生物化學實驗基本技術：破碎技術
除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外，對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化，都需要事先將細胞和組織破碎，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有較堅固的纖維素、半纖維素組成的細胞壁，要采取專門的細胞破碎方法。1.機械破碎（1）研磨研磨是將剪碎的動物組織置于研缽或勻漿器中，加入少量石英砂研磨或勻漿，即可將動物細胞破碎，這種方法比較溫和，適宜實驗室使用。工業生產中可用電磨研磨。細菌和植物組織細胞的破碎也可用此法。（2）勻漿勻漿這是一種較劇烈的破碎細胞的方法，通常可先用家用食品加工機將組織打碎，然后再用10000r/min-20000r/min 的內刀式組織搗碎機（即高速分散器）將組織的細胞打碎，為了防止發熱和升溫過高，通常是轉10秒-20秒，停10秒-20秒，可......閱讀全文
生物化學實驗基本技術—破碎技術
除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外，對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化，都需要事先將細胞和組織破碎，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植
生物化學實驗基本技術：破碎技術
除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外，對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化，都需要事先將細胞和組織破碎，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植
生物化學實驗基本技術：破碎技術
除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外，對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化，都需要事先將細胞和組織破碎，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植
生物化學實驗基本技術：破碎技術
除了某些細胞外的多肽激素和某些蛋白質與酶以外，對于細胞內或多細胞生物組織中的各種生物大分子的分離純化，都需要事先將細胞和組織破碎，使生物大分子充分釋放到溶液中，并不丟失生物活性。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易不一，使用的方法也不相同，如動物臟器的細胞膜較脆弱，容易破碎，植
電泳技術：生物化學實驗常用技術3
三．凝膠孔徑的調節凝膠孔徑、機械性能(彈性)、透明度等在很大程度上取決于Acr和Bis二者的總濃度T%。T%越大，孔徑越小，機械強度則增加。凝膠的特性是分子篩效應。在聚合前調節單體的濃度來控制凝膠孔徑大小，有利于針對樣品分子大小，增加分辨力。為此可以根據分離樣品分子大小配制不同孔徑的凝膠。一般大孔膠
層析技術:生物化學實驗常用技術(3)
一、基本原理 是指混合物隨流動相流經固定相的層析柱時，混合物中各組分按其分子大小不同而被分離的技術。固定相是凝膠。凝膠是一種不帶電荷的具有三維空間的多孔網狀結構，凝膠的每個顆粒內部都具有很多細微的小孔，如同篩子一樣，小的分子可以進入凝膠網孔，而大的分子則被排阻于凝膠顆粒之外
層析技術:生物化學實驗常用技術(2)
在分配層析中，大多選用多孔物質作為支持物，利用它對極性溶劑的親和力，吸附某種極性溶劑作為固定相；用另一種非極性溶劑作為流動相。如果把待分離的混合物樣品點在多孔支持物上，在層析過程中，非極性溶劑沿支持物流經樣品點時，樣品中的各種混合物便會按分配系數大小流動相而向前移動。當遇到前方的固定相時，溶于流動相
電泳技術：生物化學實驗常用技術2
瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳是一種以瓊脂糖凝膠為支持物的凝膠電泳，其分析原理與其它支持物電泳的最主要區別是：它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。瓊脂糖凝膠具有網絡結構，直接參與帶電顆粒的分離過程，在電泳中，物質分子通過空隙時會受到阻力，大分子物質在泳動時受到的阻力比小分子大，因此在凝膠電泳中，帶電
層析技術:生物化學實驗常用技術(1)
層析技術是近代生物化學最常用的分離技術之一。它是利用混合物中各組分的理化性質（吸附力、分子形狀和大小、分子極性、分子親和力、分配系數等）的差異，在物質經過兩相中，不斷地進行交換、分配等過程。任何層析都具有兩個相，即固定相和流動相。固定相固定不動，流動相對固定相作單相的相對運動，從而推動樣品中各組分通
電泳技術：生物化學實驗常用技術1
帶電顆粒在電場作用下向著與其電性相反的電極移動的現象稱為電泳。如帶正電荷的粒子向負極移動，帶負電荷的粒子向正極移動。電泳技術是生物化學與分子生物學中的重要研究方法之一，利用電泳技術可分離許多生物物質，包括氨基酸、多肽、蛋白質、脂類、核苷、核苷酸及核酸等，并可用于分析物質的純度和分子量的測定等。電泳的
細胞破碎技術的基本信息
細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術，是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質（產品）的基礎。 結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展，以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。
細胞破碎技術
細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術，是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質（產品）的基礎。?結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展，以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。細胞破碎阻力 細菌? 幾乎所有細菌的細胞壁都是由肽聚糖（pep
基本實驗技術
I.?Safety ProceduresA. ChemicalsA number of chemicals used in this laboratory are hazardous. All manufacturers of hazardous materials are required by
生物樣品的前處理技術化學及生物化學法進行細胞破碎
主要是通過化學試劑或酶破壞細胞壁而使細胞破碎,常用的有如下一些方法。①自溶法? ?將待破碎的新鮮生物樣品存放在一定pH值和適當的溫度下,利用組織細胞中自身的酶系將細胞破壞,使細胞內含物釋放出來的方法。自溶的溫度,動物樣品常選在0~4℃,微生物材料則多在室溫下進行。自溶時,需加少量防腐劑如甲苯、氯仿等
細胞破碎儀的機械破碎技術
細胞破碎儀的破碎技術是怎樣的？在生物產物的分離提取中，如果目標物質為胞外產物（如霉菌產生的糖化酶等），其提取過程較簡單，只需直接進行固液分離，獲得澄清的濾液，再進行分離純化操作；如果目標物質為胞內產物或多細胞生物組織中的各種生物分子（如堿性磷酸酶等胞內酶、部分外源基因表達產業或植物細胞產物等），都需
FISH－技術基本實驗
實驗方法原理 試劑、試劑盒 70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液（PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材 水浴鍋增濕器玻片實驗步驟 一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%，如果房間濕度計顯示低于45%，則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±
FISH－技術基本實驗
實驗方法原理試劑、試劑盒70%乙醇SSC磷酸鹽緩沖溶液（PBS)Hemo-De清理試劑蛋白酶溶液儀器、耗材水浴鍋增濕器玻片實驗步驟一、制備培養的中期細胞標本1.在一個獨立小室里放置一個水浴鍋和一臺增濕器。濕度應大約50%，如果房間濕度計顯示低于45%，則應使用加濕器。2.預熱水浴鍋至67℃±2℃，在
FISH－技術基本實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 試劑、試劑盒 70%乙醇 SSC
細胞破碎技術的基本概念及其基本方法2
(3)膠體磨膠體磨的基本原理是流體或半流體物料在離心力的作用下，強制通過高速相對運動的定齒與動齒之間，使物料受到強大的剪切力，磨擦力、高頻振動和高速旋渦等復雜力等作用，有效地被粉碎、乳化、均質、混合，從而達到精細超微的效果。定轉子間的高速相對運動是使膠體磨工作獲得物理微細度的主要條件，只有提高磨盤的
細胞破碎技術的基本概念及其基本方法3
（6）凍結-融化法將細胞放在低溫（-150C），然后在室溫中融化，反復多次，細胞壁破裂。（7）干燥法經干燥后的菌體，其細胞膜的滲透性發生變化，同時部分菌體會產生自溶，然后用丙酮、丁醇或緩沖液等溶劑處理時，胞內物質就會被抽提出來。破碎率定義為被破碎細胞的數量占原始細胞數量的百分比數，即： Y(%)=[
細胞破碎技術的基本概念及其基本方法1
生物分離是從生物材料、微生物的發酵液、生物反應液或動植物細胞的培養液中分離并純化有關產品（如具有藥理活性作用的蛋白質等）的過程，又稱為下游加工過程。生物分離過程的主要特點:常無固定操作方法可循,生物材料組成非常復雜,分離操作步驟多，不易獲得高收率,培養液（或發酵液）中所含目的物濃度很低，而雜質含量卻
實驗技術：細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程： 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用
實驗技術：細胞培養基本技術
一、操作規程：1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用70％酒精擦拭無菌操作臺面,再
細胞破碎的技術概述
細胞破碎，細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術。細胞破碎分離提純某一種蛋白質時，首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來并保持原來的天然狀態，不喪失活性。所以要采用適當的方法將組織和細胞破碎。不同的生物體或同一生物體的不同部位的組織，其細胞破碎的難易
細胞破碎技術主要方法
樣品前處理-細胞破碎技術細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁，使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術，由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁，但成分不同，且同類細胞結成的網狀結構不同，因此其細胞壁的堅固程度不同，總體呈現遞增態勢。動物細胞雖沒有細胞壁，但具有細胞膜，也需要一定的細胞破碎方法來
動物實驗基本技術2
第五節 實驗動物的采血法實驗研究中，經常要采集實驗動物的血液進行常規質量檢測、細胞學實驗或進行生物化學分析，故必須掌握正確的采集血液的技術。采血方法的選擇，主要決定于實驗的目的和所需血量以及動物種類。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血：需血量很少時常用本法，如作紅、白細胞計數、血紅蛋白測定、制作
動物實驗基本技術3
第七節 實驗動物的處死當實驗中途停止或結束時，實驗者應站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物，原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安樂死。安樂死是指實驗動物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實驗動物安樂死方法的選擇取決于動物的種類與研究的課題。一、蛙 類常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊髓的
動物實驗基本技術1
第一節 實驗動物的抓取和固定在進行實驗時，為了不損傷動物的健康，不影響觀察指標，并防止被動物咬傷，首先要限制動物的活動，使動物處于安靜狀態，工作人員必須掌握合理的抓取固定方法。抓取動物前，必須對各種動物的一般習性有所了解。操作時要小心仔細、大膽敏捷、熟練準確、不能粗暴，不能恐嚇動物，同時，要愛惜動物
動物實驗基本技術4
三、實驗動物的準備本文主要敘述制備轉基因鼠的實驗程序。(一)不育雄性公鼠:結扎公鼠與母鼠交配以后產生假孕母鼠。受結扎的公鼠需8周以上，對種系無特殊要求。在正式實驗前，結扎公鼠需與性成熟的雌性小鼠交配，反復交配兩次或三次，經檢查雌體有陰道栓，但均不懷孕產仔，則證明結扎成功。結扎公鼠使母鼠產生陰道栓的能
動物實驗基本技術3
第七節 實驗動物的處死當實驗中途停止或結束時，實驗者應站在實驗動物的立場上以人道的原則去處置動物，原則上不給實驗動物任何恐怖和痛苦，也就是要施行安樂死。安樂死是指實驗動物在沒有痛苦感覺的情況下死去。實驗動物安樂死方法的選擇取決于動物的種類與研究的課題。一、蛙 類常用金屬探針插入枕骨大孔,破壞腦脊髓的