓撲結構。該基因定位于20號染色體，并具有位于1號和22號染色體上的假基因。This gene encodes a DNA topoisom
早期凋亡細胞和.晚期凋亡細胞的區別
細胞凋亡：細胞的編程性死亡，由基因控制的。是由于細胞內部程序激活而發生的自殺性死亡。涉及一系列基因的激活、表達、調控，在非病理的條件下進行。細胞衰老：隨著時間的推移，細胞增殖能力和生理功能逐漸下降的變化過程。細胞在形態上發生明顯變化，細胞皺縮，質膜透性和脆性提高，線粒體數量減少，染色質固縮、斷裂等。
早期凋亡細胞和.晚期凋亡細胞的區別
細胞凋亡：細胞的編程性死亡，由基因控制的。是由于細胞內部程序激活而發生的自殺性死亡。涉及一系列基因的激活、表達、調控，在非病理的條件下進行。細胞衰老：隨著時間的推移，細胞增殖能力和生理功能逐漸下降的變化過程。細胞在形態上發生明顯變化，細胞皺縮，質膜透性和脆性提高，線粒體數量減少，染色質固縮、斷裂等。
早期凋亡細胞和.晚期凋亡細胞的區別
細胞凋亡：細胞的編程性死亡，由基因控制的。是由于細胞內部程序激活而發生的自殺性死亡。涉及一系列基因的激活、表達、調控，在非病理的條件下進行。細胞衰老：隨著時間的推移，細胞增殖能力和生理功能逐漸下降的變化過程。細胞在形態上發生明顯變化，細胞皺縮，質膜透性和脆性提高，線粒體數量減少，染色質固縮、斷裂等。
早期凋亡細胞和晚期凋亡細胞的區別
細胞凋亡：細胞的編程性死亡，由基因控制的。是由于細胞內部程序激活而發生的自殺性死亡。涉及一系列基因的激活、表達、調控，在非病理的條件下進行。細胞衰老：隨著時間的推移，細胞增殖能力和生理功能逐漸下降的變化過程。細胞在形態上發生明顯變化，細胞皺縮，質膜透性和脆性提高，線粒體數量減少，染色質固縮、斷裂等。
micro－RNA(miRNA)綜述1
RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”，但越來越多的證據清楚的表明，RNA在生命的進程中扮演的角色遠比RNA我們早前設想的更為重要。RNA干擾（RNA interference）的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識，更因為可以簡化替代基因敲除而成為研究基因功能的