PCR技術的原理
PCR原理：DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：①模板DNA的變性：模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；②模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈。重復循環變性--退火--延伸三......閱讀全文
定－量－PCR－技－術－簡－介
聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸擴增的有效工具，由于其靈敏、特異、快速等優點，在醫學上已廣泛應用與病毒、細菌病原體及遺傳病、腫瘤的早期診斷。隨著PCR技術的發展，特別是病毒或腫瘤的治療監測、疾病的診斷、機體基因表達調控方面，不僅需要檢測其存在是否
科技：預制菜的強心“技”
一條活蹦亂跳的錦鯉裝入袋中，抽真空后放入特制冰柜，魚瞬間被凍硬。取出“凍魚”，重新放回常溫水中，沒過多久，魚竟活了過來……“魚死復生”并非奇跡，而是此次食博會·預博會參展商聯泰集團去年從日本引進的“眠凍”技術。該技術能最大限度減少對魚類細胞的傷害，保留食材鮮活狀態和營養物質。有了這項技術的加持，
“技”高一籌，技爾攜新儀器與經典耗材亮相BCEIA展會
分析測試百科網訊 2021年9月27日-29日，第十九屆北京分析測試學術報告會暨展覽會（BCEIA 2021）在北京?中國國際展覽中心開幕。在本屆展會上，技爾（上海）商貿有限公司（以下簡稱“技爾”）展出了幾款特色儀器和實驗耗材。分析測試百科網作為展會支持媒體，為您帶來全程跟蹤報道。 技爾現場
島津寧夏高校技交會成功舉辦
2010年12月2日，島津寧夏高校技術交流會在寧夏省銀川市黃河明珠大酒店隆重召開。原計劃四、五十人的會議最終到場逾百位，全場座無虛席。用戶覆蓋寧夏各個本專科、職業技術學院，以及銀川和周邊城市所有高等院校，更是有其它行業，如CDC、企業用戶等聞訊前來。 會議由島津寧夏區域負責人黃俊
技防優先，生態環境文明建設
“生態環境執法要達到精準化、科學化、規范化就需要有科技的支撐。”6月29日，在生態環境部召開的新聞發布會上，生態環境部生態環境執法局局長趙群英說，生態環境執法工作已經實現或正在實現由“人防為主”轉向“技防優先”。 “如今的生態環境執法，不能再搞過去的人海戰術，要求我們必須把科技手段應用到生態環
周堯：只攻“雕蟲”小技
周堯（左二）在采集昆蟲標本 周堯，國際著名昆蟲學家，圣馬力諾共和國國際科學院院士，全國政協第六、七屆委員，九三學社中央委員，西北農林科技大學博士生導師；中國昆蟲學史學科奠基人，享有“蝶神”“蟲壇怪杰”“亞洲之光”等美譽。 周堯曾經感慨：“報國之日短，求學之日長。不殺大蟲，殺小蟲何用？”奈何“書劍
日本削減2013年科技預算
日本新預算案增加了對隼鳥2號小行星樣本返回飛船的資金支持圖片來源：日本宇宙航空研究開發機構 日本政府日前批準了一項始于4月的年度預算，看上去科學家成為了大輸家。占據大部分國家研究支出的文部科學省科技預算下降3.3%，只有132億美元。 一份更詳細的分析表明，科學家不用過于抱怨。文
旅美科協舉辦2016科技峰會
1月30日，中國旅美科技協會（旅美科協）2016波士頓科技峰會暨旅美科協波士頓分會成立慶典在哈佛大學醫學院舉辦。2009年諾貝爾生理學或醫學獎獲得者、美國國家科學院院士、哈佛醫學院杰克·紹斯塔克教授，美國國家工程院院士、麻省理工學院機械系主任陳剛教授作為特邀嘉賓進行大會演講，與大家分享他們在科學
海關總署發布熒光PCR儀等儀器設備招標公告
10日，從中國海關政府采購網獲悉，海關總署發布兩項招標公告，欲采購9臺熒光PCR儀、3臺微生物鑒定儀和1臺分歧桿菌培養檢測系統，采購總金額為600萬元。其中，四通道、五通道和六通道熒光PCR儀均有采購。 主要招標信息匯總如下：招標編號項目名稱包號品目名稱數量單價預算（元）CG2024-PL-G
2020“創世技”顛覆性創新榜發布
??10月21日，2020大眾創業萬眾創新活動周期間，第三屆“創世技”顛覆性創新榜發布暨顛覆性創新成果（海淀）轉化促進中心揭牌儀式在北京海淀舉辦。北京市人民政府副秘書長劉印春，國家發展改革委創新和高技術發展司副司長朱建武，中國科協科學技術傳播中心主任鄭浩峻，北京市發展改革委副主任林恩全，北京市海淀區
500余款機器人同臺“炫技”高精尖
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/8/484582.shtm 8月18日，2022世界機器人大會在北京亦創國際會展中心拉開帷幕，500余款機器人集中亮相，現場“炫技”高精尖。記者在現場看到，本次博覽會從應用需求端出發，匯聚了各類場景下的前沿
Avantor出席DCAT2011科技周
2011年3月14日，DCAT(Drug, Chemical & Associated Technologies Association)美國藥品和化學品聯合貿易協會2011年科技周(DCAT第85屆年度會議)于紐約市最豪華的Waldorf酒店拉開序幕，Avantor做為美國歷史最悠久的藥品
《自然》雜志展望2017年科技前景
時光的車輪在2016年科學史上留下了深深印記。隨著新年的到來，科學家們開始展望更加絢麗的未來圖景。他們希望：關于CRISPR-Cas9的ZL之爭能蓋棺定論、量子計算領域涌現出一位真正的王者、尋找地球兄弟“行星九”的努力有所突破…… 溫室氣體排放或降低 美國當選總統唐納德·特朗普曾稱，氣候變化
?“儀”技之長，儀電分析亮相BCEIA展會
分析測試百科網訊 在第十九屆北京分析測試學術報告會暨展覽會（BCEIA 2021）上，上海儀電分析儀器有限公司（以下簡稱“儀電分析”）展出了多款光譜儀、色譜儀和檢測器件。分析測試百科網作為展會支持媒體，全程跟蹤報道。 儀電分析現場展臺 先進的儀器設備引來不少從業者駐足咨詢 儀電分析自195
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多
Troubleshooting－for－PCR－and－multiplex－PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
PCR簡介/PCR儀
PCR的要素基本的PCR須具備PCR儀圖冊1.要被復制的DNA模板 Template2.界定復制范圍兩端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四種脫氧核苷酸）及水。 PCR儀工作原理利用升溫使DNA變性，在聚合酶的作用下使單鏈復制成雙鏈，進而達到基因復制
重疊PCR—overlap－PCR
1、簡介?重疊PCR也是基本的PCR原理：變性-退火-延伸。不同的是在重疊PCR過程是兩個或者幾個片段重疊延伸之后，再進行指數擴增的PCR過程。 ?2、基本原理*步：PCR產生兩個或者幾個片段，這幾個片段之間必須有重疊區。?第二步：以兩個片段為例，見上圖，*步產生的兩個片段，A D鏈之間有互補，B
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定.多重PCR(multiplex PCR)，又稱多重引物PCR或復合PCR，它是在同一PCR反應體系里加上二對以上引物，同時擴增出多個核酸片段的PCR反應，其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同.??? 多
普通PCR梯度PCR－原位PCR－熒光定量PCR儀的區別
普通PCR儀： 一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀，稱之為普通PCR儀，也就是傳統的PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。如；（ABI 2720） 梯度PCR儀： 一次性PCR擴增可以設置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱
反轉錄PCR（RTPCR,－Reversed－Transcript－PCR）
1 原理 RT—PCR是一種將cDNA合成與PCR技術結合分析基因表達的快速靈敏的方法，主要用于對表達信息進行檢測或定量分析,還可以用來檢測基因表達差異而不必構建cDNA文庫克隆cDNA。RT-PCR的模板可以為總RNA或poly(A)+選擇性RNA。逆轉錄反應可以使用逆轉錄酶，以隨機引物、ol
反向PCR（inverse－PCR）簡介
反向PCR是一種多聚合酶鏈式反應（PCR）應用的方法，可使已知序列的核心區邊側的未知DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA，以產生適合于PCR擴增大小的片段，然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區的末端序列，但其方向可使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開
反向PCR－（inversePCR）
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列，因此又可稱為染色體緩移或染色體步移。這時選擇的引物雖然與核心DNA區兩末端序列互補，但兩引物3’端是相互反向的。擴增前先用限制性內切酶酶切樣品DNA，然后用DNA連接
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬林；二甲苯；PBS操
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，使得靶基因檢測有了極大的改進。此技術是在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。一、組織切片和細胞樣品的制備試劑與配置10%福爾馬林；二甲苯；PBS操
PCR技術（十四）：反向PCR
描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法，使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA，以產生適合于PCR擴 增大小的片段，然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列，但其方向性，使鏈的延長經過環上的未知區而不是分開引
反向PCR－（inversePCR）
利用反向PCR可對未知序列擴增后進行分析，探索鄰接已知DNA片段的序列，并可將僅知部分序列的全長cDNA進行分子克隆，建立全長的DNA探針。可用于：（1）基因游走研究；（2）轉位因子研究；（3）已知序列DNA旁側病毒整合位點分析等研究。實驗方法原理反向PCR可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色
反向PCR－（inversePCR）
實驗方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位點側翼DNA序列非常有效的方法。?1. ?選擇合適的限制性內切酶位點。并在T-DNA的邊界（左邊界、右邊界均可）和酶切位點附近設計引物P1、P2；2. ?回收DNA，T4連接酶連接，使酶切后的DNA片段環化；3. ?回收連接后的DNA，用引物P1、P2做
菌落PCR（Colony－PCR）方法
菌落PCR（Colony PCR）可不必提取基因組DNA，不必酶切鑒定，而是直接以菌體熱解后暴露的DNA為模板進行PCR擴增，省時少力。建議使用載體上的通用引物。通常利用此方法進行重組體的篩選或者DNA測序分析。最后的PCR產物大小是載體通用引物之間的插入片斷大小。具體方法：1、PCR混合物的制備T
預算10903.05萬元，采購大戶海關總署科技司要采購哪些儀器？
中國海關政府采購網消息，2024年10月9日至16日期間，海關總署物資裝備采購中心陸續發布海關總署2024年科技司儀器設備采購招標公告，共計17個項目，累計預算金額10903.05萬元。 經統計，本次海關總署科技司采購的儀器設備中色譜、光譜和質譜儀器數量均超過10臺，其中質譜儀器15臺，色譜儀