酵母總RNA的制備
試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 無水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸鈉 無 RNase 的水儀器、耗材 髙速離心機實驗步驟 一 材料與設備1)AE 緩沖液：50 mmol/L 乙酸鈉 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 緩沖液預先平衡）。3)10%SDS4) 酚：氯仿（1:1)。5) 氯仿6) 無水乙醇及 80% 乙醇.7)3mol/L 乙酸鈉8) 無 RNase 的水9) 髙速離心機。二 操作方法1) 離心收集 l0 ml 酵母細胞培養物，用 40ulAE 緩沖液重懸。轉移到 1.5 ml 離心管中。2) 加入 40ul10%SDS，混勻，再加入等體積 (440u1) 苯酚，渦旋混勻。3)65°C 溫育 4mim, 干冰/乙醇浴迅速冷卻直至出現苯酚結晶，最大轉速離心 2 min,. 上清轉移到一新管中。4）加入等體積酚：氯仿抽提，離心 5 min, 上清轉移到新管中，加......閱讀全文
酵母總RNA的制備
試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 無水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸鈉 無 RNase 的水儀器、耗材 髙速離心機實驗步驟 一 材料與設備1)AE 緩沖液：50 mmol/L 乙酸鈉 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 緩沖液預先平衡）。3)
酵母總RNA的制備
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 AE 緩沖液。 ? 苯酚 10%SDS ?酚 ?氯仿 ? 無水乙醇 乙醇. ?3mol L 乙酸鈉 ?無 RNase
2.5.1－酵母總RNA的制備
試劑、試劑盒AE 緩沖液。 苯酚10%SDS酚氯仿 無水乙醇乙醇. 3mol L 乙酸鈉無 RNase 的水儀器、耗材髙速離心機實驗步驟一 材料與設備1)AE 緩沖液：50 mmol/L 乙酸鈉 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 緩沖液預先平衡）。3)10%SDS4)
真菌總－RNA－的制備
真菌總 RNA 的制備 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 酚 氯仿 異戊醇 ?12mol L 氯化鋰
真菌總－RNA－的制備
試劑、試劑盒 酚氯仿異戊醇 12mol L 氯化鋰 3mol L 乙酸鈉 乙醇 DEPC 處理的水儀器、耗材 水浴 低溫高速離心機實驗步驟 一 材料與設備1) 酚：氯仿：異戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：異戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化鋰。4)3mol/L 乙酸鈉。5)70% 乙醇。
酵母菌RNA制備實驗
實驗材料 酵母菌試劑、試劑盒 TES酸性酚氯仿乙酸鈉乙醇儀器、耗材 離心管離心機搖床實驗步驟 1. ?酵母細胞在10 ml 培養基中生長至指數中期（OD600=1.0）。?2. ?將培養液轉移到50 ml，離心管，于4℃，1 500 g 離心3 min。?3. ?棄上清，菌體沉淀用1 ml 冰冷的水
2.6－真菌總－RNA－的制備
試劑、試劑盒酚氯仿異戊醇 12mol L 氯化鋰3mol L 乙酸鈉乙醇DEPC 處理的水儀器、耗材水浴低溫高速離心機實驗步驟一 材料與設備1) 酚：氯仿：異戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：異戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化鋰。4)3mol/L 乙酸鈉。5)70% 乙醇。6)DEPC
真核細胞總RNA的制備（Total－RNA－Isolation）1
從細胞中分離RNA的純度于完整性對于許多分子生物學實驗至關重要。如Northern印跡與雜交分析、寡聚（dT）纖維素選擇分離 mRNA，cDNA合成及體外翻譯等實驗的成敗，在很大程度上決定于RNA的質量。RNA分離的最關鍵因素是盡量減少RNA酶的污染。快速一步法提取總RNA組織及有核細胞在勻漿過程中
真核細胞總RNA的制備（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation?Guanidine-based isolation Objective: ?To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials ?Denaturing Solution
酵母菌RNA制備實驗—poly（A）+法
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒酚氯仿異戊醇儀器、耗材玻璃珠試管搖床培養箱離心機實驗步驟一、熱酸酚方案（基本方案1）1. ?TES及酸酚溶液的體積增加到4 ml。2. ?操作時使用50 ml 聚丙烯離心管。3. ?將得到大約10 mg RNA。?二、玻璃珠方案（備擇方案1）1. ?將體積增加到15 ml
動物組織/細胞總RNA的制備及檢測
實驗目的：使學生掌握采用Trizol抽提法從動物新鮮組織或細胞制備總RNA的實驗技術，以及用紫外分光光度法檢測RNA的純度及定量、用瓊脂糖電泳法檢測RNA的完整性及質量。實驗原理：Trizol是一種新型的總RNA即用型制備試劑，適用于從各種組織或細胞中快速分離總RNA。Trizol 試劑是由苯酚
酵母蛋白質和－RNA－的制備（稀堿法）
實驗概要本實驗介紹了從酵母中分離制備蛋白質和 RNA 的原理和方法。實驗原理酵母細胞富含蛋白質和核酸。用稀堿液（0.2% 的氫氧化鈉）處理酵母使細胞裂解，離心收集上清液，得到酵母核蛋白抽提液。用鹽酸調節抽提液 pH 至 3.0 （核蛋白的等電點），核蛋白溶解度下降大量沉出，離心收集沉淀物為酵母蛋白質
酵母菌RNA制備實驗—玻璃珠法
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒酚氯仿異戊醇儀器、耗材玻璃珠試管搖床培養箱離心機實驗步驟1. ?培養并收集酵母菌細胞，冷凍細胞沉淀。2. ?用300 μl RNA緩沖液中重懸細胞沉淀。?3. ?加1體積冷的酸洗玻璃珠（體積與約200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA緩沖液平衡的25：24 ：1酚/
酵母菌RNA制備實驗—熱酸性酚抽提法
實驗材料酵母菌試劑、試劑盒TES酸性酚氯仿乙酸鈉乙醇儀器、耗材離心管離心機搖床實驗步驟1. ?酵母細胞在10 ml 培養基中生長至指數中期（OD600=1.0）。?2. ?將培養液轉移到50 ml，離心管，于4℃，1 500 g 離心3 min。?3. ?棄上清，菌體沉淀用1 ml 冰冷的水重懸，轉
植物組織總RNA的制備：異硫氰酸胍—酚法
異硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT與β－巰基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT與 十二烷基肌氨酸鈉 （Sarcosyl）作用使蛋白質變性，從而釋放RNA；酸性條件下DNA極少發生解離，同蛋白質一起變性被離心下來，RNA則溶于上清中。該法所提RNA純度高完整性好較適合純化mRNA，
異硫氰酸胍酚法植物組織總RNA的制備
異硫氰酸胍—酚法提取RNA的原理如下：GIT與β－巰基乙醇共同作用抑制RNase的活性；GIT與 十二烷基肌氨酸鈉 （Sarcosyl）作用使蛋白質變性，從而釋放RNA；酸性條件下DNA極少發生解離，同蛋白質一起變性被離心下來，RNA則溶于上清中。該法所提 RNA純度高完整性好較適合純化mR
總RNA的提取
?完整RNA的提取和純化,是進行RNA方面的研究工作,如Nothern雜交、mRNA分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）有效地將ＲＮ
總RNA的提取
完整RNA 的提取和純化，是進行RNA 方面的研究工作，如Nothern雜交、mRNA 分離、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及體外翻譯等的前提。所有ＲＮＡ的提取過程中都有五個關鍵點，即１）：樣品細胞或組織的有效破碎；２），有效地使核蛋白復合體變性；３），對內源ＲＮＡ酶的有效抑制；４）
RNA的制備
來源于任何細胞的RNA都可以通過反轉錄酶的作用拷貝成雙鏈DNA并克隆化，獲得相應的于特定細胞來源的cDNA文庫。因此，RNA制備的意義有兩個方面?* 獲得特定細胞來源的cDNA文庫，克隆目的基因?* 分析基因的表達，闡明基因調控的特性，了解從基因轉錄產生RNA的結構，數量，水平及合成的速率抑制RNA
酵母DNA的小量制備
實驗方法原理通過消化細胞壁，然后用 SDS 裂解隨之產生的原生質體就可以制備酵母 DNA。用這種方法可重復性地制備若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性內切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。實驗材料酶解酶 100T酵母細胞試劑、試劑盒異丙醇醋酸鉀SDS醋酸鈉山梨糖醇緩沖液TE酵母
酵母DNA的小量制備
實驗方法原理 通過消化細胞壁，然后用 SDS 裂解隨之產生的原生質體就可以制備酵母 DNA。用這種方法可重復性地制備若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性內切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。實驗材料 酶解酶 100T酵母細胞試劑、試劑盒 異丙醇醋酸鉀SDS醋酸鈉山梨糖醇緩沖液T
酵母DNA的小量制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過消化細胞壁，然后用 SDS 裂解隨之產生的原生質體就可以制備酵母 DNA。用這種方法可重復性地制備若干毫克的酵母 DNA。得到的酵母 DNA 可被限制性內切核酸酶切割，也可用作 PCR 的模板。
酵母RNA提取與分離
一、目的：學習稀堿法提RNA的原理與技術。二、原理：由于RNA的來源和種類很多，因而提取制備方法也各異，一般有苯酚法、去污劑法和鹽酸胍法。其中苯酚法又是實驗室最常用的。組織勻漿用苯酚處理并離心后，RNA即溶于上層被酚飽和的水相中，DNA和蛋白質則留在酚層中，向水層加入乙醇后，RNA即以白色絮狀沉淀析
酵母DNA微量制備
實驗概要本實驗介紹了分別從40ml和5ml酵母培養液中制備酵母DNA的操作流程。實驗步驟1. 酵母DNA微量制備(40ml)?? 1) 在125ml三角瓶中用40ml YPD培養液在30℃條件下培養細胞達最大生長量(過夜)。?? 2) 將上述培養物移入螺蓋離心管，用醫用離心機或Sorvall SS-
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 β-巰基乙醇 儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Ra
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
試劑、試劑盒 乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材 轉子-定子均化器或類似設備 Marligen Rapid Total RNA System實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑乙醇,70%和100%β-巰基乙醇2.特殊設備轉子-定子均化器或類似設備3.其他Marligen Rapid Total RNA
利用－Marligen－總－RNA－快速純化系統純化總－RNA－實驗
由 Marligen Biosciences 提供的 Rapid Total RNA System 可從各種樣品中提取 RNA，且產量和質量非常穩定。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。試劑、試劑盒乙醇β-巰基乙醇儀器、耗材轉子-定子均化器或類似設備Marligen Rap
細胞總RNA的提取
提取細胞RNA的步驟：1)??六孔板每孔細胞中加入1ml Trizol，冰上放置5min，槍頭吹打。2)??將各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中，加入氯仿0.2ml/管，用力振搖15s。15－30℃下孵育2-3min，離心（4℃，12，000g，15min）。3)??離心后液體分為三層（上層－無色
小麥總RNA的提取
實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃化苗的葉片，迅速在液氮中研磨成粉末，轉入已準備好的離心管中，劇烈震蕩。
小麥總RNA的提取
實驗概要從黃化小麥苗中提取總RNA，可以為cDNA文庫的構建做好準備。實驗步驟1. 所有容器高溫滅菌兩次，DEPC高溫滅菌，所有的試劑用DEPC配制，高溫滅菌。2. 在一滅菌2mL管中加入：5mol/L異硫氰酸胍0.7mL、苯酚0.4mL、NaAc(pH4.0) 0.1mL。3. 稱取0.2g小麥黃