Folin酚法的標準曲線測定法概述
取16支大試管,1支作空白,3支留作未知樣品,其余試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升標準蛋白質溶液(濃度為250mg/ml)。用水補足到1.0毫升,然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置10分鐘。再逐管加入0.5毫升試劑乙(Folin—酚試劑),同樣立即混勻。這一步混合速度要快,否則會使顯色程度減弱。然后在室溫下放置30分鐘,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,于700nm處測定各管中溶液的吸光度值。以蛋白質的量為橫坐標,吸光度值為縱坐標,繪制出標準曲線。 注意:因Lowry反應的顯色隨時間不斷加深,因此各項操作必須精確控制時間,即第1支試管加入5毫升試劑甲后,開始計時,1分鐘后,第2支試管加入5毫升試劑甲,2分鐘后加第3支試管,余此類推。全部試管加完試劑甲后若已超過10分鐘,則第1支試管可立即加入0.5毫升試劑乙,1分鐘后第2支試管......閱讀全文
Folin酚法的標準曲線測定法概述
取16支大試管,1支作空白,3支留作未知樣品,其余試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升標準蛋白質溶液(濃度為250mg/ml)。用水補足到1.0毫升,然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置10分鐘。再逐管加入0.5
概述Folin酚法的實驗原理
這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(可訂購),逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。 此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在
概述Folin酚法的樣品的測定內容
取1毫升樣品溶液(其中約含蛋白質20~250微克),按上述方法進行操作,取1毫升蒸餾水代替樣品作為空白對照。通常樣品的測定也可與標準曲線的測定放在一起,同時進行。即在標準曲線測定的各試管后面,再增加3個試管。如上表中的8、9、10試管。 根據所測樣品的吸光度值,在標準曲線上查出相應的蛋白質量,
Folin酚法的實驗原理
這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(可訂購),逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深藍色的原因是:在堿性條件
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Folin-酚法(Lowry法)最靈敏的蛋白質測定方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。最早由Lowry確定了蛋白質濃度測定的基本步驟。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。
Folin酚法的用途和功效
Folin-酚法(Lowry法)最靈敏的蛋白質測定方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難,近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。最早由Lowry確定了蛋白質濃度測定的基本步驟。以后在生物化學領域得到廣泛的應用。
關于Folin酚法應用試劑的介紹
試劑 (1)試劑甲(A,B): (A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。 (B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。
Folin酚法的實驗操作方法
標準曲線測定取16支大試管,1支作空白,3支留作未知樣品,其余試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升標準蛋白質溶液(濃度為250mg/L)。用水補足到1.0毫升,然后每支試管加入5毫升試劑甲,在旋渦混合器上迅速混合,于室溫(20~25℃)放置10分鐘。再逐管加入
Folin酚試劑法的優缺點有哪些
優點:靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多。缺點:費時間較長,要精確控制操作時間,標準曲線也不是嚴格的直線形式,且專一性較差,干擾物質較多。對雙縮脲反應發生干擾的離子,同樣容易干擾folin-酚反應(Lowry反應)。而且對后者的影響還要大得多。
Folin酚法的實驗所需試劑與器材
試劑(1)試劑甲(A,B):(A) 10克 Na2CO3,2克 NaOH和0.25克酒石酸鉀鈉?(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸餾水中。(B) 0.5克硫酸銅(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸餾水中,每次使用前,將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲。(2)試劑乙:在
為什么酚標準曲線會彎曲
彎曲很正常,因為是做實驗得出來的數據,是數據就有誤差,但是總體來看還是直的酚,是羥基(-OH)與芳烴核(苯環或稠苯環)直接相連形成的有機化合物。羥基直接和芳烴核(苯環或稠苯環)的sp2雜化碳原子相連的分子稱為酚,這種結構與脂肪烯醇有相似之處,故也會發生互變異構,稱為酚式結構互變。但是,酚的結構較為穩
蛋白質含量的測定:Folin酚試劑法(Lowry法)和考馬斯...
蛋白質含量的測定—Folin-酚試劑法(Lowry法)和考馬斯亮藍法 1.學習Folin-酚法測定蛋白質含量的原理和方法。 2. 進一步掌握分光光度法——求標準曲線、準確測定未知樣品、正確使用儀器。 ? 原理 ? 蛋白質濃度可以從它們
bca法標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線 然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。實驗試劑① 試劑A,1
什么是標準曲線法
標準曲線法也稱外標法或直接比較法,是一種簡便、快速的定量方法.與分光光度分析中的標準曲線法相似,首先用欲測組分的標準樣品繪制標準曲線.具體方法是:用標準樣品配制成不同濃度的標準系列,在與待測組分相同的色譜條件下,等體積準確進樣,測量各峰的峰面積或峰高,用峰面積或峰高對樣品濃度繪制標準曲線,此標準曲線
bca法標準曲線公式
bca法標準曲線公式:z =(sin(3.5*theta-90))+24*t。用標準的已知濃度的BSA溶液配幾管不同濃度的,然后在分光光度計上測出來,把讀數跟已知的濃度做一個曲線(有可能是直線),這就是標準曲線 然后再測你的目標樣品的濃度,用讀數在標準曲線上找到對應的真實濃度。實驗試劑① 試劑A,1
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標準曲線法和標準加入法,如何區分
在分析化學中,特別是儀器分析實驗中,經常用某物質已校正的標準曲線來求相應物質的未知濃度。標準曲線通常是一條過原點的直線,被測組分含量可從標準曲線上求得。以分光光度計法為例,某特定波長的光經過某物質,可以被該物質吸收、反射等,并且其濃度(c)與吸光度(A)之間在一定濃度范圍內符合朗伯-比爾定律。但有時
蛋白質含量測定法福林酚法(Lowry法)
本法系依據蛋白質分子中含有的肽鍵在堿性溶液中與Cu2+螯合形成蛋白質-銅復合物,此復合物使酚試劑的磷鉬酸還原,產生藍色化合物,同時在堿性條件下酚試劑易被蛋白質中酪氨酸、色氨酸、半胱氨酸還原呈藍色反應。在一定范圍內其顏色深淺與蛋白質濃度呈正比,以蛋白質對照品溶液作標準曲線,采用比色法測定供試品中蛋
標準曲線法和標準加入法有什么不同
標準曲線法:最常用的定量方法具體做法:采用相同的處理方式配制一系列已知濃度(c1
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外標法和標準曲線法的區別
外標法和標準曲線法的區別為:外標法:是與內標法相對,指按梯度添加一定量的標準品(對照品)于空白溶劑中制成對照樣品,與未知試樣平行地進行樣品處理并檢測。不同濃度的標準品進樣,以峰面積為值繪制成標準曲線,從而推算出未知試樣中被測組分濃度的定量方法。標準曲線法:也稱外標法或直接比較法,是一種簡便、快速的定
蛋白質含量測定實驗
folin—酚試劑法 考馬斯亮藍法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(
Folin酚試劑法測定蛋白質含量
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關于標準曲線法的定量方法介紹
標準曲線法,也稱外標法或直接比較法,是一種簡便、快速的定量方法。與分光光度分析中的標準曲線法相似,首先用欲測組分的標準樣品繪制標準曲線。 用標準樣品配制成不同濃度的標準系列,在與待測組分相同的色譜條件下,等體積準確進樣,測量各峰的峰面積或峰高,用峰面積或峰高對樣品濃度繪制標準曲線,此標準曲線應
原子吸收標準曲線法測含量
用標準曲線法及標準管法測定物質含量方法如下:1、標曲必須每次都得做。因為儀器自身的性能會影響到標曲的。2、得看樣品的穩定性之類的因素。碰上在溶液中放一年也不變化的,3、碰上生物樣品的話,還在是每次做含量測定前,老老實實的做一下標曲。
怎么用標準曲線法求含量
標準曲線是直角坐標中一條通過原點的直線,縱坐標為儀器相應信號(吸光光度法中為吸光度A),橫坐標是對應的溶液中(吸光)物質的濃度。我們測定了未知樣品中的A值,可在坐標系直線上找到對應的濃度值。由此按照原液稀釋倍數等計算出原液的濃度或含量。
原子吸收標準曲線法測含量
用標準曲線法及標準管法測定物質含量方法如下:1、標曲必須每次都得做。因為儀器自身的性能會影響到標曲的。2、得看樣品的穩定性之類的因素。碰上在溶液中放一年也不變化的,3、碰上生物樣品的話,還在是每次做含量測定前,老老實實的做一下標曲。
內標法需要做標準曲線嗎
對建立的方法進行驗證時必須做標準曲線。需要注意的是內部法的標準曲線是樣品濃度對樣品與內標的風面積之比的直線回歸。
蛋白質含量測定實驗——folin—酚試劑法
蛋白質含量測定實驗可以用于:(1)測定蛋白質濃度;(2)檢測所提取的蛋白質含量。實驗方法原理這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由于其試劑乙的配制較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即f