離子細胞化學實驗 ——鈣離子細胞化學具體方法
離子細胞化學可用來顯示細胞內離子定位分布,目前用得比較多的是顯示細胞內鈣的分布,通常需結合EDX能譜分析。細胞內鈣離子分布是高度隔室化的,形成鈣離子濃度不同的鈣池,正常情況下,細胞內胞漿、線粒體、核等部位都有鈣的分布;在大多病理情況下(如缺血、缺氧、中毒等),細胞內鈣可升高,并且進入到細胞內的鈣很多進入到線粒體內。細胞內鈣離子細胞化學的原理是:首先用磷酸鹽或草酸鹽與鈣離子反應,在原位形成沉淀,然后再用焦銻酸鹽反應,替代磷酸鹽或草酸鹽形成焦銻酸鈣,焦銻酸鈣在電子顯微鏡下為電子致密物質。實驗材料組織試劑、試劑盒磷酸鉀戊二醛蔗糖焦銻酸鉀鋨酸實驗步驟1. 組織切成約 1 mm3 的小塊,用 0.09 mol/L 磷酸鉀(或草酸鉀)-3% 戊二醛(pH 7.3,用 0.1%~1% KOH 調 pH)固定 4 h 以上,4℃。也有人推薦固定早期用微波照射,以加速固定液滲入細胞內部(關于微波照射使用情況參見有關章節)。2. 固定后用......閱讀全文
離子細胞化學實驗——鈣離子細胞化學具體方法
離子細胞化學可用來顯示細胞內離子定位分布,目前用得比較多的是顯示細胞內鈣的分布,通常需結合EDX能譜分析。細胞內鈣離子分布是高度隔室化的,形成鈣離子濃度不同的鈣池,正常情況下,細胞內胞漿、線粒體、核等部位都有鈣的分布;在大多病理情況下(如缺血、缺氧、中毒等),細胞內鈣可升高,并且進入到細胞內的鈣很多
離子細胞化學實驗
實驗方法原理 實驗材料 組織試劑、試劑盒 磷酸鉀戊二醛蔗糖焦銻酸鉀鋨酸實驗步驟 1. 組織切成約 1 mm3 的小塊,用 0.09 mol/L 磷酸鉀(或草酸鉀)-3% 戊二醛(pH 7.3,用 0.1%~1% KOH 調 pH)固定 4 h 以上,4℃。也有人推薦固定早期用微波照射,以加速
示蹤細胞化學實驗
實驗方法原理 實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 NaOH戊二醛硝酸鑭鋨酸-二甲胂酸鈉緩沖液實驗步驟 1. 4% 硝酸鑭配制,PH 7.8,用 NaOH 調,邊加邊攪拌,使溶液呈乳白色。2. 15~25℃ 條件下,組織用 1%~1.5% 硝酸鑭、2%~3% 戊二醛-0.1 mol/L 二甲胂酸鈉緩沖液前
示蹤細胞化學實驗
由于高電子密度示蹤劑很容易在細胞間隙擴散,并且如果細胞發生損傷,示蹤劑還可進入到細胞中去,因此可利用此方法觀察細胞連接及細胞損傷情況。常用的示蹤劑有鑭、過氧化物酶等。一般采用孵育法,即組織塊在示蹤液中孵育。也有人采用血管灌注法,但基底膜可阻止示蹤劑進入細胞間隙或細胞內,因此一般只是在研究血管通透性改
電鏡酶細胞化學實驗
實驗方法原理 電鏡酶細胞化學反應分兩步:①細胞內酶在一定條件下與底物進行初級酶反應(形成初級產物);②應用捕捉劑與初級產物反應形成電子致密物質。電鏡酶細胞化學捕捉方法很多,最常用于水解酶類的為金屬鹽沉淀法和應用于氧化還原酶類的為嗜鋨物質形成法。金屬鹽沉淀法原理是酶反應初級產物與重金屬結合形成不溶解的
免疫酶細胞化學實驗技術
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色
細胞熒光化學實驗
熒光法較一般光學方法具有靈敏度高、特異性強、方法簡便等優點,因此近年來熒光組織化學特別是免疫熒光技術有了很大的發展。利用熒光技術可研究細胞內化學成分的分布與定位,研究細胞與組織中物質的吸收與轉運,進行病理鑒別以及細胞免疫等方面的研究。?當用一種波長的光(如紫外光)照射某種物質時,這種物質會在極短的時
免疫細胞化學技術觀察細胞成分實驗
實驗方法原理免疫細胞化學是在細胞化學技術的基礎上,吸收免疫學的理論和技術發展起來的一項技術,其基本原理是用熒光素或酶等標記物或顯色物標記特異性抗體,通過免疫學中的抗原抗體反應與細胞內的相應抗原結合,形成帶有熒光素或顯色物的抗原抗體復合物,因此可用熒光顯微鏡或普通光學顯微鏡觀察到復合物的存在,達到檢測
免疫細胞化學技術觀察細胞成分實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 免疫細胞化學是在細胞化學技術的基礎上,吸收免疫學的理論和技術發展起來的一項技術,其基本原理是用熒光素或酶等標記物或顯色物標記特異性抗體,通過免疫學中的抗原抗體反應與細胞內的相應抗原結合,形成帶有熒光素或顯色物的抗原抗體復合物,因
硫離子的化學式
硫離子的化學式S2-硫只可能得到2個電子,形成帶兩個單位負電荷的硫離子。所以使硫離子變為硫原子需失2個電子。正四價的硫和正六價的硫一般形成共價鍵,不會出現離子。硫的化學價比較多-2(H2S)+6(H2SO4)+4(H2SO3、SO2)如果是-2的S,那么就要得到2個電子如果是+6的S,那么就要失去6
離子選擇電極法測定離子鈣
【原理】鈣離子選擇電極膜與鈣離子結合,如果鈣離子在膜內、外兩面分布不勻,將產生一個跨膜電位,因為電極內溶液離子鈣濃度是恒定的,所以膜電位的變化與樣品中離子鈣濃度成正比。【操作】由于各種型號的離子鈣分析儀結構不同,有的是專用型(只測定離子鈣),有的是組合型,可同時測定鉀離子、鈉離子、氯離子或pH 值,
細胞組分的化學反應實驗
實驗方法原理 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量
免疫酶細胞化學實驗技術4
三、ICC在細胞功能研究中的應用 形態學研究目的之一是揭示組織細胞結構特征及其功能意義。利用ICC顯示給與細胞增殖標記物,是組織細胞學研究中形態和功能相結合的重要手段之一。目前常用的細胞增殖標記物有4種,Brdu (5—bromo—2--deoxyuridine), DNA polymerase
電鏡酶細胞化學實驗——樣品制備
目前電鏡能定位的酶主要有三類,它們是水解酶、氧化酶、轉移酶。通過電鏡酶細胞化學技術間接證明酶的存在,可定性研究細胞的標志酶,以及在正常和病理狀態下酶的改變與疾病之關系。實驗方法原理電鏡酶細胞化學反應分兩步:①細胞內酶在一定條件下與底物進行初級酶反應(形成初級產物);②應用捕捉劑與初級產物反應形成電子
細胞組分的化學反應實驗
Brachet反應細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示細胞內過氧化物酶的顯示過碘酸雪夫反應(PAS)實驗方法原理細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA
免疫酶細胞化學實驗技術3
一、對照實驗 1.吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳
免疫酶細胞化學實驗技術2
(四)染色原理及步驟 1.基本原理 酶標抗體與熒光色素標記抗體的染色相同,亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標記在每一抗體上,間接法是將酶標記在第二抗體上,檢測組織細胞內的特定抗原物質。間接法所用的第一抗體是對組織細胞內某種抗原的特異性抗體(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而絕大數單克隆
細菌細胞化學
1.細菌的化學組成主要有:水、無機鹽、蛋白質、糖類、脂類和核酸等,其中水占細胞總重量的75%~90%.細菌尚含有一些原核細胞型微生物所特有的化學成分,如肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、二氨基庚二酸、吡啶二羧酸等。2.細菌的物理性狀表現為:帶電現象,革蘭陽性菌等電點(pI)為2~3,革蘭陰性菌為4
細胞化學染色
細胞化學染色,是一種以形態為基礎,結合運用化學或生物化學技術對血細胞內各種化學成分作定位、定性及半定量分析的方法。用于研究血細胞生理、病理和化學結構;臨床上為某些血液病的診斷、鑒別診斷、療效觀察、預后監測和發病機制的探討,提供重要依據。血細胞化學染色的基本要求是在原位顯示細胞成分和結構,反應產物應是
如何檢驗鈣離子
如是液體樣品,加入草酸銨溶液,發生渾濁即含鈣離子。
全套熒光離子探的應用鈣離子與鋅離子
? ? ? ?無機陽離子和陰離子濃度不成比例的穩態維持是活細胞的特征,對于大多數細胞功能而言,跨不同區室的這些離子梯度的穩態調節至關重要。以空間和時間分辨率來測量這些離子的濃度對于研究細胞的生理學已經變得至關重要。離子探針提供了一種將離子通道激活與細胞內離子濃度的后續變化測定相關的方法。用這些類
化學中的特征離子是什么
特征粒子就是比較有特性能區別于其他離子的離子,比如有特定的顏色:Fe2+,Fe3+,Cu2+,他們的顏色分別是綠色、黃色、藍色,也可以是與其他離子生成沉淀:Ag+與Cl-可以生成AgCl白色沉淀,還有就是與一些物質發生反應有特定的現象,如碳酸根離子遇酸會放出氣體,還有一些會生成一些具有特征顏色的絡合
化學中離子數轉移表示方法
在用電子式書寫離子化合物形成的方程式中,離子數轉移的方向用剪頭表示。剪頭指向接受電子的一方。箭尾為失去電子的一方,所形成的離子化合物中:陽離子只標化合價,而陰離子需要標出周圍的最外層電子,并用方括弧括起來,標上化合價。
致癌化學物轉化細胞:轉化敘利亞地鼠胚胎細胞實驗
實驗概要致癌化學物轉化細胞實驗步驟1.取材:妊娠后第13天取材,取數個同窩胚胎,去頭和內臟,在無菌條件下剪碎至米粒大小,再用0.25%胰蛋白酶(含0.01%EDTA)37℃消化30分鐘,濾過、低速離心、吸除消化液、加入營養液、制備成細胞懸液、接種入1875px/培養瓶中,接種密度10~20×106/
實驗確定陽離子型和陰離子型絮凝劑用量和濃度的具體方法
以下是通過實驗確定陽離子型和陰離子型絮凝劑用量和濃度的具體方法:準備不同濃度的絮凝劑溶液:配制一系列不同濃度的陽離子型和陰離子型絮凝劑溶液,例如,從低到高設置多個濃度梯度。取等量的廢水樣品:準備多個相同體積的待處理廢水樣品。進行絮凝實驗:向每個廢水樣品中分別加入不同量(對應不同濃度)的絮凝劑。按照相
細胞化學詞匯細胞癌基因
中文名稱:細胞癌基因存在位置:正常的細胞基因組激活前作用:促進正常細胞生長增殖分化和發育激活后作用:使細胞發生惡性轉化定義:存在于正常的細胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進正常細胞生長、增殖、分化和發育等生理功能。細胞癌基因:存在于正常的細胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進正常細
質譜法中,離子源如采用化學離子化法
質譜分析法主要是通過對樣品的離子的質荷比的分析而實現對樣品進行定性和定量的一種方法。因此,質譜儀都必須有電離裝置把樣品電離為離子,有質量分析裝置把不同質荷比的離子分開,經檢測器檢測之后可以得到樣品的質譜圖,由于有機樣品,無機樣品和同位素樣品等具有不同形態、性質和不同的分析要求,所以,所用的電離裝置、
等離子體/化學刻蝕設備——等離子刻蝕機簡介
等離子刻蝕機,又叫等離子蝕刻機、等離子平面刻蝕機、等離子體刻蝕機、等離子表面處理儀、等離子清洗系統等。等離子刻蝕,是干法刻蝕中最常見的一種形式,其原理是暴露在電子區域的氣體形成等離子體,由此產生的電離氣體和釋放高能電子組成的氣體,從而形成了等離子或離子,電離氣體原子通過電場加速時,會釋放足夠的力
細胞化學基礎腺苷計算化學數據
疏水參數計算參考值(XlogP):無氫鍵供體數量:4氫鍵受體數量:8可旋轉化學鍵數量:2互變異構體數量:3拓撲分子極性表面積:140重原子數量:19表面電荷:0復雜度:335同位素原子數量:0確定原子立構中心數量:4不確定原子立構中心數量:0確定化學鍵立構中心數量:0不確定化學鍵立構中心數量:0
自由基顯示實驗_細胞化學法
實驗材料組織樣品試劑、試劑盒DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 緩沖液多聚甲醛鋨酸實驗步驟1. 組織取材后,即放入孵育液中,孵育 5 min。孵育液配方如下:DAB 2.5 mmol/L, MnCl2?0.5 mmol/L,Tris 4 mmol/L,CaCl2?2 mmol/